分光光度法ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-02 08:10 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ??? ???????? cmm o lLbcAκ3 2+ 3 N N F e + Fe2+ NN五、吸光度的加和性 A總 = ∑ Ai =κ1b1c1 + κ2b2c2 + …… κ nbn 總的吸光度等于各個(gè)吸光物質(zhì)的吸光度之和。 或溶液的吸光度應(yīng)等于溶液中各組分的吸光度之和。（組分間沒有干擾） A4 A3 A2 A1 溶液中多組分測(cè)定 )()()()()()()()(222111ybcyκxbcxκAybcyκxbcxκA???? 一、物理因素： 單色光不純，導(dǎo)致負(fù)偏差。 C A 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線圖 正誤差 負(fù)誤差 散射光的影響，膠體、乳濁液或懸濁液由于散射的作用使吸光度增大，或入射光不是垂直通過比色皿產(chǎn)生正偏差。 有色溶液對(duì)朗伯 比爾定律的偏離 二、化學(xué)因素 吸光質(zhì)點(diǎn)的相互作用，濃度較大時(shí)，產(chǎn)生負(fù)偏差， 朗伯 比爾定律只適合于稀溶液（ c 102 molL1 )。 平衡效應(yīng)，物質(zhì)的離解、締合、互變異構(gòu)及化學(xué)變化引起的偏離，如： Fe(SCN)3 = Fe3+ + 3SCN Cr2O72 + H2O = 2CrO42 + 2H+ 分光光度計(jì)及主要部件 光源 單色器 檢測(cè)系統(tǒng) 吸收池 1光源 ：應(yīng)有足夠的發(fā)射強(qiáng)度而且穩(wěn)定 ,如鎢 絲燈 2單色器 ：采用棱鏡或光柵獲得單色光。 3吸收池 ：比色皿，厚度有 、 3cm等。 4檢測(cè)器 ：光電池或光電管。 722型光柵分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖 分光光度計(jì)的分類以及 721 / 722型分光光度計(jì)的使用方法見實(shí)驗(yàn)教材。 顯色反應(yīng)和顯色條件的選擇 在分光光度分析中，利用顯色反應(yīng)把待測(cè)組分 X 轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩衔?，然后再進(jìn)行測(cè)定。 使試樣中的被測(cè)組分與化學(xué)試劑作用生成有色化合物的反應(yīng)叫顯色反應(yīng)。 mX(待測(cè)物 )＋ nR(顯色劑 )＝ XmRn(有色化合物 ) 顯色反應(yīng)主要有配位反應(yīng)和氧化還原反應(yīng)，其中絕大多數(shù)是配位反應(yīng)。 對(duì)顯色反應(yīng)的要求 靈敏度高，選擇 ? 較大的顯色反應(yīng)。避免共存組分干擾。 選擇性好，顯色劑只與被測(cè)組分反應(yīng)。 有色物組成固定，如： Fe3+ + 磺基水楊酸 → 三磺基水楊酸鐵 (黃色 ) （組成固定） Fe3+ + SCN → FeSCN 2+、 Fe(SCN)2 + …… （組成不固定） 有色物穩(wěn)定性高，其它離子干擾才小。如三磺基水楊酸鐵的 Kf =1042 , F 、 H3PO4 對(duì)它無干擾。 顯色過程易于控制，而且有色化合物與顯色劑之間的顏色差別應(yīng)盡可能大。 nm60|| m a xm a x ??? RMR ???? 顯色反應(yīng)條件的選擇 顯色劑用量 ，適當(dāng)過量。適宜的用量通過實(shí)驗(yàn)求得 c(R) A c(R) A c(R) A 在 pH＝ 2～ 3 Fe(ssal)+ 在 pH＝ 4～ 7 Fe(ssal)22 在 pH＝ 8～ 10
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