常用免疫學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及方法(專業(yè)版)
【正文】 (一 )高溫變性 基因組模板 DNA加熱至 9095度 ， 可使 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈成為單鏈 。其基本過程是將蛋白質(zhì)樣品 (如血清或細(xì)胞組織碎片 )在凝膠電泳中分離 ， 再通過電轉(zhuǎn)染將已分離的蛋白南分子轉(zhuǎn)移到固相膜上 ， 然后在固相膜上用標(biāo)記 (放射標(biāo)記或酶標(biāo)記 )的特異性抗體檢測(cè)蛋白質(zhì)抗原煤 。 加入酶反應(yīng)的底物后 ， 底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物 ， 其量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān) ， 故可根據(jù)反應(yīng)顏色的深淺來進(jìn)行定性或定量分析 。 合成肽與載體蛋白連接后能有效誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生免疫應(yīng)答 常用方法： tea bag method 純化方法：反向高效液相色譜法 二 、 抗體制備 1. 多克隆抗體制備 (polyclonal antibody) 多克隆抗體是指在自然免疫或免疫動(dòng)物后產(chǎn)生的具有不同特異性和親和性的多種抗體混合分子 。 (三 )免疫熒光技術(shù) (immunofluorescence technology) 免疫熒光技術(shù)的原理是將熒光色素與特異性抗體 (或抗原 ， 但少用 )以化學(xué)的方式結(jié)合起來 ， 但不影響該血清抗體的免疫特性 。 在 DNA聚合酶催化的一系列合成反應(yīng)中 ， 用兩段寡核苷酸作為反應(yīng)的引物 。 產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的關(guān)鍵技術(shù)包括： （ 含人工染色體 ） ； ； ， 使轉(zhuǎn)基因胚胎發(fā)育； 、 篩選理想的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物品系 。 常用的分 Ficoll和 Percoll兩種 。 最終特異性結(jié)合的抗原 、 抗體復(fù)合物殘留在反應(yīng)板或試管中 。 19世紀(jì) 80年代： Pasteur預(yù)防雞霍亂的疫苗 狂犬病疫苗 1888： Behring發(fā)現(xiàn)了抗體 Methchnikoff發(fā)現(xiàn)了巨噬細(xì)胞 20世紀(jì)初：發(fā)現(xiàn)了調(diào)理素 ， 體液因素可影響吞噬細(xì)胞功能 19001930：認(rèn)識(shí)了過敏反應(yīng) ， 發(fā)現(xiàn)了血清病 Arthus反應(yīng) ， 皮膚反應(yīng) 調(diào)理作用 ， 補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng) 疫苗研究有了新發(fā)展： BCG—— 結(jié)核 白喉毒素 —— 白喉 19351957：抗體純化 ， 鑒定及測(cè)定技術(shù) 、
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