【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 結(jié)扎冠狀動(dòng)脈法。藥物用上述模型進(jìn)行初篩后，再進(jìn)一步應(yīng)用電生理方法和心肌培養(yǎng)技術(shù)研究藥物作用的分子機(jī)制。抗心肌缺血的實(shí)驗(yàn)方法有：①心臟和冠脈血流測(cè)定。②心肌氧代謝實(shí)驗(yàn)。@藥物誘發(fā)心肌缺血實(shí)驗(yàn)：垂體后葉索、麥角堿、異丙腎上腺素或腎上腺素。④冠狀動(dòng)脈結(jié)扎弓I起心肌梗死實(shí)驗(yàn)。⑤心臟灌流實(shí)驗(yàn)。涉及心血管系統(tǒng)藥理實(shí)驗(yàn)方法研究的常見(jiàn)中藥有溫里藥、平肝息風(fēng)藥、活血化瘀藥、補(bǔ)益藥和理氣藥。藥物對(duì)離體蛙心的作用【目的】①學(xué)習(xí)斯氏(Straub)離體蛙心灌流法。②觀察藥物對(duì)離體蛙心收縮強(qiáng)度、節(jié)律和心輸出量的影響?！驹怼繌?qiáng)心苷在一定劑量下能直接抑制心肌細(xì)胞膜上Na+K+ATP酶的活性，使細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子增多，產(chǎn)生正性肌力、負(fù)性頻率作用。此作用在心力衰竭心臟更明顯?！静牧稀縿?dòng)物：蛙。藥品：5％洋地黃溶液(％毒毛旋花苷G溶液)、生附子水煎醇沉液lg/ml、制附子水煎醇沉液1g/ml、四逆湯水煎醇沉液1g/ml。試劑：任氏液、低鈣任氏液(其中CaCl2含量為一般任氏液的1/4)。器材：手術(shù)器械一套、蛙板、探針、八木氏蛙心插管、蛙心夾、鐵支架、雙凹夾、長(zhǎng)柄木夾、小燒杯、滴管、棉線、生物信號(hào)采集系統(tǒng)(或多道生理記錄儀)、張力換能器?！痉椒ā咳⊥芑蝮蛤?只，用探針毀腦及脊髓，仰臥位固定于蛙板上。正中間剪開(kāi)胸部皮膚，然后開(kāi)胸，剪開(kāi)心包，暴露心臟。在主動(dòng)脈分叉處下穿一線，打個(gè)松結(jié)，備結(jié)扎插管之用。于主動(dòng)脈分叉稍上方的左主動(dòng)脈上剪一“v”形小口，將盛有任氏液的蛙心套管插入主動(dòng)脈，并通過(guò)主動(dòng)脈球轉(zhuǎn)入左后方左心室，然后將套管用線應(yīng)結(jié)扎固定在套管小鉤上(離體蛙心制備見(jiàn)圖8—1一1)。將管內(nèi)帶血的任氏液吸出，以防止血塊堵塞套管。心臟搏動(dòng)時(shí)，可見(jiàn)液面隨著在管內(nèi)上下波動(dòng)。剪斷主動(dòng)脈，提起心臟。于靜脈竇下方將其余血管一起結(jié)扎(勿傷及或結(jié)扎靜脈竇)。分離周?chē)M織使心臟離體，并用任氏液連續(xù)換洗直至無(wú)血色。將蛙心套管固定于鐵架臺(tái)，用蛙心夾在心舒期夾住心尖部，連接于機(jī)械張力換能器并與生物信號(hào)采集系統(tǒng)相連，待收縮穩(wěn)定后開(kāi)動(dòng)記錄儀。進(jìn)入“蛙心灌流”界面，選擇適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)參數(shù)，即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。記錄正常的心臟活動(dòng)曲線，然后按以下順序加藥或試劑，注意觀察圖形的變化：①換入低鈣任氏液。②當(dāng)心臟收縮顯著減弱時(shí)，向套管內(nèi)加入5％洋地黃溶液(％毒毛旋花苷G溶液)。中藥可用：生附子水煎醇沉液1g/ml、制附子水煎醇沉液1g/ml、四逆湯水煎醇沉液1g/ml，方法同上?！窘Y(jié)果】剪貼或復(fù)制心臟的收縮曲線，再將具體分析平均值填入表中。藥物對(duì)離體蛙心收縮功能的作用心跳次數(shù)（次/min）振幅（mm）圖形比較情況正常低鈣任氏液強(qiáng)心苷溶液【注意事項(xiàng)】①本實(shí)驗(yàn)青蛙重量最好在50g以上。②在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)保持管套內(nèi)液面高度不變，以保證心臟固定的負(fù)荷。③在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，基線的位置、放大倍數(shù)、描記速度應(yīng)始終一致④為防止血液凝固堵塞蛙心管口，可在任氏液中加入適量抗凝劑肝素。可在1000ml任氏液中加入2ml肝素注射液配制成肝素—任氏液。【思考題】通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可推測(cè)強(qiáng)心苷具有哪些藥理作用?第四章 溶血試驗(yàn)【目的】１、學(xué)習(xí)中藥的溶血實(shí)驗(yàn)方法２、觀察中藥的溶血作用【原理】某些中草藥注射劑，由于含有皂甙或物理，化學(xué)與生物等方面的原因，在注入血液后可產(chǎn)生溶血作用。也有些注射劑中含有少量鞣質(zhì)等雜質(zhì)，注入局部會(huì)引起脹痛，注入血液可產(chǎn)生血球凝聚，引起血液循環(huán)機(jī)能障礙等不良反應(yīng)。因此，尤其是供靜脈注射用的中草藥注射劑，必須作溶血試驗(yàn)。一般說(shuō)來(lái)，肌肉注射劑由于劑量小，肌注后逐漸吸收，逐漸被血液稀釋，影響不大?！痉椒ā浚?、血球懸浮液的配制：取兔血(或羊，犬血)5～lOml，加入潔凈干燥的小燒杯中，并用竹簽或玻棒攪拌除去纖維蛋白元。再加生理鹽水～lOml，搖勻，離心、傾去上清液、如此反復(fù)幾次至上清液不呈紅色為止。量取血球，加生理鹽水稀釋成2％的混懸液供試驗(yàn)用。２、測(cè)試方法，取試管6只，按下列順序加入各種溶液。試管編號(hào)1 2 3 4 5 6受試液(m1) 0生理鹽水(m1) 2％血球混懸液(ml) 第6管為對(duì)照管。將各管溶血輕輕搖勻，置37℃恒溫箱中(或25～27℃室溫中)，觀察并記錄1／3h的結(jié)果。如溶液變清并染紅色，即表示溶血。必要時(shí)，可用顯微鏡觀察紅血球是否破裂。，在半小時(shí)內(nèi)引起溶血者即不宜作注射用。 如有紅細(xì)胞凝聚的現(xiàn)象，可按下法進(jìn)一步判定，即凝聚物在試管振搖后又能均勻分散，或?qū)⒛畚锓旁谳d玻片上，在蓋玻片邊緣滴加2滴生理鹽水，在顯微鏡下觀察，凝聚紅細(xì)胞能被沖散者為假凝聚，其制品可供臨床使用。若凝聚物不被搖散或在玻片上不被沖散者為真凝聚，其制品不宜供臨床使用。第五章 益母草對(duì)大鼠子宮平滑肌的影響【目的】１、學(xué)習(xí)離體器官實(shí)驗(yàn)方法２、觀察益母草對(duì)子宮平滑肌的影響【原理】益母草苦泄辛散，主入血分，善于活血祛瘀調(diào)經(jīng)，為婦科經(jīng)產(chǎn)要藥，又因其具有活血化瘀作用，臨床廣泛應(yīng)用益母草為治療婦科病的要藥。婦女產(chǎn)后子宮內(nèi)胎盤(pán)或胎膜組織殘留，子宮復(fù)位不全，惡露不盡，子宮炎癥等皆屬于中醫(yī)的血瘀范疇。益母草辛苦微寒能活血祛瘀，是治療婦科因瘀而致病的要藥。益母草的活血祛瘀作用能使子宮興奮，其有效成分是益母草堿。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)益母草對(duì)子宮有明顯的興奮收縮作用，如益母草煎劑作用于動(dòng)物離體子宮，無(wú)論有孕無(wú)孕，早孕晚孕，或是產(chǎn)后子宮，濃度在1:500～1:1000時(shí)皆產(chǎn)生興奮作用，表現(xiàn)為子宮張力增強(qiáng)，收縮幅度增大，節(jié)律加快。臨床用益母草單方或復(fù)方治療婦產(chǎn)科諸瘀癥，作用及療效確切，婦女產(chǎn)后必服益母草煎膏已為常規(guī)。【材料】動(dòng)物：健康成年SD雌性大鼠，體重在200240g之間試劑與儀器：(1)已烯雌酚注射液：廣州明興制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)9204262，2mg/支(1ml)；(2)BL420型4道生理記錄儀藥品：益母草提取液、營(yíng)養(yǎng)液【方法】將健康成年(SD)，人工造成動(dòng)情期以提高子宮平滑肌對(duì)藥物敏感性。實(shí)驗(yàn)時(shí)頸椎脫臼處死大鼠，剖腹取出子宮，立刻置于盛洛氏液的玻璃皿中，輕輕剝離子宮上附著的脂肪組織與結(jié)締組織。剪取約3cm長(zhǎng)之子宮，結(jié)扎陰道端并固定于“L”型通氣管小鉤上，置盛有洛氏液的麥?zhǔn)喜蹆?nèi)，浴槽內(nèi)溫度保持在37177?！妫B續(xù)通入O2(約80個(gè)氣泡/分)，另一端與肌力換通器相連，加予1g負(fù)荷，用生理記錄儀記錄子宮收縮活動(dòng)[時(shí)間常數(shù)DC，濾波(Hz)10次方，靈敏度1mv/cm，]，待收縮平穩(wěn)后記錄一段正常收縮曲線(10分鐘)，之后分別加入益母草提取液（由小劑量開(kāi)始），記錄加藥后每10分鐘的平均子宮收縮幅度，頻率及活動(dòng)力(頻率幅度)，進(jìn)行自身前后比較及變化率(給藥后給藥前)/給藥前100%的組間比較?！窘Y(jié)果】 列表比較；作出收縮曲線【思考題】益母草興奮子宮的成分及機(jī)理是什么？不同劑量對(duì)子宮的作用有何不同？藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器及使用▓ BL410微機(jī)型生物信號(hào)采集、處理系統(tǒng)計(jì)算機(jī)是一種現(xiàn)代化、高科技的自動(dòng)信息分析、處理設(shè)備。利用計(jì)算機(jī)采集、處理生物信息，讓計(jì)算機(jī)進(jìn)入藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)室是科學(xué)技術(shù)發(fā)展的必然。現(xiàn)將對(duì)BL410微機(jī)信號(hào)采集、處理系統(tǒng)（簡(jiǎn)稱BL410）作簡(jiǎn)要介紹。一、計(jì)算機(jī)在藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用 （一）計(jì)算機(jī)應(yīng)用的一般過(guò)程 通常人們把電子的、機(jī)械的、以及磁性的各種部件所組成的計(jì)算機(jī)實(shí)體稱為“硬件”，如輸入設(shè)備、中央處理器（CPU）、內(nèi)存儲(chǔ)器、外存儲(chǔ)器、輸出設(shè)備等。而把指揮計(jì)算機(jī)工作的各種程序和數(shù)據(jù)稱為“軟件”。在實(shí)際使用時(shí)，首先從輸入設(shè)備鍵盤(pán)、鼠標(biāo)、磁盤(pán)等將程序及數(shù)據(jù)送入內(nèi)存，再輸入讓程序運(yùn)行的命令，這時(shí)中央處理器就按照內(nèi)存中程序的安排，從中取出數(shù)據(jù)到運(yùn)算器內(nèi)進(jìn)行運(yùn)算、處理，并將結(jié)果送回內(nèi)存中保存。同時(shí)將運(yùn)行的結(jié)果按照要求通過(guò)輸出設(shè)備顯示、打印出來(lái)，也可以送到磁盤(pán)上儲(chǔ)存起來(lái)。由此可見(jiàn)，計(jì)算機(jī)是按照人們的要求來(lái)完成程序規(guī)定的任務(wù)。（二）、計(jì)算機(jī)采集、處理生物信息的基本原理首先將原始的生物機(jī)能信號(hào)，包括生物電信號(hào)和通過(guò)傳感器引入的非生物電信號(hào)進(jìn)行放大（有些生物電信號(hào)非常微弱，比如減壓神經(jīng)放電，其信號(hào)為微伏級(jí)信號(hào)，如果不進(jìn)行信號(hào)的前置放大，根本無(wú)法觀察）、濾波（由于在生物信號(hào)中夾雜有眾多聲、光、電等干擾信號(hào)，比如電網(wǎng)的50Hz信號(hào)，這些干擾信號(hào)的幅度往往比生物電信號(hào)本身的強(qiáng)度還要大，如果不將這些干擾信號(hào)濾除掉，那么可能會(huì)因?yàn)檫^(guò)大的干擾信號(hào)致使有用的生物機(jī)能信號(hào)本身無(wú)法觀察）等處理，然后對(duì)處理的信號(hào)通過(guò)模數(shù)轉(zhuǎn)換進(jìn)行數(shù)字化并將數(shù)字化后的生物機(jī)能信號(hào)傳輸?shù)接?jì)算機(jī)內(nèi)部，計(jì)算機(jī)則通過(guò)專用的生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)軟件接收從生物信號(hào)放大、采集卡傳入的數(shù)字信號(hào)，然后對(duì)這些收到的信號(hào)進(jìn)行實(shí)時(shí)處理，一方面進(jìn)行生物機(jī)能波形的顯示，一方面進(jìn)行生物機(jī)能信號(hào)的存貯，另外，它還要根據(jù)使用者的命令對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行指定的處理和分析，比如平滑濾波，微積分、頻譜分析等。對(duì)于存貯在計(jì)算機(jī)內(nèi)部的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)軟件可以隨時(shí)將其調(diào)出進(jìn)行觀察和分析，還可以將重要的實(shí)驗(yàn)波形和分析數(shù)據(jù)進(jìn)行打印。生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)原理圖二、BL410微機(jī)型生物信號(hào)采集、處理系統(tǒng)（一）、BL410微機(jī)型生物信號(hào)采集、處理系統(tǒng)的基本構(gòu)成本系統(tǒng)由計(jì)算機(jī)、BL410的硬件及軟件組成。BL410是一種智能化的四通道生物信號(hào)采集、處理顯示系統(tǒng)。它具有記錄儀、示波器、放大器、刺激器、心電圖儀等傳統(tǒng)的生理儀器的全部功能。該系統(tǒng)以中文操作Win9Win9Win2000