微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序質(zhì)-資料下載頁
2025-07-25 00:47本頁面
【正文】 (含V、X因子)平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。2)尿液標(biāo)本取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線，再畫線分離后置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。3)引流液標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣畫線分離接種普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板，置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。4)痰液或咽拭子標(biāo)本無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板原始線，再畫線分離后置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出肺炎球菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本以無菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于血平板、布氏血平板成原始線，再分離畫線后置于C02缸，放入35℃溫箱培養(yǎng)。另取約1g標(biāo)本接種堿性蛋白胨水中，35℃溫箱培養(yǎng)2472小時，再轉(zhuǎn)種高鹽平板、中國蘭平板、山梨醇麥康凱平板。培養(yǎng)第2472小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出弧菌、螺桿菌等細(xì)菌。6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本標(biāo)本置無菌管中，加入增菌液2ml，35℃溫箱培養(yǎng)48小時觀察培養(yǎng)液有無混濁，采樣轉(zhuǎn)種血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線，再畫線分離后置于C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。抗酸培養(yǎng)陰性操作程序仔細(xì)查對標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報告：液性引流標(biāo)本(如腹水、尿液、CSF等)直接離心留沉淀物，雜菌污染標(biāo)本(如大便、痰等)取樣置無菌管，加入1NNaOH1ml作用30分鐘，再加入1NHCl1ml中和，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，取沉淀物100181。l量接種羅氏培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。每星期觀察一至兩次培養(yǎng)基斜面，結(jié)果連續(xù)觀察七個星期以上未發(fā)現(xiàn)有可疑菌落生長，報告未培養(yǎng)出分枝桿菌。支原體培養(yǎng)檢驗(yàn)操作程序一、接收標(biāo)本：標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對正確，標(biāo)本質(zhì)量合格。二、標(biāo)本處理：接種Uu、Mh培養(yǎng)藥敏一體試劑盒：操作前將所需試劑取出置室溫30分鐘。A排第一孔加入培養(yǎng)液100181。L作為陰性對照；將標(biāo)本拭子直接放入培養(yǎng)液中充分振蕩并在瓶壁擠干拭子，若為男性尿液取離心沉淀物150181。L或陽性標(biāo)本取50181。L于培養(yǎng)液中混勻。將混有標(biāo)本的培養(yǎng)液各100181。L加入A排余下及B排各孔中；各孔加礦物油覆蓋，置于37℃溫箱培養(yǎng)。第248小時分別觀察記錄結(jié)果。結(jié)果判斷原理：培養(yǎng)基含有相應(yīng)支原體生長所需的蛋白質(zhì)、馬血清、生長因子、底物及酚紅指示劑，當(dāng)有支原體生長時，底物被分解，使PH值升高，培養(yǎng)基由橙黃色變成紅色，且清亮為陽性。培養(yǎng)基不變色為陰性。B1孔陽性為解脲支原體陽性；B2孔陽性為人型支原體陽性。藥敏孔A排為高濃度，B排為低濃度，變紅則耐藥，不變紅示敏感而不生長。當(dāng)高濃度與低濃度兩孔均不生長(不變色)為該藥敏感；高濃度不變色低濃度變紅為該藥物中介；高濃度與低濃度均變紅為該藥物耐藥。結(jié)果一：第24小時B1孔由橙黃色變成紅色示解脲支原體陽性，藥敏看結(jié)果判斷；第24小時、48小時觀察B2孔均不變色，示無人型支原體生長或濃度極低，報告培養(yǎng)出解脲支原體，未培養(yǎng)出人型支原體。結(jié)果二：第24小時B1孔不變色示解脲支原體陰性；第48小時觀察B2孔由橙黃色變成紅色示人型支原體陽性，藥敏看結(jié)果判斷。報告未培養(yǎng)出解脲支原體，培養(yǎng)出人型支原體附藥敏結(jié)果。結(jié)果三：第24小時B1孔由橙黃色變成紅色示解脲支原體陽性，藥敏看結(jié)果判斷；第48小時觀察B2孔由橙黃色變成紅色示人型支原體陽性，藥敏看結(jié)果判斷，報告培養(yǎng)出解脲支原體與人型支原體附藥敏結(jié)果。結(jié)果四：陽性對照孔由橙黃色變成紅色示支原體陽性，藥敏看結(jié)果判斷；第24小時、48小時觀察B1孔、B2孔均不變色，示無解脲、人型支原體生長或濃度極低，報告培養(yǎng)出非解脲、人型支原體或囑病人重留標(biāo)本復(fù)查。結(jié)果五：第248小時觀察B1孔、B2孔均不變色，示無支原體生長或濃度極低，報告未培養(yǎng)出解脲及人型支原體。
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