pcr抑制劑和增強劑(編輯修改稿)
2025-08-22 08:33 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 PCR反應。 ? 在高濃度時，許多添加劑和共溶劑都可以抑制 PCR，對不同濃度的引物和模板 DNA的組合都應該通過經(jīng)驗來確定其最適濃度。根據(jù)我們的觀點，當 PCR出現(xiàn)問題時首先考慮的不應該是使用這些增強劑，而應該是對反應體系的控制成分進行優(yōu)化，尤其是鎂離子和鉀離子的濃度。 這個普遍規(guī)律的一個例外是 GCMelt（ Clontech公司）的應用 ，我們發(fā)現(xiàn)它常常能夠克服和解決對富含 G+C的模板進行擴增時效率低下的問題。 ? 《 分子克隆實驗指南 》 ? Frackman et al.(1998) have demonstrated (using NMR analysis) that the PCR additive provided by QIAGEN in their PCR core kit (QSolution) and that provided by CLONTECH in the AdvantageGC cDNA PCR kit is in fact Betaine which is available at a fraction of the cost as a 5M solution from SigmaAldrich (cat. B 0300) ? 有的反應中， 、 ％的明膠（ gelatin）或非離子型的去污劑，可以解決一些擴增失敗的問題，這類試劑可以增加聚合酶的穩(wěn)定性，減少試劑在管壁上的吸附。 ? BSA可以抵抗血色素、黑色素等的抑制作用 . ? 非離子去污劑，例如 Tween174。20, NP40和 Triton174。 X
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