【文章內(nèi)容簡介】 70℃）攪拌 10 分鐘。配制后培養(yǎng)基 pH 值應 在 177。之間。將胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基溶解完全稀釋至濃度為 30g/L 溶液。按《 器標準操作規(guī)程》 (sop0203E002/01)操作， 121℃ 、 20 分鐘 滅菌 后，傳入分裝 間 A級區(qū) 。 模擬灌裝 過程 培養(yǎng)基冷卻至 室溫后， 按 《分裝崗位標準操作規(guī)程》 (SOP 0203ps007/01)和 《 KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機標準操作規(guī)程》 (SOP 0203E007/01)進行操作，將無菌乳糖按每支 分裝于 10ml 西林瓶中，按《 BT3001F 蠕動泵標準操作規(guī)程》 (SOP 0203E010/01)進行操作，將滅菌的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 按 每支灌裝 7ml，扣好膠塞后按 《 ZG300C 型抗生素瓶軋蓋機標準操作規(guī)程》 (SOP 0203E008/01)軋蓋密封，在軋蓋后緩沖間收集到不銹鋼盤中（每個收集盤裝 載 200 支左右）。按分裝時間對 每個盛裝培養(yǎng)基小瓶的托盤編號，并記錄每盤的分裝時間。 模擬最差生產(chǎn)條件：人數(shù)最多，時間最長。 分裝人數(shù)為 8 人，軋蓋 4 人；為加大操作人員疲勞程度和考察對產(chǎn)品的影響，模擬灌裝超過工藝規(guī)程規(guī)定時限，時間為 8小時，正常生產(chǎn)中午休息 1 小時。 培養(yǎng)基模擬灌裝試驗操作過程 7： 30 至 8： 30 裝機。 灌裝量：每支西林瓶分裝無菌乳 糖 ，灌裝培養(yǎng)基 7ml。 8： 30 裝機后裝原粉桶， 按照《分裝崗位標準操作規(guī)程》和 《 BT3001F 蠕動 泵 標準操作規(guī)程》調(diào)節(jié)裝量 小時。 9： 00 開始 以 2020 支 /小時速度 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 30 分鐘。 軋蓋爆瓶停機 15 分鐘。 中間模擬運行 1 小時。 以 2020 支 /小時 分裝 無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 30 分鐘。 拆裝原粉桶 小時 。 以 2020 支 /小時 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 30 分鐘。 12： 15 至 13： 15 操作人員出來吃飯 。 模擬設備維修 1小時， 之后 用消毒劑對 分 裝機臺面上各部件進行擦拭 10 分鐘 ， 調(diào)整裝量 5 分鐘 ， 自凈 15 分鐘， 繼續(xù) 分 裝 。 以 2020 支 /小時 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 30 分鐘。 分裝機撥瓶盤錯位調(diào)整 15 分鐘。 模擬運行 小時。 以 3000 支 /小時 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基至結(jié)束。 灌裝培養(yǎng)基的過程中進行各種正常干擾和非正常干擾的模擬。 正常干擾因素 序號 因素 次數(shù) 具體實施 1 裝機 1 分裝機分裝部件的組裝 2 膠塞轉(zhuǎn)移 3 膠 塞清洗機出料，轉(zhuǎn)移至分裝機旁的隔離器內(nèi) 3 裝原粉桶，調(diào)裝量 2 裝原粉桶和換原粉桶 4 灌裝速度 4 2020 支 /小時 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 5 灌裝速度 1 3000 支 /小時 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 6 模擬運行 2 1 次 1 小時、 1 次 小時 7 裝量檢查 10 每次 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 檢查 2 次 8 處理膠塞軌道堵塞 5 每次 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 處理一次 9 處理掉塞 5 每次 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 處理一次 10 空瓶 扶瓶 5 每次 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 扶瓶一次 11 軋蓋爆瓶 1 停機 15 分鐘 12 中間休息 1 中午休息、吃飯 13 膠塞上料 25 每次 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 上料 5 次 14 環(huán)境監(jiān)測 1 分 裝過程中 15 分裝機操作工穿越軌道 8 生產(chǎn)過程中 分裝機操作工穿越軌道次數(shù)為 8 次。 16 人員表面微生物 2 中午休息出去時、使用結(jié)束時 非正常干擾因素 序號 因素 次數(shù) 具體實施 1 出軌后倒瓶 5 每次 分裝無菌乳糖和灌裝培養(yǎng)基 倒瓶一次 2 設備維修 1 第三次灌裝結(jié)束后 ，停止灌裝 60 分鐘，打開 分 裝機臺面下控制箱，模擬檢查維修。 維 修時間約 60 分鐘， 之后用消毒劑對 分 裝機臺面上各部件進行擦拭， 調(diào)整裝量 ，繼續(xù)灌裝 3 分裝爆瓶 1 爆瓶，停機處理 4 撥瓶盤調(diào)整 1 擠瓶導致 撥瓶盤錯位 試驗過程監(jiān)測 西林瓶的無菌檢查 及有效期驗證 西林瓶按 《 KQCL60 抗生素瓶 立式超聲波清洗機標準操作規(guī)程》 (SOP 0203E003/01)進行清洗，按《 KSZ620/60型 隧道式滅菌干燥機標準操作規(guī)程》 (SOP 0203E006/01)進行滅菌后進 入 分裝間 。 測試方法：每次取 6 只西林瓶 按 直接接種法， 其中 3 支放 入 300ml 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 中 、 3 支放入 300ml 改良馬丁培養(yǎng)基中 ，同時做陰性對照， 分別在 2328?C 和 3035?C 培養(yǎng)14 天；逐日觀察并記錄。 ：全部樣品和陰性 對照管 培養(yǎng) 14 天后液體澄清，不得有菌生長。 取樣時間： 試驗前（ 9 點取樣，存放 8h） 、 試驗中（ 12 點取樣，存放 6h） 、 試驗后（ 16點取樣，存放 4h） 。 及有效期驗證 膠塞按《 KJCS10ES全自動 濕法超聲波 膠塞清洗機標準操作規(guī)程》 (SOP 0203E005/01)清洗、滅 菌后 出料存放于 分裝 間 A級區(qū) 。 ：每次取 20 只 膠塞按 直接接種法， 其中 10 只放 入 100ml 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 中 、 10只放入 100ml 改良馬丁培養(yǎng)基中 ，同時做陰性對照， 分別在 2328?C 和 3035?C培養(yǎng)14 天；逐日觀察并記錄。 ： 全部樣品和陰性 對照管 培養(yǎng) 14 天后液體澄清，不得有菌生長。 為： 試驗前（ 8 點取樣，存放 36h） 、 試驗中（ 11 點取樣，存放 40h） 、 試驗后（ 15點取樣，存放 44h） 。 鋁塑蓋的無菌檢查 及有效期驗證 鋁塑蓋 按《 KJSL12ES 全自動濕法鋁蓋清洗機標準操作規(guī)程 》 (SOP 0203E004/01)清洗、滅菌后 出料存放于 軋蓋 間 A級 區(qū)。 ：每次取 20 只 鋁塑蓋 按 直接接種法， 其中 10 支放 入 300ml 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 中 、 10 支放入 300ml 改良馬丁培養(yǎng)基中 ，同時做陰性對照， 分別在 2328?C 和 3035?C 培養(yǎng) 14 天；逐日觀察并記錄。 ： 全部樣品和陰性 對照管 培養(yǎng) 14 天后液體澄清，不得有菌生長。 為 ： 試驗前（ 8點半取樣，存放 36h） 、 試驗中（ 11 點半取樣，存放 40h） 、 試驗后（ 15 點半取樣，存放 44h） 。 生產(chǎn) 過程 環(huán)境監(jiān)測及表面 微生物監(jiān)測 測試方法：參見《浮游菌測試標準操作規(guī)程》（ SOP0102T005/01）、《沉降菌測試標準操作規(guī)程》（ SOP0102T006/01）、《懸浮粒子測試標準操作規(guī)程》（ SOP0102T007/01）、《表面微生物監(jiān)測標準操作規(guī)程》（ SOP0102T047/00）。 懸浮粒子 潔凈度級別 靜態(tài) 動態(tài) ≥ ≥ ≥ ≥ A級 3520 20 3520 20 B 級 3520 29 352020 2900 C 級 352020 2900 3520200 29000 微生物動態(tài)監(jiān)測標準 潔凈度級別 浮游菌 cfu/m3 沉降菌 cfu/4 小時（ ￠ 90mm） 表面微生物 接觸（ ￠ 55mm） cfu/碟 5 指手套 cfu/手套 A級 ＜ 1 ＜ 1 ＜ 1 ＜ 1 B 級 10 5 5 5 C 級 100 50 25 取樣計劃及取樣點 取樣 點 見下表。 取樣 操作 參見《潔凈區(qū)監(jiān)測管理規(guī)程》（ SOP0101ZL028/01） 。 分 裝流程圖：進瓶轉(zhuǎn)盤（ 處理倒瓶 ） 分裝（上料、 裝量檢查、添加膠塞、卡瓶、堵塞、停機維修、人員進出、環(huán)境監(jiān)測） 軋蓋（添加鋁塑蓋、堵蓋、環(huán)境監(jiān)測） 風險因素 取樣位置 級別 監(jiān)測項目 取樣方法 取樣頻率 量、著裝更換。 。 。 作。 人員五指手套、 手肘 、胸部、 腹部 、頭部、 口罩 、護目 鏡 A/B級 表面微生物 ￠ 55mm接觸碟 中途更衣前試驗結(jié)束 后 進瓶轉(zhuǎn)盤 A級 懸浮粒子 沉降菌 浮游菌 粒子傳感器 ￠ 90mm平皿 浮游菌采集器 在線監(jiān)測 實時監(jiān)控 試驗結(jié)束后 分裝頭 A級 懸浮粒子沉降菌 浮游菌 粒子傳感器 ￠ 90mm平皿 浮游菌采集器 在線監(jiān)測 實時監(jiān)控 試驗結(jié)束后 膠塞振蕩器 A級 懸浮粒子 沉降菌 浮游菌 粒子傳感器 ￠ 90mm平皿 浮游菌采集器 在線監(jiān)測 實時監(jiān)控 試驗結(jié)束后 分裝機隔離器表面、隔離器手套 A級 表面微生物 ￠ 55mm接觸碟 試驗結(jié)束后 分裝間墻面、門把手、地面 B級 表面微生物 ￠ 55mm接觸碟 試 驗結(jié)束后 軋蓋機操作臺面 A級 懸浮粒子 沉降菌 浮游菌 粒子傳感器 ￠ 90mm平皿 浮游菌采集器 在線監(jiān)測 實時監(jiān)控 試驗結(jié)束后 軋蓋機隔離器表面、隔離器手套 A級 表面微生物 ￠ 55mm接觸碟 試驗結(jié)束后 軋蓋間墻面、地面 B級 表面微生物 ￠ 55mm接觸碟 試驗結(jié)束后 將 試驗正常樣品和不良樣品 先置 23～ 28℃ 培養(yǎng) 7 天，再置 30～ 35℃ 培養(yǎng) 7 天，培養(yǎng)時一半正立，另一半倒置，第 7天后交換；第 7 天觀察培養(yǎng)基 灌裝品 的微生物生長情況， 并對污染的瓶中的微生物進行總 結(jié)其特點。若發(fā)現(xiàn)污染應明確記錄樣品灌裝時間及數(shù)量，若有破損情況應記錄并檢查其破損原因。對于微生物污染的樣品應進行鑒別試驗。 如果培養(yǎng)基灌裝產(chǎn)品存在污染，將污染瓶中的污染菌在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上劃線和分離培養(yǎng)，挑取單個菌落形態(tài)進行形態(tài)學觀察、革蘭染色等初步鑒別。 樣品可接受標準 所有樣品均進行培養(yǎng)，全部樣品無渾濁出現(xiàn)，則為陰性，合格。 若有 1 支出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象 需進行調(diào)查， 并記錄污染產(chǎn)生的原因。 有 2 支污染 則視為 驗證失敗。需進行 調(diào)查，填寫異常情況報告