免疫學(xué)質(zhì)量控制流程(編輯修改稿)
2025-08-19 12:18 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 計誤差s，并用177。：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶血液（測定波長為490nm，校正波長為585nm），先后于8個通道檢測，每個通道測3次，比較各組之間是否具有統(tǒng)計學(xué)差異，以考察雙波長消除干擾組分的效果?！緲吮镜牟杉捅４妗?，因紅細胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質(zhì)干擾立可讀方法的結(jié)果，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本會增加非特異性顯色造成假陽性。，因菌體中可能含有內(nèi)源性HRP也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。，建議盡量不用抗凝血尤其是不使用用肝素抗凝劑。，使間接法的試劑本底加深，一般血清置4℃冰箱5天內(nèi)完成測試。如需保存一周以上則要20℃冰凍保存，凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，融解時應(yīng)上下顛倒充分混勻，同時避免氣泡?？缮舷骂嵉够旌?，不要在混勻器上強烈振蕩。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落，如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。5. ELISA的靈敏度1ng/ml水平上,標本間的污染要盡量避免，尤其不應(yīng)與生化試驗用同一管標本?！痉治鲋匈|(zhì)控】ELISA實驗的結(jié)果受操作影響很大，每個步驟包括加樣，溫育，洗滌，顯色，酶標儀讀數(shù)均應(yīng)認真負責(zé)才能充分發(fā)揮ELISA的高靈敏，強特異的優(yōu)點。因此,應(yīng)建立實驗項目的標準操作程序(SOP)。1. 加樣[1] 加樣應(yīng)用微量移液器（加樣槍）按規(guī)定的量加入微孔板底部，避免加在孔壁上部，不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。[2] 每次加樣應(yīng)更換吸嘴，做到一人一吸頭，以免發(fā)生交*污染。干吸頭預(yù)先在血清中抽吸三次。[3] 樣本稀釋，目的是為了減少非特異性反應(yīng)，所以一定要先加稀釋液后加樣本，特別注意加樣后要在微量振蕩器上振蕩30秒鐘，同時注意防止液體溢出。如后面操作步驟中加二種以上試劑時均需振蕩混勻。[4] 如用滴瓶滴加試劑應(yīng)先將滴瓶搖勻并擠去第一滴有氣泡的試劑后加樣。2. 溫育[1] 抗原抗體反應(yīng)需要在一定溫度下（37176。C），經(jīng)過一定的時間才能達到反應(yīng)的平衡點[
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