實(shí)驗(yàn)十dna片段從瓊脂糖凝膠中的分離(編輯修改稿)
2025-08-14 22:10 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 中加入 1/10倍體積 3M NaAc ２倍體積預(yù)冷無(wú)水乙醇，于２０ ℃ 過夜。 ? １３． 12022g， 4℃ 下離心１０分鐘，得ＤＮＡ沉淀。 ? １４．棄上清，加入７０％乙醇洗滌２次后棄干乙醇。 ? １５．加入５０ μl ＴＥ溶解ＤＮＡ。 ? １６．?。保?μl ＤＮＡ溶液加入 2μl Loading buffer于０．８％瓊脂糖上， ４０伏電泳，３小時(shí)。 ? １７．在紫外透射儀上觀察結(jié)果。 ? １８．測(cè)定ＤＮＡ溶液 OD260,OD280值。 結(jié)果與分析 ? １．計(jì)算ＤＮＡ回收效率，判斷ＤＮＡ純度。 ? ２．記錄電泳結(jié)果 ? 問題與討論： ? １．電洗脫過程后，為什么要反向電泳１分鐘？ ? ２．電洗脫后的ＤＮＡ如何去除ＥＢ？ 玻璃奶法快速純化回收 DNA片段 本方法有多種用途，主要包括： ? 從瓊脂糖凝膠中分離純化 DNA片段； ? 從 DNA反應(yīng)物中純化目的 DNA片段，如回收純化 PCR產(chǎn)物、酶切連接反應(yīng)中的 DNA片段； ? 從探針制備反應(yīng)物中去除未標(biāo)記上的核苷酸以及小的 DNA片段（比如引物）； ? DNA濃縮、去鹽及去除雜質(zhì)。 ? 本試劑盒的主要成分“基因純”試劑是無(wú)毒、無(wú)味、無(wú)腐蝕作用的白色顆粒，能專一性結(jié)合 50kb大小的 DNA（雙鏈或單鏈，線性、環(huán)狀或超螺旋），不結(jié)合 RNA、蛋白質(zhì)、寡聚核苷酸、有機(jī)溶劑、去污劑及其它可能抑制酶活性的有機(jī)或無(wú)機(jī)物。 使用本法回收 DNA片段有以下優(yōu)點(diǎn)： ? 高純度 ：回收的 DNA片段基本上不含 RNA、蛋白質(zhì)及其它有機(jī)分子，可直接用于酶切、連接、探針制備、序列
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