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正文內(nèi)容

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法elisa法(編輯修改稿)

2025-06-22 22:01 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 MuG) 硝基酚半乳糖苷 (ONPG) 熒光 黃色 360,450 420 ELISA的種類(lèi)和變化 (一)雙抗體夾心法 (二)間接法 (三)競(jìng)爭(zhēng)法 (四)雙位點(diǎn)一步法 (五)捕獲法測(cè) IgM抗體 (六)應(yīng)用親和素和生物素的 ELISA (一)雙抗體夾心法 此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原 獲得待分析物的未標(biāo)定抗體 將特異性抗體與固相 載體連接形成固相抗體 洗滌除去未結(jié)合的 抗體及雜質(zhì) 加入封閉蛋白溶液以封閉載體 表面殘留的蛋白結(jié)合位點(diǎn) 洗滌并除去未結(jié)合的封閉蛋白 加受檢標(biāo)本(抗原)形成 固相抗體-抗原復(fù)合物 洗滌除去其他 未結(jié)合的物質(zhì) 加酶標(biāo)抗體生成 抗體 — 待測(cè)抗原 — 酶標(biāo)記抗體 的復(fù)合物 徹底洗滌 未結(jié)合的 酶標(biāo)抗體 加底物進(jìn)行 酶催化反應(yīng) 根據(jù)顏色反應(yīng)的 程度進(jìn)行該抗原 的定性或定量測(cè)定 間接法是檢測(cè)抗體最常用的方法,其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。 (二)間接法 包被固相載體 : 用已知抗原包被 固相載體 加待檢標(biāo)本 : 使相應(yīng)抗體與固相抗原結(jié)合 洗滌,除去無(wú)關(guān)的物質(zhì) 加酶標(biāo)抗抗體 : 與固相載體上抗原抗體 復(fù)合物結(jié)合;洗滌,除去 未結(jié)合的酶標(biāo)抗抗體 加底物 顯色 根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行 該抗原的定性或定量測(cè)定 (三)競(jìng)爭(zhēng)法 此法可用于抗原和半抗原的定量測(cè)定,也可用于測(cè)定抗體 。 用已知特異性 抗體包被 固相載體
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