【文章內(nèi)容簡介】 血反應(yīng)。應(yīng)考慮是否是ABO血型不合引起?！　≥斞?，血紅蛋白升高達不到預(yù)期值時，應(yīng)分析患者體內(nèi)血的去向，要注意是否有內(nèi)出血或胃腸道隱性失血（外傷失血除外）?！　≥斞?周內(nèi)患者血紅蛋白“不符合規(guī)律”的降低，要警惕遲發(fā)性輸血反應(yīng)?；颊叨酁榉磸?fù)輸血或有妊娠史者，應(yīng)考慮GVHD血液檢驗：臨床輸血常識　?。ㄒ唬楹稳⒉蝗?　　1． 血液離開血循環(huán)，發(fā)生“保存損害”；　　2． 保存液是針對紅細胞設(shè)計的，只對紅細胞有保存作用；　　3． 血小板需要在22177。2℃振蕩條件下保存，4177。2℃保存有害；　　4． 白細胞中的粒細胞是短命細胞，很難保存；　　5． 凝血因子Ⅷ和Ⅴ不穩(wěn)定，保存13天活性喪失50%?！　。ǘ楹维F(xiàn)在不提倡輸全血，而提倡成分輸血?　　1． 全血中除紅細胞外，其余成分濃度低，有的已喪失功能或活性，起不到治療作用；　　2． 全血中主要有效成分是紅細胞，其療效與紅細胞相似，而不良反應(yīng)卻比紅細胞多；　　3． 成分輸血有很多優(yōu)點，最主要的優(yōu)點是濃度高，針對性強，療效好，不良反應(yīng)少。　?。ㄈ┤心男┲饕秉c?　　1． 大量輸全血可使循環(huán)超負荷，因為全血中的血漿可擴充血容量，所以血容量正常的病人輸血量過大或速度過快可發(fā)生急性肺水腫；　　2． 由于全血中細胞碎片多，全血的血漿內(nèi)乳酸、鈉、鉀、氨等成分含量高，故全血輸入越多，病人的代謝負擔(dān)越重；　　3． 輸全血比任何血液成分更容易產(chǎn)生同種免疫，不良反應(yīng)多，因為人的血型十分復(fù)雜，同種異體輸血，尤其是輸全血，將有大量的抗原進入受血者體內(nèi)產(chǎn)生相應(yīng)抗體，導(dǎo)致輸血不良反應(yīng)或輸血無效?！　。ㄋ模┰诤畏N情況下可以輸全血?　　血容量不足且有進行性出血的急性大量失血病人可以考慮輸部分全血。全血能同時提高血液攜氧能力和補充血容量。臨床適用全血的情況并不多見。　?。ㄎ澹┤性鰪姍C體抵抗力和補充營養(yǎng)的作用嗎?　　全血的血漿中雖然含有白蛋白、免疫球蛋白以及多種抗體，但含量不多，起不到增強抵抗力的作用，也解決不了營養(yǎng)問題?！　。┖螢槌煞州斞?有何優(yōu)點?　　簡單地說，成份輸血就是根據(jù)病情需要，有選擇地提取血液中的某種成分輸給病人。成份輸血的優(yōu)點是：一血多用，節(jié)約用血，制品濃度與純度高，療效好，最大限度地降低不良反應(yīng)及疾病的傳播。　?。ㄆ撸槭裁摧斪⒔?jīng)過嚴格檢測的血液或成分，仍有可能出現(xiàn)輸血后肝炎和艾滋病?　　血站所供血液或成分盡管已按國家規(guī)定作過各種病原體和/或血清學(xué)檢測，但仍有可能出現(xiàn)輸血后肝炎和艾滋病：　　1． 已感染肝炎或艾滋病病毒，而體內(nèi)血清學(xué)指標尚未出現(xiàn)任何改變的“窗口期”的獻血者獻血；　　2． 低水平的肝炎、艾滋病病毒攜帶者或抗體效價低于可檢測閾值的獻血者獻血；　　3． 血站等采供血單位用于檢測獻血者的血清試劑靈敏度不高；　　4． 由于血站等采供血單位的技術(shù)人員責(zé)任心不強，技術(shù)操作不當(dāng)，而導(dǎo)致血清學(xué)檢測結(jié)果“假陰性”；　　5． 當(dāng)前的檢測技術(shù)尚不足以檢測出所有傳染性疾病?！　』谏鲜鱿嗤蚝洼斞⒉皇莻魅拘约膊〉奈ㄒ粋鞑ネ緩?，如果病人在輸血后肝炎和艾滋病檢測陽性，并不能表明就是輸血所造成。血液檢驗：淋巴細胞系統(tǒng)形態(tài)　　淋巴細胞系統(tǒng)包括原始淋巴細胞、幼稚淋巴細胞以及成熟的淋巴細胞?！　。?）原始淋巴細胞：胞體直徑10～18μm，圓或橢圓形。胞核大，位于中央或稍偏一側(cè)，圓或橢圓形、核染色質(zhì)細致，呈顆粒狀，但比原粒細胞稍粗，排列勻稱，核膜濃厚，界限清晰，核仁1～2個，胞質(zhì)極少，呈淡藍色，透明，核周界明顯，無顆粒?！　。?）幼稚淋巴細胞：胞體直徑10～16μm，胞核圓或橢圓形，核仁模糊不清或消失，核染色質(zhì)仍較細致。胞質(zhì)較少，淡藍色，偶有少許天青胺藍顆粒?！　。?）淋巴細胞：①大淋巴細胞：胞體圓形，直徑12～15μm，胞核橢圓形稍偏一側(cè)，核染色質(zhì)排列緊密而均勻。胞質(zhì)較多，呈清澈的淡藍色，可有少量大小不等的天青胺藍顆粒。②小淋巴細胞：胞體圓形，直徑6～9μm，胞核圓形或有小切跡，核染色質(zhì)聚集緊密成大塊狀。胞質(zhì)量很少，頗似裸核，如可見，呈淡藍色，一般無顆粒表原淋、幼淋和成熟淋巴細胞的鑒別細胞結(jié)構(gòu)原始淋巴細胞幼稚淋巴細胞成熟淋巴細胞核仁明顯模糊消失或有假核仁核染色質(zhì)粗顆粒狀較粗糙粗糙顆粒無偶有可有血液檢驗：淋巴細胞系統(tǒng)的超微結(jié)構(gòu)　　1）原始淋巴細胞：較原始粒細胞小，圓形或橢圓形，細胞表面有微絨毛和活動的胞飲作用、胞核大，占整個細胞的大部分，圓形或橢圓形，常染色質(zhì)占優(yōu)勢，異染色質(zhì)少，但比原粒和原單核細胞多，在核周凝集，可見大的核仁，常為1～2個。胞質(zhì)少，有較多核糖體，糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)少，微小管較多，高爾基復(fù)合體較小。線粒體較大，呈圓形或橢圓形。胞質(zhì)內(nèi)可見l～2個溶酶體，有時在高爾基復(fù)合體附近可見少量致密顆粒，有界膜，呈圓形或橢圓形。　　2）幼淋巴細胞：與原淋巴細胞相似。胞核大，占整個細胞的大部分。核內(nèi)異染色質(zhì)較原淋巴細胞多，在核周凝集較原淋巴細胞更明顯，可見l～2個核仁，胞質(zhì)少，有豐富核糖體，糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)少而分散，線粒體較大，數(shù)目不等，高爾基復(fù)合體較小，位于核凹陷處，有時可見中心粒。胞質(zhì)內(nèi)有時可見少數(shù)有界膜的顆粒，呈圓形或橢圓形，基質(zhì)電子密度高，常聚成一堆，位于高爾基復(fù)合體附近?！　?）淋巴細胞：直徑5～10μm，呈圓形或橢圓形，細胞表面有少量短小微絨毛。胞核大，占整個細胞大部分，呈圓形或橢圓形，可有淺的凹陷。核內(nèi)常染色質(zhì)少，異染色質(zhì)多，在核周明顯凝集，核內(nèi)有時可見核仁。胞質(zhì)少，有豐富核糖體，糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)很少，線粒體不多，呈卵圓形，常集中在細胞的一側(cè)。高爾基復(fù)合體發(fā)育較差，有時可見中心粒。有的淋巴細胞胞質(zhì)內(nèi)可見少量有界膜的顆粒，常聚成一堆，形成溶酶體。血液檢驗：氯乙酸ASD萘酚酯酶染色屬于酯酶染色　　（1）原理：血細胞內(nèi)的氯乙酸ASD萘酚酯酶將基質(zhì)液中的氯乙酸ASD萘酚水解，產(chǎn)生萘酚ASD，進而與基質(zhì)液中的堅牢藍GBC偶聯(lián)，形成不溶性紅色沉淀，定位于胞質(zhì)內(nèi)。屬于特異性酯酶染色。　?。?）結(jié)果判斷　　陽性結(jié)果為胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)紅色沉淀：①（一）胞質(zhì)無色。②（＋）胞質(zhì)呈淡紅色。③（＋＋）鮮紅色沉淀布滿胞質(zhì)。④（＋＋＋）深紅色沉淀充滿胞質(zhì)?！　。?）正常血細胞的染色反應(yīng)　　1）粒細胞系統(tǒng)：原始粒細胞為陰性反應(yīng)或陽性反應(yīng)，自早幼粒細胞至成熟中性粒細胞均為陽性反映，酶活性并不隨細胞的成熟而增強。嗜酸性粒細胞為陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)，嗜堿性粒細胞為陽性反應(yīng)?！　?）其他血細胞、單核細胞為陰性反應(yīng)，個別可呈弱陽性反應(yīng)。淋巴醫(yī)學(xué)敎^育^網(wǎng)收集整理細胞、漿細胞、幼紅細胞和血小板均呈陰性反應(yīng)?！　。?）臨床意義：鑒別急性白血病的類型。急性粒細胞白血病時，白血病性原始粒細胞可出現(xiàn)陽性反應(yīng)；急性單核細胞白血病及急性淋巴細胞白血病時，白血病細胞均呈陰性反應(yīng)；急性粒單核細胞白血病時，部分白血病細胞可呈陽性反應(yīng)（原粒和早幼粒）。有些白血病細胞呈陰性反應(yīng)（原始單核和幼單核細胞）。微生物與寄生蟲檢驗：微生物與寄生蟲檢驗：CAMP試驗　　（1）CAMP試驗原理：B群鏈球菌能產(chǎn)生CAMP因子，可促進葡萄球菌的B溶血素溶解紅細胞的活性，因此在兩菌（B群鏈球菌和葡萄球菌）的交界處溶血力增加，出現(xiàn)矢形（半月形）的溶血區(qū)?！　。?）培養(yǎng)基：血瓊脂平板。　?。?）方法：先以產(chǎn)B溶血素的金黃色葡萄球菌劃一橫線接種于血瓊脂平板上，再將被檢菌與前一劃線作垂直劃線接種，兩線不能相交，～1cm，于37℃培養(yǎng)18～24h，觀察結(jié)果。每次試驗都應(yīng)設(shè)陰性和陽性對照?！　。?）結(jié)果：在兩劃線交界處出現(xiàn)箭頭樣的溶血區(qū)為陽性　?。?）應(yīng)用：在鏈球菌中，只有B群鏈球菌CAMP試驗陽性，故可作為特異性鑒定。微生物與寄生蟲檢驗：DNA酶試驗　?。?）DNA酶試驗原理：某些細菌產(chǎn)生DNA酶，可使長鏈DNA水解成寡核苷酸鏈。因為長鏈DNA可被酸沉淀，寡核苷酸鏈則溶于酸，所以當(dāng)在菌落平板上加入酸后，會在菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán)?！　。?）培養(yǎng)基：%DNA瓊脂平板　?。?）方法：將被檢菌點種于上述平板上，于35℃培養(yǎng)18～24h，然后用lmol/L鹽酸覆蓋平板，觀察結(jié)果?！　。?）結(jié)果：在菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán)為陽性，無透明環(huán)為陰性。　?。?）應(yīng)用：在革蘭陽性球菌中只有金黃色葡萄球菌產(chǎn)生DNA酶，在腸桿菌科中沙雷菌和變形桿菌產(chǎn)生此酶，故本試驗可用于細菌的鑒別。微生物與寄生蟲檢驗：EB病毒　　EB病毒（EBV）是一種嗜B細胞的人皰疹病毒，在B細胞中可引起兩種形式的感染，增殖感染和非增殖感染（潛伏感染和惡性轉(zhuǎn)化）。EBV不能用常規(guī)的皰疹病毒培養(yǎng)方法培養(yǎng)，一般用人臍血淋巴細胞或用含EBV基因組的類淋巴母細胞培養(yǎng)EBV．EBV在人群中感染非常普遍。我國3～5歲兒童的EBV抗體陽性率達90%以上。幼兒受染后多數(shù)無明顯癥狀，青春期發(fā)生原發(fā)感染，約50%出現(xiàn)傳染性單核細胞增多癥。病毒主要通過唾液傳播，病毒可從口咽部排出達數(shù)周至數(shù)月。原發(fā)感染后，機體產(chǎn)生特異性中和抗體和細胞免疫，雖能防止外源性再感染。但不能完全清除潛伏在細胞中的EBV．在體內(nèi)潛伏的病毒與宿主保持相對平衡狀態(tài)。少量的EBV在口咽部繼續(xù)發(fā)生低滴度的增殖性感染。這種持續(xù)感染的狀態(tài)可保持終身。與EBV感染有關(guān)的疾病主要有三種：傳染性單核細胞增多癥；非洲兒童惡性淋巴瘤和鼻咽癌微生物與寄生蟲檢驗：hp的治療方法　　幽門螺桿菌（hp）感染現(xiàn)在主要靠抗hp藥物進行治療。盡管hp在體外對許多抗菌藥物都很敏感，但是在體內(nèi)用藥并不那樣如意。這是因為hp主要寄生在粘液層下面，胃上皮細胞表面。注射途徑用藥，對它無作用，經(jīng)口局部又因為胃酸環(huán)境。粘液層的屏障及胃的不斷排空作用，使藥效也大大地受到了限制。再加上有些藥長期應(yīng)用易產(chǎn)生嚴重的副作用或耐藥菌株等問題。因此hp感染引起的急慢性胃炎。消化性潰瘍等疾病，本來看起來很容易治療的問題，實際上效果并不總是很理想。何況目前缺乏合適的hp感染的動物模型，可供幫助制訂有效的治療方案。因此目前的治療方案幾乎全憑臨床經(jīng)驗制訂，有很大的局限性（因地區(qū)、人群的差異）?？偟闹v來，目前不提倡用單一的抗菌藥物，因為它的治愈率較低，一般＜20%，且易產(chǎn)生耐藥性?！　≈委煼桨傅倪x擇原則是：①采用聯(lián)合用藥方法；②hp的根除率＞80%，最好在90%以上；③無明顯副作用，病人耐受性好；④病人經(jīng)濟上可承受性。判斷hp感染的治療效果應(yīng)根據(jù)hp的根除率，而不是清除率。根除是指治療終止后至少在一個月后，通過細菌學(xué)、病理組織學(xué)或同位素示蹤方法證實無細菌生長　　目前國內(nèi)外常用的抗hp藥物有羥氨芐青霉素、甲硝唑、克拉霉素、四環(huán)素、強力霉素、呋喃唑酮、有機膠態(tài)鉍劑（denol等）、胃得樂（胃速樂）、樂得胃、西皮氏粉和胃舒平等。潰瘍病患者尚可適當(dāng)結(jié)合應(yīng)用質(zhì)子泵抑制劑或h2受體拮抗劑加上兩種抗菌素，或者質(zhì)子泵抑制劑（如奧美拉唑）加上一種抗菌素。療程一般為兩個星期。由于治療hp感染抗菌方案的廣泛應(yīng)用，有可能擴大耐藥性問題的產(chǎn)生。因此，將來替換性的治療或預(yù)防策略，如疫苗預(yù)防或免疫治療的研究是值得重視的微生物與寄生蟲檢驗：Hp與胃癌　　從近年來對Hp感染的大量研究中提出了許多Hp致胃癌的可能機制：①細菌的代謝產(chǎn)物直接轉(zhuǎn)化粘膜；②類同于病毒的致病機制，hp dna的某些片段轉(zhuǎn)移入宿主細胞，引起轉(zhuǎn)化；③hp引起炎癥反應(yīng)，其本身具有基因毒性作用。在這些機制中，后者似乎與最廣泛的資料是一致的微生物與寄生蟲檢驗：O/129抑菌試驗　?。?）O/129抑菌試驗原理：O/129（二氨基喋啶）對弧菌屬細菌有抑制作用，而對氣單胞菌屬細菌無抑制作用。　?。?）培養(yǎng)基：堿性瓊脂平板　?。?）方法：將待檢菌均勻涂布于堿性瓊脂平板上，鑷取O/129紙片（含藥40μg）貼于平板上，35℃培養(yǎng)18～24h觀察結(jié)果。　?。?）結(jié)果：出現(xiàn)抑菌環(huán)為敏感，無抑菌環(huán)為耐藥。　?。?）應(yīng)用：用于弧菌科的屬間鑒別，弧菌屬、鄰單胞菌屬對O/129敏感，而氣單胞菌屬耐藥微生物與寄生蟲檢驗：VP試驗　　（1）VP試驗原理：某些細菌在糖代謝過程中，分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸脫羧產(chǎn)生乙酰甲基甲醇，乙酰甲基甲醇在堿性環(huán)境中，被空氣中的氧氧化為二乙酰，進而與培養(yǎng)基內(nèi)蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用，生成紅色化合物，則為VP試驗陽性。若培養(yǎng)基中胍基含量較少，則可加入少量含胍基化合物，如肌酸或肌酐等。試驗時加入a萘酚可加速此反應(yīng)。　?。?）培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基　　（3）方法：將待檢菌接種于上述培養(yǎng)基中，于35℃培養(yǎng)48h后加入甲液（6% α萘酚酒精溶液）和乙液（40% KOH溶液），振搖。　　（4）結(jié)果：在數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)紅色為陽性；如無紅色出現(xiàn)且于35℃ 4h后仍如故者即為陰性。　?。?）應(yīng)用：本試驗常與甲基紅試驗一起使用，因為前者陽性的細菌，后者通常為陰性。微生物與寄生蟲檢驗：β半乳糖苷酶試驗　?。?）β半乳糖苷酶試驗原理：有的細菌可產(chǎn)生β半乳糖苷酶，能分解鄰硝基酚βD半乳糖苷（ONPG），而生成黃色的鄰硝基酚，在很低濃度下也可檢出。　?。?）試劑： ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸餾水中，在加入緩沖液（ NaH2P04溶于45ml蒸餾水中，用30% ，再加水至50ml）5ml，置4℃冰箱中保存。0NPG溶液為無色，如出現(xiàn)黃色，則不應(yīng)再用?！　。?）方法：從克氏雙糖鐵培養(yǎng)基上取菌，加入一滴甲苯并充分振搖，使酶釋放。將試管置37℃水浴5min， ONPG試劑，水浴20min～3h觀察結(jié)果?！　。?）結(jié)果：菌懸液呈現(xiàn)黃色為陽性反應(yīng)，一般在20～30min內(nèi)顯色　?。?）應(yīng)用：迅速及遲緩分