酶聯(lián)免疫吸附測定法elisa法(編輯修改稿)
2025-06-22 22:01 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 MuG) 硝基酚半乳糖苷 (ONPG) 熒光 黃色 360,450 420 ELISA的種類和變化 （一）雙抗體夾心法 （二）間接法 （三）競爭法 （四）雙位點一步法 （五）捕獲法測 IgM抗體 （六）應(yīng)用親和素和生物素的 ELISA （一）雙抗體夾心法 此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原 獲得待分析物的未標定抗體 將特異性抗體與固相 載體連接形成固相抗體 洗滌除去未結(jié)合的 抗體及雜質(zhì) 加入封閉蛋白溶液以封閉載體 表面殘留的蛋白結(jié)合位點 洗滌并除去未結(jié)合的封閉蛋白 加受檢標本（抗原）形成 固相抗體－抗原復(fù)合物 洗滌除去其他 未結(jié)合的物質(zhì) 加酶標抗體生成 抗體 — 待測抗原 — 酶標記抗體 的復(fù)合物 徹底洗滌 未結(jié)合的 酶標抗體 加底物進行 酶催化反應(yīng) 根據(jù)顏色反應(yīng)的 程度進行該抗原 的定性或定量測定 間接法是檢測抗體最常用的方法，其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。 （二）間接法 包被固相載體 : 用已知抗原包被 固相載體 加待檢標本 : 使相應(yīng)抗體與固相抗原結(jié)合 洗滌，除去無關(guān)的物質(zhì) 加酶標抗抗體 : 與固相載體上抗原抗體 復(fù)合物結(jié)合；洗滌，除去 未結(jié)合的酶標抗抗體 加底物 顯色 根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進行 該抗原的定性或定量測定 （三）競爭法 此法可用于抗原和半抗原的定量測定，也可用于測定抗體 。 用已知特異性 抗體包被 固相載體
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