手足口病的病原學(xué)及實驗室檢測(編輯修改稿)
2025-06-22 12:02 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 采集35ml全血，置于真空無菌采血管中，自凝后，分離血清，將血清移到 2ml外螺旋的血清保存管中，外表貼上帶有唯一識別號碼的標(biāo)簽。將血清置于 20℃ 以下冰箱中冷凍保存。 （四）皰疹液 在手足口病的實驗室診斷中，從皰疹液中分離到病毒即可確診該病毒為病因，可同時 采集多個皰疹作為一份標(biāo)本 。先用 75%的酒精對皰疹周圍的皮膚進(jìn)行消毒，然后用消毒針將皰疹挑破用棉簽蘸取皰疹液，迅速將棉簽放入內(nèi)裝有 35ml保存液（含 5%牛血清維持液或生理鹽水，推薦使用維持液）的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封，采樣管外表貼上帶有唯一識別號碼的標(biāo)簽。所采集標(biāo)本 4℃ 暫存立即（ 12h內(nèi)）送達(dá)實驗室，－ 20℃ 以下低溫冷凍保藏，需長期保存的標(biāo)本存于－ 70℃ 冰箱。 （五）肛拭子標(biāo)本 采集病人發(fā)病 3日內(nèi)的肛拭子標(biāo)本，用于病原檢測。用專用采樣棉簽，從患兒肛門輕輕插入，適度用力弧型左右擦拭數(shù)下，拔出后 ,迅速將棉簽放入裝有 3－ 5ml保存液（含 5%牛血清細(xì)胞維持液）的 15ml外螺旋的采樣管中，采樣管外表貼上帶有唯一識別號碼的標(biāo)簽。在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋，并密封，以防干燥。 （六）尸檢標(biāo)本 采集腦、肺和腸淋巴結(jié)等重要組織標(biāo)本，每一采集部位分別使用單獨(dú)的消毒器械。每種組織應(yīng)多部位取材，每部位應(yīng)取23份約 510g的組織，淋巴結(jié) 2個，分別置于 15ml50ml無菌的有外螺旋蓋的凍存管中，采樣管外表貼上帶有唯一識別號碼的標(biāo)簽。 （七）腦脊液標(biāo)本。 出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的病例，可采集腦脊液標(biāo)本，進(jìn)行病毒分離或核酸檢測。采集時間為出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀后 3天內(nèi)，采集量為 。采集后立即裝入無菌帶墊圈的凍存管中， 4℃ 暫存立即 (12h內(nèi) )送達(dá)實驗室，－ 20℃ 以下低溫冷凍保藏，需長期保存的標(biāo)本存于－ 70℃ 冰箱。但 EV71感染神經(jīng)系統(tǒng)時，很難在腦脊液中檢測到EV71病原。 標(biāo)本運(yùn)輸和貯存注意事項 臨床標(biāo)本在運(yùn)輸和貯存過程中要避免反復(fù)凍融。 標(biāo)本采集后要全程冷藏或冷凍保存和運(yùn)輸，12小時內(nèi)送達(dá)實驗室。 依照 《 人間傳染的病原微生物名錄 》 ，腸道病毒或潛在含有腸道病毒的標(biāo)本按 B類包裝，置于冷藏保存盒內(nèi)運(yùn)輸，盡量縮短運(yùn)輸時間。 可采用陸路或航空等多種運(yùn)輸方式，但在運(yùn)輸過程中應(yīng)采取保護(hù)措施，避免強(qiáng)烈震動、重力擠壓等現(xiàn)象。 在送到省、地、市級 CDC實驗室時，包裝盒內(nèi)應(yīng)帶冰且包裝完整。在上送標(biāo)本的同時，需附帶相關(guān)的 《 手足口病病例臨床標(biāo)本采樣登記表 》 。 實驗室檢測 ? 病毒分離 ? 測定人雙份血清標(biāo)本的中和抗體滴度 ? 逆轉(zhuǎn)錄 聚合酶鏈反應(yīng)（ RTPCR） ? Realtime RTPCR （ rRTPCR） 病毒分離 ? 病毒分離細(xì)胞系： RD細(xì)胞，來源于人橫紋肌肉瘤細(xì)胞。 HEp2細(xì)胞，來源于人喉癌上皮細(xì) ? 糞便標(biāo)本和肛拭子的處理 ：按“手足口病標(biāo)本采集及檢測技術(shù)方案” ? 皰疹液標(biāo)本通常直接用于 RNA提取或病毒分離。 ? 腦脊液標(biāo)本通常直接用于病毒
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