免疫學質量控制流程(編輯修改稿)
2025-08-19 12:18 本頁面
【文章內容簡介】 計誤差s，并用177。：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶血液（測定波長為490nm，校正波長為585nm），先后于8個通道檢測，每個通道測3次，比較各組之間是否具有統(tǒng)計學差異，以考察雙波長消除干擾組分的效果?！緲吮镜牟杉捅４妗?，因紅細胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質干擾立可讀方法的結果，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本會增加非特異性顯色造成假陽性。，因菌體中可能含有內源性HRP也會產生假陽性反應。，建議盡量不用抗凝血尤其是不使用用肝素抗凝劑。，使間接法的試劑本底加深，一般血清置4℃冰箱5天內完成測試。如需保存一周以上則要20℃冰凍保存，凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，融解時應上下顛倒充分混勻，同時避免氣泡?？缮舷骂嵉够旌?，不要在混勻器上強烈振蕩。反復凍融會使抗體效價跌落，如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。5. ELISA的靈敏度1ng/ml水平上,標本間的污染要盡量避免，尤其不應與生化試驗用同一管標本?！痉治鲋匈|控】ELISA實驗的結果受操作影響很大，每個步驟包括加樣，溫育，洗滌，顯色，酶標儀讀數(shù)均應認真負責才能充分發(fā)揮ELISA的高靈敏，強特異的優(yōu)點。因此,應建立實驗項目的標準操作程序(SOP)。1. 加樣[1] 加樣應用微量移液器（加樣槍）按規(guī)定的量加入微孔板底部，避免加在孔壁上部，不可濺出，不可產生氣泡。[2] 每次加樣應更換吸嘴，做到一人一吸頭，以免發(fā)生交*污染。干吸頭預先在血清中抽吸三次。[3] 樣本稀釋，目的是為了減少非特異性反應，所以一定要先加稀釋液后加樣本，特別注意加樣后要在微量振蕩器上振蕩30秒鐘，同時注意防止液體溢出。如后面操作步驟中加二種以上試劑時均需振蕩混勻。[4] 如用滴瓶滴加試劑應先將滴瓶搖勻并擠去第一滴有氣泡的試劑后加樣。2. 溫育[1] 抗原抗體反應需要在一定溫度下（37176。C），經(jīng)過一定的時間才能達到反應的平衡點[
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