微生物實驗室標準操作程序質(編輯修改稿)
2025-08-21 00:47 本頁面
【文章內容簡介】 撥掉電源線，用專用設備將離心機轉子旋下，再用中性去污劑（70%的異丙醇/水混合物或乙醇去污染）清潔離心室；離心室內的橡膠密封圈經去污劑處理后，用水沖洗，再用甘油潤滑。轉子的清潔：轉子會被樣本殘留物污染，也可能會被某些化學試劑腐蝕，因此應對轉子每月進行清潔維護。每月用中性的清潔劑清潔轉子一次，并在儀器使用記錄本上作好記錄，以延長轉子的壽命。離心完畢后，應及時用干的軟布拭去離心室的冷凝水。（此步僅適用于冷凍離心機）離心結束后，使離心機蓋打開，然后關機。溫度計校準程序目的：保證溫度計的精確性。適用范圍：適用于本實驗室所使用的溫度計。職責：本SOP由室負責人落實。程序由設備科人員送質檢局對溫度計進行校準。每年進行1次。經校準過的溫度計可作為微量恒溫器溫度校溫的參照。引用表格：儀器設備校準記錄：tab_inst_cal上班后檢查細菌自動分析儀、血液自動培養(yǎng)儀工作是否正常，并做好記錄。從冰箱內取出當天所需的各種平板：5%綿羊血平皿、中國藍培養(yǎng)皿、淋病奈瑟菌培養(yǎng)皿、麥康凱平皿等。負責對上日進行的鑒定和藥敏結果進行分析。負責報告單的打印、核對、登記與錄入等工作，簽發(fā)已核對的所有報告。，對一些難得的菌株、標準菌株等要注意保存，并做好記錄。：核對各樣本與化驗單名是否一致，核查各送檢樣本是否符合要求，否則立即與病房聯系以便作出相應的處理，如退單或重送樣本等，并做好聯系情況的記錄。樣本編號：對合格的樣本作出編號。普通培養(yǎng)樣本的接種選擇：①痰液、咽拭子分別接種：血平皿、麥康凱平皿；②尿液接種：取100181。l接種血平皿、麥康凱平皿；③泌尿生殖道：血平板、麥康凱平板；④大便：SS或中國蘭、血平板；⑤各種無菌體液、腦脊液、膿液等標本：血平皿、麥康凱平皿，用增菌肉湯增菌；⑥衣原體、支原體培養(yǎng)+藥敏，按說明書接種支原體專用培養(yǎng)基；⑦真菌培養(yǎng)，各種標本均接種沙保弱平皿和真菌斜面培養(yǎng)基；⑧所有標本在接種的同時應進行涂片或對其沉渣進行革蘭或抗酸染色，并做相應的記錄。⑨規(guī)定：臨床申請單未明確注明培養(yǎng)目的時，一律按普通培養(yǎng)進行處理。標本送到實驗室后特殊培養(yǎng)標本需在1小時內接種，普通培養(yǎng)標本不得超過2小時。培養(yǎng)：一般標本接種后，平板應置于35OC培養(yǎng)箱培養(yǎng)，接種過腦脊液標本、泌尿生殖道標本的血平板還應置于5%10%CO2環(huán)境中；結核培養(yǎng)置于37OC培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每星期檢查兩次有否可疑菌落生長。收到的普通血培養(yǎng)瓶(如AER)應進行瓶內氣壓平衡處理，厭氧培養(yǎng)瓶直接放入培養(yǎng)箱中。對新到崗的實習或進修人員應認真交代本崗位的一切事宜并且認真作好帶教工作。厭氧培養(yǎng)應接種血平皿或厭氧平皿置于厭氧袋中培養(yǎng)，同時接種BMP進行普通培養(yǎng)。標本培養(yǎng)處理后幫助2班將需要的各種標本收集并滅菌處理。負責配制培養(yǎng)基，并做好記錄。崗位2班（負責菌株鑒定與藥敏的分析、涂片檢查標本的報告、室內質控等）。、冰箱的工作溫度是否在設定的范圍內，并做好記錄；檢查各種培養(yǎng)基及試劑的庫存量，做好需配制的培養(yǎng)基或需領出的試劑的記錄工作，對需購買的試劑、平板、培養(yǎng)基、染色液等應及時記錄并告訴室組長，以便及時計劃報主任批準。做好室內常用實驗試劑如觸酶、凝固酶、氧化酶或蛋白胨水的質量控制，并做好記錄。負責處理上日接種標本的菌種鑒定與藥敏試驗，觀察血液增菌培養(yǎng)瓶，如發(fā)現有細菌生長，應按三級報告制度處理。觀察培養(yǎng)平板，分析、挑取可疑菌落涂片革蘭染色，能上機的做好觸酶、凝固酶、氧化酶或接種蛋白胨水等相應的檢查后上機，還不能上機或手工試驗的則選用相應的平板分純。用于鑒定或藥敏試驗的菌落應選取培養(yǎng)1824小時的純菌落進行試驗。對一些不適合用儀器檢測的細菌，改用手工簽定或用標準的KB法進行藥敏。碰到異常的耐藥模式，如碰到耐萬古霉素的葡萄球菌、糞腸球菌，耐泰能的大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬等報告時一定要慎重。遇到可疑多重耐藥菌株時，加做特殊的藥敏紙片幫助鑒定。，物體表面菌落計數標本應于收到標本后2小時內處理，消毒液標本應于4小時內處理。處理方法按控感監(jiān)控標本處理與報告進行。：①抗酸染色嚴格按照操作規(guī)程，胸腹水、尿液、腦脊液等標本應在5000轉/分高速離心10分鐘后，取沉淀涂厚片，自然干燥后固定，按要求染色后鏡檢。②G雙球菌涂片，應用滾動式涂片法從波片一端涂向另一端，反復幾次，火焰固定后進行革蘭氏染色。③腦脊液隱球菌涂片，應快速離心后倒去上清液，沉淀涂片、加相應的優(yōu)質墨汁混勻后鏡檢。
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