常用免疫學相關實驗技術及方法(專業(yè)版)
【正文】 (一 )高溫變性 基因組模板 DNA加熱至 9095度 ， 可使 DNA雙螺旋結構解鏈成為單鏈 。其基本過程是將蛋白質樣品 (如血清或細胞組織碎片 )在凝膠電泳中分離 ， 再通過電轉染將已分離的蛋白南分子轉移到固相膜上 ， 然后在固相膜上用標記 (放射標記或酶標記 )的特異性抗體檢測蛋白質抗原煤 。 加入酶反應的底物后 ， 底物被酶催化變?yōu)橛猩a物 ， 其量與標本中受檢物質的量直接相關 ， 故可根據(jù)反應顏色的深淺來進行定性或定量分析 。 合成肽與載體蛋白連接后能有效誘導抗體產生免疫應答 常用方法： tea bag method 純化方法：反向高效液相色譜法 二 、 抗體制備 1. 多克隆抗體制備 (polyclonal antibody) 多克隆抗體是指在自然免疫或免疫動物后產生的具有不同特異性和親和性的多種抗體混合分子 。 (三 )免疫熒光技術 (immunofluorescence technology) 免疫熒光技術的原理是將熒光色素與特異性抗體 (或抗原 ， 但少用 )以化學的方式結合起來 ， 但不影響該血清抗體的免疫特性 。 在 DNA聚合酶催化的一系列合成反應中 ， 用兩段寡核苷酸作為反應的引物 。 產生轉基因動物的關鍵技術包括： （ 含人工染色體 ） ； ； ， 使轉基因胚胎發(fā)育； 、 篩選理想的轉基因動物品系 。 常用的分 Ficoll和 Percoll兩種 。 最終特異性結合的抗原 、 抗體復合物殘留在反應板或試管中 。 19世紀 80年代： Pasteur預防雞霍亂的疫苗 狂犬病疫苗 1888： Behring發(fā)現(xiàn)了抗體 Methchnikoff發(fā)現(xiàn)了巨噬細胞 20世紀初：發(fā)現(xiàn)了調理素 ， 體液因素可影響吞噬細胞功能 19001930：認識了過敏反應 ， 發(fā)現(xiàn)了血清病 Arthus反應 ， 皮膚反應 調理作用 ， 補體結合反應 疫苗研究有了新發(fā)展： BCG—— 結核 白喉毒素 —— 白喉 19351957：抗體純化 ， 鑒定及測定技術 、
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