常用免疫學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及方法-免費(fèi)閱讀
【正文】 第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因動物 一 、 轉(zhuǎn)基因動物的概念及發(fā)展史 轉(zhuǎn)基因動物 (transgeni animal)是指所有細(xì)胞基因組中穩(wěn)定地整合由人工導(dǎo)入的外源基因 ， 能正常表達(dá)并能遺傳給后代的一類動物 。 嗣后 ， 退火引物可在 DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸 。 1. 免疫電泳 2. 對流免疫電泳 3. 火箭免疫電泳 4. 免疫固定電泳 5. 聚丙烯酰胺凝膠電泳 第三節(jié) 細(xì)胞免疫學(xué)技術(shù) 一 、 白細(xì)胞的分離 血液中紅細(xì)胞與白細(xì)胞比例為 600:1~1000:1， 兩者的比重不同 ， 其沉降速度亦異 ， 通常用兩種方法加以分離 。 (四 )免疫組織化學(xué)技術(shù) (immunolhistochemistry) 檢測組織切片中蛋白分子在細(xì)胞中分布的另一種方法 (類似于免疫熒光技術(shù) )為免疫組織化學(xué)技術(shù) 。 在此固相載體中標(biāo)記的特異性抗體與特定的未標(biāo)記抗原產(chǎn)生特異性免疫結(jié)合 。 產(chǎn)生方法： B細(xì)胞克隆與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞 3. 基因工程抗體 (engineer antibody) 應(yīng)用抗體庫技術(shù)產(chǎn)生 方法：將某種動物所有抗體的可變區(qū)基因克隆到質(zhì)?；蚴删w中并表達(dá) ， 然后利用不同抗原篩選出攜帶特異抗體的基因克隆 ， 從而獲得特異性抗體 。常用免疫學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及方法 第一節(jié) 免疫學(xué)方法概論 一 、 免疫學(xué)方法的發(fā)展史 1976年： Jenner發(fā)明了接種牛痘方法預(yù)防天花 2個世紀(jì)后被廣泛接受 ， 1979年 （ WHO） 天花滅跡 。 三 、 抗體的應(yīng)用及其相應(yīng)的免疫學(xué)技術(shù) (一 )ELISA ELISA的基本原理是利用酶標(biāo)記抗體或抗原 ， 使之成為酶標(biāo)抗體 (或抗原 )。 非特異性吸附可以通過加入過量的非特異性卵磷脂蛋白或洗滌液來封閉 。 該方法是用化學(xué)的方法將酶與抗體結(jié)合起來 (類似于 ELISA)， 然后將標(biāo)記的抗體與組織切片中的抗原產(chǎn)生特異性的結(jié)合 。 1. 自然沉降法 2. 聚合物加速沉降法 二 、 外周血單個核細(xì)胞的分離 外周血單個核細(xì)胞包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞 ， 其體積 、形態(tài)和密度與其他細(xì)胞不同 ， 紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞密度較大 ， 為 ， 而淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞密度為 ， 血小板為 。 上述過程是由溫度控制的 。僅有部分組織細(xì)胞的基
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