常用免疫學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及方法(編輯修改稿)
2025-08-14 23:46 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 oimmunoassay) 放射免疫測(cè)定通常用于測(cè)定組織液和血液中的激素水平 。 放射免疫分析多數(shù)用 125I來(lái)標(biāo)記抗體 。 被檢測(cè)抗原即未標(biāo)記物 ， 通常吸附在固相載體中 ， 如多孔酶聯(lián)塑料板或試管中 。 在此固相載體中標(biāo)記的特異性抗體與特定的未標(biāo)記抗原產(chǎn)生特異性免疫結(jié)合 。 非特異性吸附可以通過(guò)加入過(guò)量的非特異性卵磷脂蛋白或洗滌液來(lái)封閉 。 未結(jié)合的標(biāo)記抗體則用洗液去除 。 最終特異性結(jié)合的抗原 、 抗體復(fù)合物殘留在反應(yīng)板或試管中 。 用 125I標(biāo)記的抗體 ， 其放射性強(qiáng)度可以直接測(cè)定 。 (三 )免疫熒光技術(shù) (immunofluorescence technology) 免疫熒光技術(shù)的原理是將熒光色素與特異性抗體 (或抗原 ， 但少用 )以化學(xué)的方式結(jié)合起來(lái) ， 但不影響該血清抗體的免疫特性 。 而后將熒光標(biāo)記了的抗體作為一個(gè)試劑 ， 在特定的條件下浸染標(biāo)本 ， 使之與標(biāo)本中相應(yīng)的抗原產(chǎn)生結(jié)合反應(yīng) 。 這個(gè)反應(yīng)的結(jié)果 —— 含有熒光標(biāo)記的抗原 、 抗體結(jié)合物 ， 可用熒光顯微鏡來(lái)觀察之 。 (四 )免疫組織化學(xué)技術(shù) (immunolhistochemistry) 檢測(cè)組織切片中蛋白分子在細(xì)胞中分布的另一種方法 (類(lèi)似于免疫熒光技術(shù) )為免疫組織化學(xué)技術(shù) 。 該方法是用化學(xué)的方法將酶與抗體結(jié)合起來(lái) (類(lèi)似于 ELISA)， 然后將標(biāo)記的抗體與組織切片中的抗原產(chǎn)生特異性的結(jié)合 。 結(jié)合后的抗原 、 抗體復(fù)合物中含有的酶可將再加入的無(wú)色酶底物通過(guò)化學(xué)反應(yīng)呈色 ， 最終借助顯微鏡在細(xì)胞 、 亞細(xì)胞水平檢測(cè)各種抗原物質(zhì)及其分析 。 (五 )免疫印跡技術(shù) (immunoblot) 免疫印跡技術(shù)也稱(chēng) Western blot或蛋白印跡技術(shù) (protein blot)，是 20世紀(jì) 70年代末 80年代初發(fā)展起來(lái)的一種蛋白質(zhì)抗原檢測(cè)新技術(shù) 。其基本過(guò)程是將蛋白質(zhì)樣品 (如血清或細(xì)胞組織碎片 )在凝膠電泳中分離 ， 再通過(guò)電轉(zhuǎn)染將已分離的蛋白南分子轉(zhuǎn)移到固相膜上 ， 然后在固相膜上用標(biāo)記 (放射標(biāo)記或酶標(biāo)記 )的特異性抗體檢測(cè)蛋白質(zhì)抗原煤 。免疫印跡技術(shù)結(jié)合了凝膠電泳分辯力高和固相免疫測(cè)定敏感 、 簡(jiǎn)便 、穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn) 。 (六 )免疫電泳技術(shù) 免疫電泳技術(shù)是電泳分析與沉淀反應(yīng)的結(jié)合產(chǎn)物 。 這種技術(shù)有兩大優(yōu)點(diǎn) ， 是一加快了沒(méi)淀反應(yīng)的速度 ， 二是將一些蛋白質(zhì)組分利用其電荷的不同將其分開(kāi) ， 再分別與抗體反應(yīng) ， 以其沉淀線(xiàn)的最高抗
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