組培應(yīng)用ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-30 03:38 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 處理時間，也會鈍化植物組織中的抗性因子； ? 熱處理以后僅有一小部分植株能夠存活。 脫毒技術(shù) 2 2 莖尖脫毒培養(yǎng) 植物莖尖不存在病毒，或病毒數(shù)量、種類少； 病毒的復(fù)制速度不及莖尖細胞的生長速度，病毒難以進入到分生組織中。 莖尖培養(yǎng)是生產(chǎn)無毒植株最重要、最有效的組培方法，在草本植物上廣泛應(yīng)用，在十幾種木本植物上也取得了成功。 脫毒培養(yǎng)的方法 1 從帶病植株上切取莖尖、芽尖作為外植體，常規(guī)消毒后在培養(yǎng)基上培養(yǎng)成小植株，經(jīng)過脫毒檢測以后，將脫毒苗移栽到隔離區(qū)種植，作為原種繁殖。 2 愈傷組織脫毒培養(yǎng) 莖尖分生組織培養(yǎng)一個莖尖只能得到一株無毒苗，對繁殖率低的植物而言效率不高，如果先用組織培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織，再從愈傷組織分化出無病毒植株，效率提高。 愈傷組織脫毒的原因 a，感染病毒的愈傷組織內(nèi)還存在部分無病毒細胞； b，感染病毒的愈傷組織在分裂過程中產(chǎn)生新的無病毒細胞； c，愈傷組織中細胞之間的胞間聯(lián)系減少，缺乏輸導(dǎo)組織，病毒傳導(dǎo)受限； d，通過連續(xù)的繼代，選擇了無病毒的或含有少量病毒的細胞簇。 3 原生質(zhì)體脫病毒培養(yǎng) 類似于愈傷組織脫毒， Shepard報道得到 4140株煙草再生植株， %為無毒植株。 4 繁殖組織脫毒培養(yǎng) 利用花組織培養(yǎng)獲得無毒株。 如珠心、胚珠，病毒不能進入珠心和胚珠。 5 莖尖顯微嫁接脫毒 木本植物莖尖分生組織脫毒培養(yǎng)屢遭失敗，后來提出一種顯微嫁接技術(shù)。 具體做法： 將砧木種子經(jīng)消毒后播于 MS培養(yǎng)基，生長 2周以后，把莖尖分生組織熱脫毒后再嫁接到砧木上。 莖尖脫毒的理論基礎(chǔ) ? 莖尖培養(yǎng)之所以能獲得無毒苗，是由于病毒在植物體內(nèi)分布不均勻，在頂端分生組織中是無毒的； ? 病毒靠維管系統(tǒng)傳播移動，分生組織中還沒有形成維管束，病毒只能通過胞間連絲移動； ? 分生組織代謝旺盛，鈍化病毒的活性較高； ? 頂端分生組織高濃度的激素濃度可能會抑制病毒增殖。 莖尖脫毒技術(shù)要領(lǐng) 1 莖尖的剝?nèi)? 消毒后的材料放在解剖鏡下，用解剖針或解剖刀把分生組織剝?nèi)∠聛?，迅速放入莖尖培養(yǎng)基中。 如果在空氣中暴露時間過長，會失水死亡。 剝?nèi)∏o尖的原則是既要脫掉病毒，又要使莖尖容易成活，一般以 ~1mm之間為宜。 離體莖尖越大越容易成活，但病毒越難根除。 2 選用合適的培養(yǎng)基和激素 莖尖剝離后一般采用低激素濃度的固體培養(yǎng)基； 兩階段培養(yǎng)： 第一階段，以保證莖尖成活為主要目的； 第二階段，莖尖成活以后，長至 2~3cm時更換培養(yǎng) 基，以提高繁殖系數(shù)為主要目的。 3 脫毒苗的移栽 適合脫毒苗移栽的基質(zhì)有珍珠巖、蛭石、泥沙等的混合物； 幼苗健壯、有良好根系的苗容易成活； 4 脫毒苗的田間管理 脫毒苗移到大田以后，要特別嚴防病毒的再次感染。 選好種植區(qū)，選在
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