手足口病的病原學(xué)及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)-文庫(kù)吧資料
2025-06-01 12:02本頁(yè)面
【正文】 rRTPCR） 病毒分離 ? 病毒分離細(xì)胞系： RD細(xì)胞，來(lái)源于人橫紋肌肉瘤細(xì)胞。 在送到省、地、市級(jí) CDC實(shí)驗(yàn)室時(shí)，包裝盒內(nèi)應(yīng)帶冰且包裝完整。 依照 《 人間傳染的病原微生物名錄 》 ，腸道病毒或潛在含有腸道病毒的標(biāo)本按 B類(lèi)包裝，置于冷藏保存盒內(nèi)運(yùn)輸，盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間。 標(biāo)本運(yùn)輸和貯存注意事項(xiàng) 臨床標(biāo)本在運(yùn)輸和貯存過(guò)程中要避免反復(fù)凍融。采集后立即裝入無(wú)菌帶墊圈的凍存管中， 4℃ 暫存立即 (12h內(nèi) )送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，－ 20℃ 以下低溫冷凍保藏，需長(zhǎng)期保存的標(biāo)本存于－ 70℃ 冰箱。 出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的病例，可采集腦脊液標(biāo)本，進(jìn)行病毒分離或核酸檢測(cè)。每種組織應(yīng)多部位取材，每部位應(yīng)取23份約 510g的組織，淋巴結(jié) 2個(gè)，分別置于 15ml50ml無(wú)菌的有外螺旋蓋的凍存管中，采樣管外表貼上帶有唯一識(shí)別號(hào)碼的標(biāo)簽。在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋，并密封，以防干燥。 （五）肛拭子標(biāo)本 采集病人發(fā)病 3日內(nèi)的肛拭子標(biāo)本，用于病原檢測(cè)。先用 75%的酒精對(duì)皰疹周?chē)钠つw進(jìn)行消毒，然后用消毒針將皰疹挑破用棉簽蘸取皰疹液，迅速將棉簽放入內(nèi)裝有 35ml保存液（含 5%牛血清維持液或生理鹽水，推薦使用維持液）的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封，采樣管外表貼上帶有唯一識(shí)別號(hào)碼的標(biāo)簽。將血清置于 20℃ 以下冰箱中冷凍保存。采集急性期（發(fā)病 07d）和恢復(fù)期（發(fā)病1430d）雙份配對(duì)血清用于闡明和分析 EV71和CVA16感染后 IgG和 IgM抗體的動(dòng)態(tài)變化，評(píng)價(jià)血清學(xué)抗體試劑盒的敏感性和特異性。 采集標(biāo)本的種類(lèi)、保存和運(yùn)輸 （三）血清標(biāo)本。用專(zhuān)用采樣棉簽， 適度用力拭抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體部位，應(yīng)避免觸及舌部； 迅速將棉簽放入裝有 35ml保存液（含 5%牛血清維持液或生理鹽水，推薦使用維持液）的15ml外螺旋蓋采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封，以防干燥，外表貼上帶有唯一識(shí)別號(hào)碼的標(biāo)簽。 采集標(biāo)本的種類(lèi)、保存和運(yùn)輸 （二）咽拭子標(biāo)本。 采集病人發(fā)病 3日內(nèi) 的糞便標(biāo)本，用于病原檢測(cè)。 （ 3）疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)根據(jù)本地的技術(shù)能力，對(duì)采集的標(biāo)本開(kāi)展核酸檢測(cè)、病毒分離；不具備技術(shù)條件時(shí)，及時(shí)送上級(jí)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)。聚集性病例至少要采集 2例病例標(biāo)本開(kāi)展病原學(xué)檢測(cè)。具備測(cè)序條件的省份，可開(kāi)展 VP1基因序列測(cè)定和分析 ，進(jìn)行基因定型，序列測(cè)定完成后將序列結(jié)果于 5個(gè)工作日內(nèi)報(bào)送至中國(guó)疾病預(yù)防控制中心；不具備測(cè)序條件者，將毒株送至中國(guó)疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行序列測(cè)定，中國(guó)疾病預(yù)防控制中心要于 28個(gè)工作日內(nèi)反饋基因定型結(jié)果。 ? 以?。▍^(qū)、市）為單位 ,在手足口病流行年份中每年至少采集 20對(duì) EV71 和 10對(duì) CVA16感染的手足口病患兒的雙份血清 ,以闡明和分析 EV71和 CVA16感染后 IgG和 IgM抗體的動(dòng)態(tài)變化，評(píng)價(jià)血清學(xué)抗體試劑盒的敏感性和特異性。 所有重癥和死亡病例均需采樣。 ? 自咽拭子或咽喉洗液、糞便或肛拭子等標(biāo)本中 檢測(cè)到 CVA16 或 EV71特異性核酸， 或從腦脊液、皰疹液、血清以及腦、肺、脾、淋巴結(jié)等組織標(biāo)本等標(biāo)本中檢測(cè)到人腸道病毒（指包括 CV
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