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正文內(nèi)容

真菌檢驗(yàn)ppt課件(編輯修改稿)

2025-06-08 12:07 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 (一)分類和命名 ?其中大多數(shù)曲霉只發(fā)現(xiàn)了無性階段,它們歸屬于半知菌亞門、絲孢菌綱、絲孢菌目、叢梗孢科,少數(shù)種具有性階段歸入子囊菌亞門、不整子囊菌綱、散囊菌目、散囊菌科。其中對人致病的曲霉主要有 煙曲霉()、黃曲霉 ()、黑曲霉 ()、土曲霉( )和構(gòu)巢曲霉 (), 臨床上以煙曲霉最為常見。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 曲霉 屬 (Aspergillus) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(二) 臨床意義 ?曲霉是 條件致病菌 ,在人體免疫功能降低時繼發(fā)感染引起疾病,如長期使用廣譜抗生素、免疫抑制劑、腎上腺皮質(zhì)激素,放療、化療,各種惡性腫瘤、糖尿病、 AIDS等可誘發(fā)曲霉病。 ?曲霉可侵犯機(jī)體許多部位,尤其是 呼吸系統(tǒng),引起肺曲霉病 。曲霉可局限在肺內(nèi)感染也可播散到其他器官,甚至引起 全身性感染 。曲霉還可誘發(fā)超敏反應(yīng)引起過敏性支氣管肺曲霉病 。 ?有些曲霉可產(chǎn)生毒素引起食物中毒,有的毒素如黃曲霉毒素、雜色曲霉素有致癌作用,特別是黃曲霉毒素與人類 原發(fā)性肝癌 的發(fā)生密切有關(guān)。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 曲霉 屬 (Aspergillus) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(三) 真菌 檢驗(yàn) ? 標(biāo)本主要有痰液、膿液、分泌物、皮屑、耵聹、尿、糞便等。 ? 標(biāo)本用氫氧化鉀涂片,鏡檢 可見分枝有隔菌絲 ,有時可見 分生孢子梗、頂囊及小梗 。若為有性期感染,可見到閉囊殼。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 曲霉 屬 (Aspergillus) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(三) 真菌 檢驗(yàn) ? 標(biāo)本接種沙氏培養(yǎng)基, 25℃ 或 37℃ 培養(yǎng),觀察 菌落特征,尤其是顏色的變化 。 ? 曲霉的鑒定主要依據(jù)菌落質(zhì)地、顏色,顯微鏡檢查所見如 ① 分生孢子頭形狀; ② 分生孢子梗:顏色、表面粗糙或光滑; ③ 頂囊:形態(tài)、梗占據(jù)頂囊表面積的大??; ④ 小梗:單層還是雙層; ⑤ 分生孢子:表面是否光滑及有無紋飾 ; ⑥ 有無閉囊殼。 ?分生孢子頭 是曲霉屬具有特征性的結(jié)構(gòu)之一,由頂囊、產(chǎn)孢細(xì)胞和分生孢子鏈組成,可以是球形、放射形、圓柱形或棒形,且具有不同的顏色。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 曲霉 屬 (Aspergillus) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(三) 真菌 檢驗(yàn) ? 用競爭性 ELISA測定病人血清中曲霉抗原,簡單快速。 ? 常用免疫擴(kuò)散、對流免疫電泳、ELISA及間接免疫熒光法等檢測病人血清中抗曲霉抗體。菌絲和培養(yǎng)濾液可作抗原。 ? 對過敏性支氣管肺炎病人可用曲霉抗原提取液作皮試。 2022年 3月 2022/6/1 80 檢測曲霉 GM抗原的 ELISA試驗(yàn) 半乳糖甘露聚糖 (galactomanna, GM)是曲霉細(xì)胞壁的成分,曲霉通過生長菌絲釋放到血液。半乳甘露聚糖由甘露聚糖和呋喃半乳糖組成,后者具有抗原性,被抗 GM的單克隆抗體 EBA2 IgM識別。利用 ELISA免疫方法檢測侵襲性曲霉病患者體液中半乳甘露聚糖抗原成分以輔助診斷侵襲性曲霉病。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 傳統(tǒng)的接合菌門( Zygomycota) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?傳統(tǒng)的接合菌門( Zygomycota)因其在生物 系統(tǒng)發(fā)生學(xué)中為復(fù)系群( polyphyletic group),現(xiàn)不再使用該門名稱 。 ?現(xiàn)階段已將其置于球囊菌門( Glomeromycota)和四個亞門:毛霉亞門 (Mucoromycotina)、蟲霉亞門( Entomophthoromycotina)、捕蟲霉亞門(Zoopagomycotina)和梳霉亞門( Kickxellomycotina)。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 傳統(tǒng)的接合菌門( Zygomycota) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?毛霉亞門毛霉目中重要菌屬有 ?根霉屬( Rhizopus)、 ?黃梗霉屬( Lichthemia 舊稱犁頭霉 Absidia) 、毛霉屬( Mucor)、 ?根毛霉屬( Rhizomucor); ?蟲霉亞門蟲霉目有 ?蛙糞霉屬( Basidiobolus) 和 ?耳霉屬( Conidiobolus) 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 毛霉 目 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(二) 臨床意義 ?毛霉目真菌為條件致病菌,正常人體極少感染,但免疫功能低下者易感染。 ?依據(jù)臨床表現(xiàn)分為: ?① 鼻腦毛霉菌?。合得咕鷱谋乔?、付鼻竇沿小血管到達(dá)腦部,引成腦膜炎、腦血栓及腦壞死; ?② 肺毛霉菌?。涸l(fā)性為吸入毛霉菌孢子所致;繼發(fā)性為吸入鼻腦毛霉菌病的分泌物所致。主要表現(xiàn)為肺特異性進(jìn)行性支氣管炎和肺炎,亦有肺梗塞及血栓形成 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 毛霉 目 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(二) 臨床意義 ?③ 消化道毛霉菌病:病變可累及食管、胃、回腸、直腸等,表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、血便、嘔咖啡樣血等。 ?④ 皮膚毛霉菌病:因外傷、手術(shù)或使用污染的包扎物引起的原發(fā)性感染,臨床表現(xiàn)為丘疹、斑塊、膿皰、潰瘍、潰爛、壞死等。 ?由其他部位毛霉菌病播散引起的繼發(fā)性感染,表現(xiàn)為結(jié)節(jié)、潰瘍、壞死等。臨床上常見的是鼻腦毛霉菌病。本菌感染發(fā)病急,病情進(jìn)展快、病死率極高。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 毛霉 目 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(三) 真菌 檢驗(yàn) ? 采集皮屑、膿液、血液、痰、尿、鼻竇抽取物、活體組織等標(biāo)本。 ? 標(biāo)本用氫氧化鉀直接涂片檢查, 可見粗大無隔菌絲,偶見孢子囊及孢子囊梗。 ? 標(biāo)本接種于沙氏培養(yǎng)基上, 25℃ 或 37℃ 培養(yǎng),觀察菌落。 ? 毛霉目真菌鑒定依據(jù): ① 菌落形態(tài)、色澤; ②有無假根和匍匐菌絲; ③ 分生孢子梗著生位置及分枝狀態(tài); ④ 孢子囊形態(tài); ⑤ 有無囊軸、囊托及其形狀; ⑥ 有無接合孢子及其特點(diǎn)。 2022年 3月 2022/6/1 86 毛霉目 能進(jìn)行有性繁殖產(chǎn)生接合孢子和 無性繁殖產(chǎn)生孢子囊孢子 ,菌絲較 寬,常無分隔 。有的菌絲在培養(yǎng)基表面橫向生長,稱為 匍匐菌絲 (stolon),其產(chǎn)生的 假根 (rhizoid)伸入培養(yǎng)基內(nèi)。孢子囊梗直接由菌絲長出,頂端形成孢子囊,內(nèi)生孢子囊孢子。孢子囊內(nèi)有球形或近球形的囊軸 (columella),囊軸基部與孢囊梗相連處成囊托 (apophysis) 2022年 3月 2022/6/1 87 毛霉病 — KOH直接鏡檢 粗大無分隔菌絲 2022年 3月 2022/6/1 88 接合菌 — 孢子囊和孢囊孢子 2022年 3月 毛霉目 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 2022年 3月 2022/6/1 90 深部感染真菌檢驗(yàn) 毛霉目真菌 根霉 梨頭霉孢囊梗不與假根對應(yīng), 毛霉 有囊托 毛霉 無匍匐菌絲及假 根 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 馬爾尼菲青霉( Penicillium marneffei) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?在 1956年從越南中華竹鼠的肝臟中首次發(fā)現(xiàn), 1959年正式命名。 1973年在美國首次發(fā)現(xiàn)臨床病例,普遍認(rèn)為竹鼠是馬爾尼菲青霉的天然宿主 , 通過糞便排出該病原菌而污染環(huán)境,引起人的感染。東南亞和我國南部有馬爾尼菲青霉病的流行區(qū)域。 ?(一) 分類和命名 屬于叢梗孢科,青霉屬,雙輪青霉亞屬。馬爾尼菲青霉是 青霉屬( Penicillium)中唯一的雙相型真菌 , 自然界中以菌絲形式存在,在組織中則形成圓形或橢圓形細(xì)胞。 。有性階段屬于子囊菌門、真子囊菌綱、散囊菌目、發(fā)菌科、藍(lán)狀屬。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 馬爾尼菲青霉( Penicillium marneffei) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(二) 臨床意義 ?侵入人體后,除引起局灶型感染外主要引起廣泛性、播散性感染。主要侵犯 網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng) ,即肺、肝、腸淋巴組織、淋巴結(jié)、脾、骨髓、腎和扁桃體等,以肺及肝最為嚴(yán)重。臨床表現(xiàn)為 發(fā)熱 、畏寒、咳嗽、 咳痰 、消瘦乏力、肝和脾及淺淋巴結(jié)腫大、皮疹、壞死性丘疹、皮下結(jié)節(jié)或全身多發(fā)性膿腫等。 ?馬爾尼菲青霉菌是條件致病菌 , 免疫功能低下者易感染。馬爾尼菲青霉病患者多繼發(fā)于惡性腫瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、糖尿病、結(jié)核等,尤其在 AIDS 患者中有增多趨勢 ,被認(rèn)為是東南亞地區(qū)艾滋病患者最常見的機(jī)會性感染之一。 2022年 3月 2022/6/1 93 臨床所見 馬爾尼菲青霉病 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 馬爾尼菲青霉( Penicillium marneffei) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(三)真菌 檢驗(yàn) ? 采集痰、血液、膿汁、皮損、腹水、骨髓、潰瘍分泌物等標(biāo)本。 ? 皮損刮片、潰瘍分泌物等標(biāo)本涂片, PAS染色后鏡檢,可見到球形、近球形、橢圓形、有明顯橫隔的細(xì)胞,常形成桑葚狀細(xì)胞團(tuán)位于巨細(xì)胞內(nèi)。有時可見到細(xì)胞外粗細(xì)均勻、兩頭鈍圓的臘腸狀細(xì)胞。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 馬爾尼菲青霉( Penicillium marneffei) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(三)真菌 檢驗(yàn) ? 血液、骨髓穿刺液、腹水、腦脊液、支氣管肺泡灌洗液等標(biāo)本增菌后轉(zhuǎn)種于 2個沙氏培養(yǎng)基,皮損、痰直接接種于 2個沙氏培養(yǎng)基,分別于 25 ℃和 37 ℃ 培養(yǎng),每天觀察菌落形態(tài)、產(chǎn)色素情況。 馬內(nèi)菲青霉是一種雙相菌,即在 25℃ 時為菌絲相,在 37℃ 時為酵母型。在沙氏培養(yǎng)基上 25℃ 生長緩慢, 3~ 4d 開始生長菌落初為灰白色膜狀或淡黃色絨毛樣 , 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 馬爾尼菲青霉( Penicillium marneffei) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(三)真菌 檢驗(yàn) ? 本菌鑒定主要依據(jù)① 雙相真菌; ② 直接鏡檢及病理檢查找到典型的臘腸形、分隔的孢子; ③ 菌落特征; ④ 鏡下帚枝狀結(jié)構(gòu)。 2周后菌落呈棕紅色蠟樣、有皺褶,并有白色絨毛樣菌絲。產(chǎn)生的紅色色素將整個培養(yǎng)基染成玫瑰紅色。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 馬爾尼菲青霉( Penicillium marneffei) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(三)真菌 檢驗(yàn) ? 將菌懸液接種小白鼠腹腔, 1個月左右,小鼠肝、脾、腎、淋巴結(jié)發(fā)生病變,病變組織細(xì)胞內(nèi)外可找到 圓形、臘腸形、分隔的孢子 ,培養(yǎng)有馬爾尼菲青霉生長。 ? 用熒光標(biāo)記特異性抗體,通過 ELISA定量檢測患者尿中馬爾尼菲青霉抗原,由于操作簡單、快速,常作為該病流行地區(qū)的常規(guī)診斷方法。 ?標(biāo)本直接涂片檢查時,注意與莢膜組織胞漿菌鑒別,雖然二者都是單細(xì)胞,但馬爾尼菲青霉孢子從不出芽,常有橫隔。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 肺孢 子 菌 ( Pneumocystis) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?由于肺孢 子 菌具有包囊、滋養(yǎng)體兩種形態(tài),且抗原蟲藥物對肺孢子菌有效,過去一直將其歸為原蟲,稱為肺孢子蟲。 ?但近年來分子生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn):包囊壁結(jié)構(gòu)與真菌相似;肺孢 子 菌線粒體的 16S和 5S核糖體 RNA的核苷酸序列與真菌有更多的同源性 , 肺孢 子 菌的二氫葉酸還原酶和胸腺嘧啶合成酶的結(jié)構(gòu)與真菌相似。 故將 其 歸屬于真菌 。但由于抗真菌藥物對肺孢 子 菌治療無效,故有的學(xué)者提出將其歸為類真菌。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 肺孢 子 菌 ( Pneumocystis) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(一)分類和命名 ?屬于肺孢子菌科( Pneumocystis)。 該 屬有 7個種 ,為 耶氏肺孢子菌 (Pneumocystis jirovecii, Pj)、卡氏肺孢子菌 (Pneumocystis carinii, Pc)、沙鼠肺孢子菌(Pneumocystis gerbil)、鼠型肺孢子菌 (Pneumocystis murina)、奧氏肺孢子菌 (Pneumocystis oryctolagi)、韋氏肺孢子菌 (Pneumocystis wakefieldiae)和ZL2022b肺孢子菌 (Pneumocystis sp. ZL2022b)。 2022年 3月 深 部感染真菌 檢驗(yàn) 肺孢 子 菌 ( Pneumocystis) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 ?(一)分類和命名 ?目前認(rèn)為 耶氏肺孢子菌 只感染人類,而其他種的肺孢子菌只感染動物而不感染人類。因此,原有的卡氏肺孢子菌肺炎 (Pneumocystis carinii, pneumonia)不再使用,但沿用肺孢子菌肺炎 (PCP)的診斷,全稱為 耶氏肺孢子菌肺炎( Pneumocystis jirovecii pneumonia)。
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