牛欄山酒廠清香大曲及酒醅中地衣芽孢桿菌的分離鑒定(編輯修改稿)
2025-07-17 00:57 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 用1環(huán)肉湯菌液，穿刺接種到上述培養(yǎng)基中，必須穿刺到管底。30℃培養(yǎng)37d觀察結(jié)果。如細(xì)菌在瓊脂柱表面上生長者為好氧菌，如沿著穿刺線生長者為厭氧菌或兼性厭氧菌。 () 某些細(xì)菌在葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸縮合，脫羧成乙酰甲基甲醇，后者在強(qiáng)堿環(huán)境下，被氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白胨中的胍基生成紅色化合物。培養(yǎng)基：蛋[FS:PAGE]白胨5g，葡萄糖5g，NaC1 5g，蒸餾水1000ml。，分裝試管，每管約裝45ml，115℃滅菌20min。試劑：40％NaOH（或KOH），肌酸。 接種于上述培養(yǎng)液中，適溫培養(yǎng)46d。如為陰性，可適當(dāng)延長培養(yǎng)時(shí)間。取培養(yǎng)液（約2ml）和等量的40％NaOH相混合，加少量（）肌酸，充分振蕩25min，如培養(yǎng)液出現(xiàn)紅色即為陽性。有時(shí)需放置更長時(shí)間或在熱水中稍加熱，以加速反應(yīng)進(jìn)行。 牛奶平板的制備：取5g脫脂奶粉加入50ml蒸餾水中（或用50ml脫脂牛奶），將兩溶液分開滅菌。待冷至4550℃時(shí)，將兩液混勻倒平板，即成牛奶平板。將平板倒置過夜，使表面水分干燥，然后將菌種點(diǎn)接在平板上，每皿可點(diǎn)接35個(gè)株菌。適溫培養(yǎng)35d，記錄菌落周圍和下面酪素是否已被分解而呈透明。配制該培養(yǎng)基時(shí)，切勿將牛奶和瓊脂混合滅菌，以防牛奶凝固。 有些細(xì)菌具有酪氨酸酶，能使含酚類的化合物如酪氨酸、酚等氧化成醌，再經(jīng)脫水、聚合等一系列反應(yīng)，最后形成黑色沉淀物質(zhì)。培養(yǎng)基：％L酪氨酸，分裝121℃滅菌20min后擺成斜面。接種后培養(yǎng)37d，觀察斜面有黑色素者為陽性反應(yīng)。 培養(yǎng)基：蛋白胨10g，葡萄糖20g，蒸餾水1000ml，調(diào)節(jié)pH ，115℃滅菌20min。取菌液一環(huán)，接種于上述培養(yǎng)基中，同時(shí)接種普通肉湯液（pH ）作對(duì)照。適溫培養(yǎng)13d內(nèi)觀察生長情況。該培養(yǎng)液要求十分澄清，pH必須準(zhǔn)確，用pH計(jì)調(diào)測(cè)。 耐鹽性實(shí)驗(yàn)是觀察滲透壓對(duì)細(xì)菌生長的影響。由于不同菌類耐鹽性不同，故常以此作為鑒別特征。一般可根據(jù)不同種類的菌株，選擇其適合生長的培養(yǎng)基，在其中加入不同量的NaCl，接種后觀察其生長與否，以判斷其耐鹽性。 根據(jù)鑒定需要，以肉湯培養(yǎng)液配成不同濃度NaCl溶液，如2％、5％、7％、10％等。培養(yǎng)基要求十分澄清，接種時(shí)應(yīng)采用幼齡菌液接種，適溫培養(yǎng)37d，與未接種的對(duì)照管對(duì)比，目測(cè)生長情況。 細(xì)菌生長的最高、最適、最低溫度，常常是某些細(xì)菌鑒定的特征之一。測(cè)定細(xì)菌的生長溫度，要求培養(yǎng)液十分澄清（如營養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基），并采用液體菌種直接接種，放置于恒溫水浴培養(yǎng)。在指定溫度下培養(yǎng)25d，觀察生長情況。若在接近0℃的低溫培養(yǎng)，則觀察時(shí)間可延長710d或更長。培養(yǎng)5d能生長者按生長計(jì)算，否則按不生長計(jì)算，可疑者需重新進(jìn)行培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。
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