小鼠腹水型肝癌淋巴道轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)doc(編輯修改稿)
2025-08-14 02:24 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 →95%酒精2~4小時(shí)或過夜→95%酒精2~4小時(shí)→100%酒精2~4小時(shí)→100%酒精2~4小時(shí)或過夜。2） 透明：二甲苯I 30~45分鐘；二甲苯Ⅱ 30~45分鐘。3） 浸蠟。蠟碗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ（各30~45分鐘）；包埋。4） 修蠟塊：修蠟塊，貼號(hào)。5） 切片。6） 烘烤。烘烤切片60~70攝氏度，1小時(shí)。7） 染色。⑵HE切片染色程序與方法1） 切片脫蠟水洗：將烘干的切片浸入二甲苯Ⅰ、Ⅱ各5~10分鐘。 無水酒精310分鐘（消除二甲苯）→95%酒精1~3分鐘→80%酒精1~3分鐘→70%酒精1~3分鐘→50%酒精1~3分鐘→自來水沖洗5分鐘以上（洗去切片上的酒精，切片透明）→蒸餾水清洗（防止污染蘇木精染液）。 脫蠟是水化過程，目的是通過酒精的緩沖作用，易于水洗與染色。因?yàn)槿緞┦撬?，從無水酒精直接放入染液中，容易引起激烈的擴(kuò)散作用，造成切片漂浮脫落或損傷組織。而經(jīng)各級濃度酒精緩沖后即可避免發(fā)生這種現(xiàn)象。2） HE染色蘇木精伊紅染色是先用蘇木精將組織切片適當(dāng)?shù)倪^染，經(jīng)水洗后再用鹽酸酒精分化，弱堿性水溶液顯藍(lán)。使胞核呈明顯的藍(lán)色，胞質(zhì)及背景無色。再經(jīng)水洗后用伊紅染胞質(zhì)，染成深淺不同程度的粉紅色至紅色。蘇木染色（染核）5~15分鐘→自來水沖洗3~5分鐘→%鹽酸酒精溶液分化數(shù)秒鐘→自來水洗1~5分鐘→弱堿性水溶液顯藍(lán)30~60秒→自來水沖洗5~10分鐘→蒸餾水洗1~2次→伊紅1分鐘→蒸餾水洗1~2次。3） 脫水、透明、封固：脫水、透明的目的是使存留在切片上的水分及漂浮的染色液全部除凈，經(jīng)透明劑的作用后，將脫水劑清除出來，使切片產(chǎn)生適宜的折光率。最后用蓋玻片及封固劑封固，便于觀察和長期保存。 80%酒精30~40秒→95%酒精30~60秒→無水酒精Ⅰ1~5分鐘→無水酒精Ⅱ1~5分鐘→二甲苯Ⅰ1~5分鐘→二甲苯Ⅱ1~5分鐘→中性樹膠封固。 鏡下觀察。三、結(jié)果21天觀察10只小鼠，最終存活8只，其中形成腫塊7只，3只形成的腫塊較大。成瘤率70%，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率70%。肉眼觀察：淋巴結(jié)較正常增大，皮下瘤體較大，與皮下組織粘附緊密，肝和腎臟可見腫瘤結(jié)節(jié)，較大腫瘤2**，灰白色，質(zhì)地較硬，從中間切開，發(fā)現(xiàn)腫塊大部分壞死，中心部分出現(xiàn)腔，腔內(nèi)有腫瘤壞死物質(zhì)。鏡下觀察，壞死組織粉染，輪廓尚存。殘存腫
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