紙層析法分離氨基酸實驗報告(編輯修改稿)
2025-08-16 04:50 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 的大小與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、溶劑系統(tǒng)、層析濾紙的質(zhì)量和層析溫度等因素有關。本實驗利用紙層析法分離氨基酸。四、實驗試劑和器材實驗試劑： (1mg/mL) 亮氨酸、甘氨酸和脯氨酸標準液。 %甲酸 %茚三酮丙酮溶液 (每種氨基酸500mg/mL) 實驗器材： 、線、尺。 (高約430mm,直徑約290mm，具磨口塞)五、操作步驟標準氨基酸紙上層析單向上行層析氨基酸Rf值的測定：選用國產(chǎn)新華 1號濾紙， 6cm7cm。在距濾紙2cm處劃線，用鉛筆在線上標上四個點作為點樣位子（留出縫線空間）。：①點樣要合適，樣品點的太濃，斑點易擴散或拉長，以致分離不清；②用毛細管吸取氨基酸樣品，與濾紙垂直方向輕輕碰觸點樣處的中心，這時樣品就自動流出；③，點樣過程中必須在第一滴樣品干后再點第二滴，為使樣品加速干燥，可用吹風機吹干，但要注意溫度不可過高，以免氨基酸破壞，影響定量結(jié)果；④將點好樣品的濾紙兩側(cè)比齊，用線縫好，揉成筒狀。注意縫線處紙的兩邊不要接觸。避免由于毛細管現(xiàn)象使溶劑沿兩邊移動特別快而造成溶劑前沿不齊，影響Rf值。 (注意濾紙不要碰皿壁)，當溶劑展層至距離紙的上沿約1cm時，取出濾紙，立即用鉛筆標出溶劑前沿位置。：待展層基本結(jié)束后, 置65℃鼓風箱中1020min，鼓風保溫，濾紙上即顯出紫紅色/黃色斑點。：用尺測量顯色斑點的中心與原點(點樣中心)之間的距離和原點到溶劑前沿的距離，求出此值，即得氨基酸的Rf值。計算出 3種氨基酸在酸系統(tǒng)中的Rf值，判斷待測樣組成。酸溶
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