【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 D O－C連接。 8．與DNA序列539。－pTpApGpA－339。互補(bǔ)的序列是: A 539。－pTpCpTpA－339。 B 539。－pApTpCpT－339。 C 539。－pUpCpUpA－339。 D 539。－pGpCpGpA－339。 9．下列關(guān)于DNA的敘述哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的?A 不同生物的DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)不同。B 破壞DNA雙螺旋，260nm光吸收增加。 C 所有生物的DNA都為雙鏈結(jié)構(gòu)。 D 細(xì)胞核DNA與線粒體DNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)不同。 10．下列哪項(xiàng)可說(shuō)明DNA是生物遺傳信息的攜帶者? A 不同生物的堿基組成應(yīng)該是相同的； B 病毒感染是通過(guò)蛋白質(zhì)侵入宿主細(xì)胞來(lái)完成的； C 同一生物體不同組織的DNA通常具有相同的堿基組成。 D 生物體的DNA堿基組成隨年齡和營(yíng)養(yǎng)狀況的改變而改變。 11．存在于DNA中的bp是: A AT。 B UA。 C CG。 D GA. 12．對(duì)于細(xì)胞中RNA來(lái)說(shuō): A 含量最多的是rRNA。 B 含修飾核苷最多的是tRNA。 C 所有RNA都在于細(xì)胞質(zhì)中； D 壽命最短、含量最少的是mRNA。 13．核酸變性時(shí): A 氫鍵斷裂、雙鏈脫解、堿基堆積破壞； B 分子量不變； C 在退火條件下互補(bǔ)單鏈可以重新締合為雙鏈； D 單鏈核酸增色效應(yīng)不顯著。14．DNA的Tm與介質(zhì)的離子強(qiáng)度有關(guān)，所以DNA制品應(yīng)保存在：A 高濃度的緩沖浪中 B 低濃度的緩沖液中C 純水中 D 有機(jī)試劑中15．熱變性后的DNA： A 紫外吸收增加 B 磷酸二酯鍵斷裂 C 形成三股螺旋 D (GC)％含量增加16．下列過(guò)程中與DNA體外重組無(wú)關(guān)的是： A 用專一性的限制性內(nèi)切酶在特定的互補(bǔ)位點(diǎn)切割載體DNA和供體DNA B 通過(guò)連接酶催化載體DNA與供體DNA接合。 C 將重組后的DNA通過(guò)結(jié)合反應(yīng)引入寄主細(xì)胞。 D 常常根據(jù)載體所具有的抗藥性來(lái)篩選含有重組DNA的細(xì)菌。17．核酸分子中的共價(jià)鍵包括： A 嘌呤堿基第9位N與核糖第1位C之間連接的β—糖苷鍵 B 磷酸與磷酸之間的磷酸酯鍵 C 磷酸與核糖第1位C之間連接的磷酸酯鍵 D 核糖與核糖之間連接的糖苷鍵19．下列哪種物質(zhì)不是由核酸與蛋白質(zhì)結(jié)合而成的復(fù)合物： A 病毒 B 核糖體 C 蛋白質(zhì)生物合成70S起始物 D 線粒體內(nèi)膜20．下列關(guān)于核糖體的敘述正確的是： A 大小亞基緊密結(jié)合任何時(shí)候都不分開(kāi)。 B 細(xì)胞內(nèi)有游離的也有與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合的核糖體。 C 核糖體是一個(gè)完整的轉(zhuǎn)錄單位。 D 核糖體由兩個(gè)相同的亞基組成。21．Crick的擺動(dòng)假說(shuō)較好的描述了： A 密碼子的第三位變動(dòng)不影響與反密碼子的正確配對(duì) B 新生肽鏈在核糖體上的延長(zhǎng)機(jī)理。 C 由鏈霉素引起的翻譯錯(cuò)誤。 D 溶原性噬菌體經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)可變成烈性噬菌體。22．分離出某病毒核酸的堿基組成為：A＝27％，G＝30％，C＝22％，T＝21％，該病毒應(yīng)為：A 單鏈DNA B 雙鏈DNAC 單鏈RNA D 雙鏈RNA四、 問(wèn)答與計(jì)算：1．ＤＮＡ雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的主要內(nèi)容是什么？ 生物體內(nèi)遺傳信息的傳遞主要是通過(guò)什么方式實(shí)現(xiàn)的？2．簡(jiǎn)要描述酵母tRNAAla的三葉草模型。3．有一DNA分子，其(A+G)／(T+C)，試計(jì)算在另一互補(bǔ)鏈中(A+G)／(T+C)的比值。4．DNA樣品在水浴中加熱到—定溫度，然后冷至室溫測(cè)其OD260，請(qǐng)問(wèn)在下列情況下加熱與退火前后OD260的變化如何?(a)加熱的溫度接近該DNA的Tm值；(b)加熱的溫度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)該DNA的Tm值。5．假定每個(gè)基因有900對(duì)核苷酸，并且有三分之一的DNA不編碼蛋白質(zhì)，人的一個(gè)體細(xì)胞(109對(duì)核苷酸)，有多少個(gè)基因?（106）如果人體有1013個(gè)細(xì)胞，那么人體DNA的總長(zhǎng)度是多少千米? （1013千米）等于地球與太陽(yáng)之間距離(109千米)的多少倍? （參考答案1000倍） (以三個(gè)堿基編碼一個(gè)氨基酸，氨基酸平均分子量為120，核苷酸對(duì)平均分子量為640計(jì)算。)6．根據(jù)同源蛋白質(zhì)的知識(shí)，說(shuō)明為什么編碼同源蛋白質(zhì)的基因(DNA片段)可以雜交?第三章 酶 學(xué)I 主要內(nèi)容一、酶的組成分類(lèi) 1．酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，可以分為簡(jiǎn)單蛋白和結(jié)合蛋白。 2．簡(jiǎn)單蛋白質(zhì)酶類(lèi)：這些酶的活性僅僅由它們的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)決定。3．結(jié)合蛋白質(zhì)酶類(lèi)：這些酶的活性取決于酶蛋白和輔因子兩部分。輔因子主要包括無(wú)機(jī)離子和有機(jī)小分子兩種物質(zhì)，其中有機(jī)小分子又根據(jù)其與酶蛋白結(jié)合的緊密程度不同分為輔酶和輔基。在結(jié)合蛋白質(zhì)酶類(lèi)分子中，酶促反應(yīng)的專一性主要由酶蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定，催化性質(zhì)則主要由輔因子化學(xué)結(jié)構(gòu)所決定。二、酶的催化特性 1．高效性：酶的催化效率非常高，酶促反應(yīng)的速度與化學(xué)催化劑催化的反應(yīng)速度高1010倍左右。 2．專一性：每一種酶只能作用于某一類(lèi)或某一種物質(zhì)。根據(jù)專一性的程度可分為絕對(duì)、相對(duì)專一性和立體結(jié)構(gòu)專一性三種類(lèi)型。 3．溫和性：酶一般是在體溫、近中性的pH及有水的環(huán)境下進(jìn)行，作用條件較為溫和。 4．酶活性的可調(diào)節(jié)性：細(xì)胞內(nèi)酶活性可以受底物濃度、產(chǎn)物濃度等許多因素的影響。三、酶的命名和分類(lèi) 1．命名法：習(xí)慣命名法和系統(tǒng)命名法。 2．國(guó)際系統(tǒng)分類(lèi)和編號(hào)：根據(jù)國(guó)際系統(tǒng)分類(lèi)法的原則，所有的酶促反應(yīng)按反應(yīng)性質(zhì)分 為六大類(lèi)，用1，2，3，4，5，6的編號(hào)來(lái)表示。 1氧化還原酶類(lèi)；2轉(zhuǎn)移酶類(lèi)；3水解酶類(lèi)；4裂合酶類(lèi)；5異構(gòu)酶類(lèi)；6合成酶類(lèi)。 如： 乳酸：NAD+氧化還原酶。四、酶活力(或酶活性)、比活力表示法 用反應(yīng)初速度表示酶活力。 酶活力單位：U；酶的比活力：U／mg蛋白質(zhì)五、酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)1．底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響。 米氏常數(shù)(Km)：當(dāng)酶反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度。它是酶的特征性常數(shù)之一，只與酶的種類(lèi)有關(guān)，而與底物濃度無(wú)關(guān)；米氏常數(shù)(Km)的測(cè)定主要采用雙倒數(shù)作圖法。2．溫度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響：最適溫度：酶反應(yīng)速度最大的環(huán)境溫度，它是酶的條件性特征常數(shù)，只在一定情況下才有意義。3．pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響：最適pH：酶反應(yīng)速度最大的介質(zhì)pH值。4．酶濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響：當(dāng)?shù)孜餄舛冗h(yuǎn)遠(yuǎn)大于酶濃度時(shí)，反應(yīng)速度與酶濃度成 正比。5．激活劑對(duì)酶反應(yīng)速度的影響：無(wú)機(jī)激活劑，如陰離子、陽(yáng)離子。有機(jī)激活劑，如某些還原劑以及由酶作用引起的酶原激活。酶原激活是指在某些酶的作用下無(wú)活性的酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚悦傅倪^(guò)程。6．抑制劑對(duì)酶反應(yīng)速度的影響。 (1)不可逆性抑制作用：這類(lèi)抑制劑與酶分子中的特定基團(tuán)以共價(jià)鍵結(jié)合而使酶失 活，不能通過(guò)清除抑制劑的方法恢復(fù)酶活性。 (2)可逆性抑制作用：這類(lèi)抑制劑與酶的結(jié)合是可逆的，清除抑制劑酶活性可以恢復(fù)的抑制作用。 a．競(jìng)爭(zhēng)性抑制：底物與抑制劑競(jìng)爭(zhēng)性地與酶活性中心的同一部位結(jié)合。增加底物濃度可減少抑制劑的作用。當(dāng)競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑存在時(shí)，Km增大：Vmax不變。 b．非競(jìng)爭(zhēng)性抑制：非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑與酶的結(jié)合與底物不在同一位點(diǎn)，抑制劑可以和酶(E)結(jié)合也可與酶和底物(S)的復(fù)合物(ES)結(jié)合。非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑存在時(shí)，Km不變；Vmax減小。c．反競(jìng)爭(zhēng)性抑制：抑制劑只能與酶與底物的復(fù)合物結(jié)合，當(dāng)反競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑存在時(shí)，及Km和Vmax都變小。五、 酶促反應(yīng)機(jī)制酶促化學(xué)反應(yīng)比非酶促反應(yīng)速度快，最根本的原因是酶促反應(yīng)與非酶促反應(yīng)的反應(yīng)歷程不一樣，在酶促反應(yīng)中都要經(jīng)歷一個(gè)酶與底物結(jié)合形成酶底復(fù)合物，酶底復(fù)合物進(jìn)一步轉(zhuǎn)化形成產(chǎn)物并釋放出游離酶的基本過(guò)程。1．酶作用機(jī)制酶活性中心：底物結(jié)合部位和催化部位。2．酶作用專一性的機(jī)理：(1)鎖與鑰匙學(xué)說(shuō)。 (2)誘導(dǎo)契合假說(shuō)3．酶作用高效性的機(jī)理： (1)靠近與定向；(2)變形與扭曲；(3)共價(jià)催化；(4)酸堿催化；(5)酶活性部位的低介電區(qū)。4．某些酶的作用原理 (1)溶菌酶：活性部位有Glu35和Asp52，典型的酸堿催化。 (2)胰凝乳蛋白酶：活性部位有Aspl0His57和Serl95組成的質(zhì)子電荷傳遞系統(tǒng)。 5．抗體酶與核糖酶七、酶活性的調(diào)節(jié)和調(diào)節(jié)酶 1．別構(gòu)調(diào)節(jié)酶。 2．共價(jià)調(diào)節(jié)酶。 3．酶原的激活。II 習(xí) 題一、名詞解釋１．Ｋm與Ｋs：２．雙成分酶：３．活性中心：４．變構(gòu)酶：５．酶原激活：６．寡聚酶：７．同工酶：８．酶活力、比活力：二、是非題 判斷下列各句話意思的正確與否，正確的在題后括號(hào)內(nèi)畫(huà)“√”，錯(cuò)誤的畫(huà)“”，如果是錯(cuò)誤的，請(qǐng)說(shuō)明其理由1．形成酶活性部位的氨基酸殘基，在一級(jí)結(jié)構(gòu)上并不相連，而在空間結(jié)構(gòu)上卻處在相近位置。2．在底物濃度為限制因素時(shí)，酶促反應(yīng)速度隨時(shí)間而減小。3．只要底物濃度足夠大，即便是有競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的存在，酶的最大反應(yīng)速度仍然可以達(dá)到。 4．丁二酸脫氫酶受丙二酸的抑制，但此抑制作用可以通過(guò)增加丁二酸濃度的方式來(lái)解除或減輕。 5．輔酶和輔基都是酶活性不可少的部分，它們與酶促反應(yīng)的性質(zhì)有關(guān)6．當(dāng)[S] Km時(shí)，酶促反應(yīng)速度與酶濃度成正比。7．抑制劑二異丙基氟磷酸(DFP或DIFP)能與活性部位中含有SerOH的酶結(jié)合使其失活。8．在結(jié)合酶類(lèi)中，酶促反應(yīng)的專一性主要由酶蛋白的結(jié)構(gòu)決定，催化性質(zhì)則主要由輔因子的化學(xué)結(jié)構(gòu)所決定。9．根據(jù)定義：酶活力是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。一般來(lái)說(shuō)，測(cè)定酶活力時(shí)，測(cè)定產(chǎn)物生成量，比測(cè)定底物減少量更準(zhǔn)確。10．如果體系中所有的酶都以酶底復(fù)合物的形式存在，則v=Ｖmax。 11．酶活力的測(cè)定，本質(zhì)上就是測(cè)定酶催化的反應(yīng)速度。12．最適溫度不是酶的特征性常數(shù)，因此可以說(shuō)溫度與酶促反應(yīng)的速度無(wú)關(guān)。13．酶催化反應(yīng)速度的能力不能直接用酶的體積和質(zhì)量來(lái)表示，這主要是由酶本身的化學(xué)性質(zhì)所決定的。14．同工酶是指功能和結(jié)構(gòu)都相同的一類(lèi)酶。15．在競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑存在時(shí)，加入足夠量的底物可使酶促反應(yīng)速度達(dá)到正常的Vmax。16．反競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑是既能改變酶促反應(yīng)的Km值，又能改變Vmax的一類(lèi)抑制劑。17．有些酶的Km值可能由于結(jié)構(gòu)上與底物無(wú)關(guān)的代謝物的存在而改變。18．將具有絕對(duì)專一性的酶與底物的關(guān)系，比喻為鎖和鑰匙的關(guān)系還比較恰當(dāng)。19．所有酶的米氏常數(shù)(Km)都可被看成是酶與底物的結(jié)合常數(shù)(Ks)，即Km＝Ks。20．脲酶的專一性很強(qiáng)，除尿素外不作用于其它物質(zhì)。三、填空題 1．酶分為六大類(lèi)，l ，2 ，3 ， 4 ，5 ， 6 。 2．結(jié)合酶類(lèi)是由 和 組成。3．為準(zhǔn)確測(cè)定酶活力，必須滿足下面三個(gè)條件，即 、 。 4．當(dāng)?shù)孜餄舛冗h(yuǎn)遠(yuǎn)大于Km，酶促反應(yīng)速度與酶濃度 。5．影響酶促反應(yīng)速度的因素主有 、 、 、 、 和 六種。6．溶菌酶的活性部位有 和 兩種氨基酸殘基，其催化機(jī)制是典型的 。7．胰臟分泌的蛋白酶具有相同的作用機(jī)制，活性部位都是由 、 和 組成的 ，它們的區(qū)別是 。8．用雙倒數(shù)作圖法求Km時(shí)，橫坐標(biāo)為 ，縱坐標(biāo)為 。10．酶的比活力是指單位質(zhì)量蛋白質(zhì)所具有的酶活力大小，一般采用 和 兩種方式來(lái)表示。11．競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑使酶促反應(yīng)的Km ，而Vmax 。12．天冬氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶(ATCase)催化 和 生成氨甲酰天冬氨酸。它的正調(diào)節(jié)物是 ，負(fù)調(diào)節(jié)物是CTP。13．能催化多種底物進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)的酶有 個(gè)Km值，其中Km 的底物是該酶的最適底物。14．與無(wú)機(jī)催化劑相比，酶催化作用主要具有 、