酵母菌生產(chǎn)絮凝劑條件優(yōu)化畢業(yè)論文(編輯修改稿)
2025-07-24 22:30 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ，加水1000毫升，煮沸半小時后，補足水分。在濾液中加入20克瓊脂，煮沸溶解后加葡萄糖20克補足水分，分裝，滅菌，備用。（2）發(fā)酵培養(yǎng)基：PD培養(yǎng)基：馬鈴薯200g ，葡萄糖20g， 水1 L，pH自然：把馬鈴薯洗凈去皮，取200克切成小塊，加水1000毫升，煮沸半小時后，補足水分。煮沸溶解后加葡萄糖20克，補足水分，分裝，滅菌，備用。（1）初始pH值的選擇。、測定絮凝率，考察其對絮凝活性的影響。 （2）產(chǎn)絮凝劑最佳時間的選擇?？疾觳煌囵B(yǎng)時間（36h、48h、60h、72h、84 h）對絮凝活性的影響。（3）產(chǎn)絮凝劑最佳溫度的選擇。考察不同培養(yǎng)溫度（20℃、25℃、30℃、35℃、40 ℃）對絮凝活性的影響。（4）產(chǎn)絮凝劑最佳搖床轉(zhuǎn)速的選擇?？疾觳煌瑩u床轉(zhuǎn)速（1140 、160 、180 、200r／min）對絮凝活性的影響。（5）正交試驗設計本次試驗采用L9(34)正交試驗設計法，它表示需作9次實驗，最多可觀察4個因素，每個因素均為3水平，以得出最佳的培養(yǎng)條件。試驗設計見表1。表1 發(fā)酵條件優(yōu)化正交試驗因素和水平設計Table 1 Design table of factors and levels of the fermentation condition orthogonal optimization experiment因子數(shù)水平A溫度（℃）BpHC轉(zhuǎn)速（r/min）D培養(yǎng)時間（h）123253035567140160180486072試驗用絮凝率來定量表示微生物絮凝劑的絮凝活性。方法如下：在250 mL燒杯中加入150 mL 1g／L的高嶺土懸濁液，先加入2 mL l％的CaCl2溶液，再加入2 mL發(fā)酵液，混合、攪拌（以200 r／min快攪1 min，再以50 r／min慢攪3 min），靜置沉降3min，取上清液。用721分光光度計在550nm處測其上清液吸光度，以不加培養(yǎng)液的高嶺土懸濁液作對比，通過絮凝率來表示絮凝活性，公式如下：絮凝率（E）=（AB）/A100% 注：A為對照上清液的吸光度；B為樣品上清液的吸光度。3 結(jié)果與分析溫度是影響微生物生長發(fā)育的重要因素，不同微生物對溫度的敏感程度不同。因此考察不同培養(yǎng)溫度（20℃、25℃、30℃、35℃、40℃）對絮凝活性的影響。由圖1可知該菌株產(chǎn)絮凝劑的最佳溫度范圍在25℃到35℃之間。培養(yǎng)溫度在30℃時，絮凝率最高，高溫培養(yǎng)時菌株生長快，對菌生長有利，但絮凝活性降低。由此可見溫度過高不利于絮凝劑的積累。而溫度過低則使菌株生長速度降低酶活性下降，代謝產(chǎn)物積累時間延長，不利于絮凝劑的產(chǎn)生。由此選擇25℃、30℃和35℃三個水平做正交試驗。培養(yǎng)條件設為：轉(zhuǎn)速均為160 r／min，培養(yǎng)時間均為60小時，pH自然，溫度分別為20℃、25℃、30℃、35℃、40℃，實驗結(jié)果如圖1所示：圖1：培養(yǎng)溫度對絮凝活性的影響Figure 1 Effect of different temperature on flocculating activity 培養(yǎng)條件設為：轉(zhuǎn)速均為160 r／min，培養(yǎng)時間均為60小時，培養(yǎng)溫度均為30℃，、實驗結(jié)果如圖2所示：圖2培養(yǎng)pH值對絮凝活性的影響Figure 2 Effect of different pH on flocculating activity pH值能通過改變酸堿度來改變絮凝劑大分子和膠體顆粒的表面電荷、帶電狀態(tài)、中和電荷能力，從而影響它們之間的靠近和行為，進而影響絮凝劑的絮凝活性。由圖2可知，該菌株生長旺盛且其絮凝活性達到最大值，菌種絮凝效果極差。，絮凝率逐漸下降，菌種生長緩慢。綜上可知，該菌株適合在中性偏酸的環(huán)境中生長，過酸或過堿都會影響其生長和絮凝劑的產(chǎn)生。、。培養(yǎng)條件設為：培養(yǎng)溫度均為30℃，培養(yǎng)時間均為60小時，轉(zhuǎn)速分別設為11160、180、200r／min. 實驗結(jié)果如圖3所示：氧含量是影響微生物生長的因素之一，不同的微生物對氧的需求量不同，因此考察不同搖床轉(zhuǎn)速（1140 、160 、180 、200r／min）對絮凝活性的影響。由圖3可知，轉(zhuǎn)速在120到160 r／min范圍內(nèi)隨著轉(zhuǎn)速的增加，其絮凝活性增加，這是因為轉(zhuǎn)速太低，不利于菌株吸收營養(yǎng)物質(zhì)，其絮凝活性在轉(zhuǎn)速160 r／min時達到最大值，之后隨著轉(zhuǎn)速的增加，其絮凝活性反而降低，說明轉(zhuǎn)速太高不利于菌體產(chǎn)生絮凝劑。由此選擇1160和180 r／min三個水平做正交試驗。圖3 轉(zhuǎn)速對絮凝活性的影響Figure 3 Effect of different rotation speed on flocculating activity培養(yǎng)條件設為：轉(zhuǎn)速均為160 r／min，培養(yǎng)溫度均為30℃，培養(yǎng)時間分別為3460、784 h。實驗結(jié)果如下：圖4 培養(yǎng)時間對絮凝活性的影響Figure 4 Effect of different culture time on flocculating activity在試驗過程中，為及時了解菌種在培養(yǎng)過程中的生長情況，
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