【文章內(nèi)容簡介】 ： 藥粉越細(xì) 、 表面積越大 ， 提取效率越高 。 但太細(xì) ， 藥粉對成分的吸附也越強(qiáng) 。 因此水提取宜用粗粉；用有機(jī)溶劑可細(xì)些 ,以 20目為好 。 2） 提取溫度： 一般熱提效率高 ， 但要考慮有些成分溫度高易破壞 ， 應(yīng)選擇適宜溫度 。 3） 提取時間： 一般提取時間長提出量大。但被提成分在細(xì)胞內(nèi)外溶解一旦平衡，時間長即無意義。一般熱水提以 1/2~1h為宜，乙醇提 1h為宜。 （一）回流、減壓蒸餾 （ 二 ） 水蒸氣蒸餾法： 適于具有揮發(fā)性 、 可隨水蒸氣蒸餾不被破壞 ， 與水不反應(yīng) 、 且與水分層的成分的提取 。 天然藥物中主要用于揮發(fā)油 、 某些揮發(fā)性生物堿 、 少數(shù)揮發(fā)性蒽醌苷元 、 香豆素苷元的提取 。 水蒸氣蒸餾提取的裝置有兩種， 水蒸氣蒸餾裝置 共水蒸餾裝置。 （ 三 ） 升華法： 天然藥物中的某些固體成分在受熱低于其熔點的溫度下 ， 不經(jīng)液態(tài)直接成為氣態(tài) ， 經(jīng)冷卻后又成為固態(tài) ， 從而與天然藥物組織分離這種性質(zhì)稱為升華 ， 這種提取方法稱為升華法 。 天然藥物成分有少量具有升華性 ， 如游離羥基蒽醌類成分 ， 一些小分子香豆素類 ， 有機(jī)酸類成分等 。 （ 四）超臨界提取法。（ SFE） 1 特點： 與經(jīng)典溶劑提取法比較 ， 不用有機(jī)溶劑 ， 而是選用一 種稱為超臨界流體 （ SF） 的物質(zhì)替代有機(jī)溶劑提取 。 2 優(yōu)點： 1） 可在低溫下提取 ， “ 熱敏性 ” 成分尤其適用 。 2） 無溶劑殘留 ， 對作為制劑的天然藥物提取物的提 取是一大優(yōu)勢 。 3） 提取與蒸餾合為一體 ， 無需回收溶劑 。 4） 具選擇性分離 。 3 超臨界流體 （ SF） ： 指處于臨界溫度 （ Tc） 和臨界壓力 （ Pc） 以上 ， 介于氣體和液體之間的 、 以流動形 式存在的物質(zhì) 。 超臨界狀態(tài)： 指當(dāng)一種物質(zhì)處于臨界溫度和臨界壓力以上的狀態(tài) 下 ， 形成既非液體又非氣體的單一狀態(tài) ， 稱為 “ SF”。 此時其流 體密度近似液體 、 黏度近似氣體 ， 其擴(kuò)散力比液體大增 ， 介電常數(shù) 也隨壓力增加而增加 。 其浸透性優(yōu)于液體 ， 因而比液體有更佳的溶 解力 ， 有利于溶質(zhì)的萃取 ， 特別是性質(zhì)不穩(wěn)定 、 易熱分解的物質(zhì)的 提取 。 4 常見的 SF： 有二氧化碳、一氧化亞氮、六氟化硫、乙烷、庚烷、氨、 二氯二氟甲烷等。其中 最常用的為二氧化碳 。 二氧化碳的特點： 臨界溫度接近室溫（ Tc=℃ ），臨 界壓力也較低（ Pc=），無色、無毒、無味，不 易燃，化學(xué)惰性，廉價，易制成高純度氣體。故在 SFE中 最常用。 5 二氧化碳 超臨界流體的溶解能力規(guī)律： 在超臨界狀態(tài)下 ， CO2對不同溶質(zhì)的溶解能力差別很大 。 其取決于溶質(zhì)的極性 、 沸點 、 分子量 。 (1)對親脂性 、 低沸點成分溶解能力強(qiáng) ， 如揮發(fā)油 、 烴類 醚類 、 酯類等 。 (2)成分極性基團(tuán) （ 如 OH、 COOH） 越多 ， 越難提取 。 如：糖類 、 氨基酸的萃取壓力要 4 104Pa以上 。 (3)成分分子量越大 ， 越難提取 。 第三節(jié) 天然產(chǎn)物化學(xué)成分的分離方法 本節(jié)介紹天然產(chǎn)物化學(xué)成分的一般分離方法 ， 有萃取 、 沉淀 、 結(jié)晶 、 鹽析 、 膜分離 、 柱色譜等方法 。重點掌握前三種和柱色譜法 。 一 兩相溶劑萃取法 1 原理： 利用混合物中各單體組分在兩相溶劑中的分配系數(shù) （ K） 不同而達(dá)到分離的方法 。 溶劑分配法的兩相往往是互相飽和的水相與有機(jī)相 。混合物中各成分在兩相中分配系數(shù)相差越大 ， 則分離效果越高 。 2 方法： 1） 簡單萃取法 ：儀器 ， 實驗室用分液漏斗或 下口瓶 。 一般在水和親脂性有機(jī)溶劑中進(jìn)行 ， 根 據(jù)情況 ， 也可用酸水或堿水 。 天然藥物中成分比 較復(fù)雜 ， 一般一次萃取分離不出來純品 ， 需要再 配合其他方法 。 由于成分的復(fù)雜性及相互作用 ， 萃取中易發(fā)生 乳化 。 破壞乳化的方法有： （ 1） 加熱敷； （ 2） 將乳化層抽濾； （ 3） 長時間放置 （ 24小時以上 ） 。 2） pH度萃取法： 是分離酸性或堿性成分的常用方法 。 以 pH成梯度的酸水 溶液依次萃取以親脂性有機(jī)溶劑 溶解的堿性成梯度的混合生物堿 ， 或者以 pH成梯度的 堿水溶液依次萃取以親脂性有機(jī)溶劑溶解的酸性成梯度 的混合 酚 、 酸類成分 ， 使后者分離的方法 。 3） 連續(xù)萃取法： 采用連續(xù)萃取器萃取 。 利用兩溶液 比重不同自然分層和 分散相液滴穿過連續(xù)相溶劑時發(fā)生 傳質(zhì) 。 此法可克服用分液漏斗多次萃取 操作的麻煩 。 4） 液滴逆流分配法 （ DCCC法 ） ：是利用流動相形 成液滴 ， 通過作為固定 相的液柱而達(dá)到分離純化的目的 。 二 、 沉淀法 沉淀法 ——指于天然藥物提取液中加入某些試劑或溶劑 ， 使某些成分沉淀而使所要成分與雜質(zhì)分離的方法 。 依 據(jù)加入試劑或溶劑不同 ， 分為下述四個方法 。 1 水醇沉淀法： 1） 水提取醇沉淀法 ， 于水提濃縮液中加入乙醇使含醇量 達(dá) 60%以上 ， 可使多糖 、 蛋白質(zhì)沉淀 。 2） 醇提取水沉淀法 ， 于醇提取濃縮液中加入 10倍量以 上水 ， 可沉淀親脂性成分 。 2 鉛鹽沉淀法： 方法： 利用中性醋酸鉛或堿式醋酸鉛在水或稀醇溶液 中能與許多物質(zhì)生成難溶的鉛鹽或絡(luò)鹽沉淀而分離的 方法 。 ?中性醋酸鉛可沉淀具有鄰二酚羥基和羧基的成分； ?堿式醋酸鉛的沉淀范圍較廣 ， 可沉淀含酚羥基和羧 基及中性皂苷等 。 如：沉淀為雜質(zhì) ， 則可棄去； 如：沉淀為所要成分 ， 則可將沉淀懸浮于水或稀醇 中 ， 通 H2S氣體或加入稀 H2SO Na2SO4等脫鉛 ， 成分即可分離 。 3 酸堿沉淀法： 1） 酸提取堿沉淀：用于生物堿的提取分離 。 2） 堿提取酸沉淀：用于酚 、 酸類成分和內(nèi)酯類成分的提 取 、 分離 。 4 專屬試劑沉淀法 定義：某些試劑能選擇性地沉淀某類成分 ， 稱為專屬試劑 沉淀法 。 如 （ 1） 雷氏銨鹽能與水溶性生物堿類生成沉淀 ， 可用于分 離水溶性生物堿與其它生物堿； （ 2） 膽甾醇能和甾體皂苷沉淀 ， 可使其與三萜皂苷分離； （ 3） 明膠能沉淀鞣質(zhì) ， 可用于分離或除去鞣質(zhì)等 。 三 鹽析法 方法： 于天然產(chǎn)物水提取液中加入某些無機(jī) 鹽至一定濃度或達(dá)到飽和狀態(tài) ， 可使某些成 分由于溶解度降低而沉淀析出 。 常用的無機(jī)鹽： HCl、 Na2SO4等 。 四 結(jié)晶法 1 關(guān)于結(jié)晶和重結(jié)晶概念： 結(jié)晶是指由非結(jié)晶狀態(tài)到形 成結(jié)晶的操作過程 。 重結(jié)晶指由純度低結(jié)晶處理成純度高 結(jié)晶的操作過程 。 二者從操作角度差別是起始物不同 。 2 結(jié)晶和重結(jié)晶操作： 提取或分離物 ↓溶于選擇的溶劑 ， 加熱成飽和溶液 ， 過濾 溶液 ↓放置 （ 冷藏 ） 析晶 ， 過濾 粗結(jié)晶 ↓重復(fù)上述操作 （ 重結(jié)晶 ） 結(jié)晶 3 、影響結(jié)晶的因素 ： 1）結(jié)晶用溶劑的選擇是最重要因素之一。 一般應(yīng)符合下列條件： （ 1） 要對被結(jié)晶成分熱時溶解度大 、 冷時溶解度??；對雜質(zhì)或冷熱時都溶解 ， 或冷 熱時都不溶解 。 （ 2） 與被結(jié)晶成分不發(fā)生化學(xué)反應(yīng) 。 （ 3） 沸點不宜太高 。 除用單一溶劑外，天然藥物成分的結(jié)晶常用一定比例的混合溶劑。 2） 純度：