組培實驗室的設計ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-30 03:38 本頁面
【文章內容簡介】 １０ １０ １０ 成 分 用量（ｇ／ｌ） 每升培養(yǎng)基用量（ｍｌ） 母液 3（鐵鹽） ２ .７３ ２ .７８ １０ 母液 4（維生素、氨基酸） 肌醇 煙酸 鹽酸吡哆醇 鹽酸硫胺素 甘氨酸 １０ .０ ０ .０５ ０ .００１ ０ .０５ ０ .２ １０ 培養(yǎng)基的配制 在潔凈的不銹鋼鍋里放入 750ml蒸餾水，加入所需要的瓊脂和糖，加熱熔化。 加入儲備液 1－４０ｍｌ，儲備液 ３、４各１０ｍｌ，按需要量加入植物激素。 用蒸餾水定容到 1L。 調ｐ H值。ＰＨ一般５ .８ 培養(yǎng)基的分裝。 包扎。 培養(yǎng)基的高壓滅菌。 培養(yǎng)基的滅菌 ? 高溫高壓蒸汽滅菌： 121℃ ， ㎡ ，1520芬，時間過長，培養(yǎng)基成分易變性失效 ? 過濾滅菌：在高溫高壓下易分解的培養(yǎng)基和激素類 第三節(jié)：外植體的選擇與培養(yǎng) 主要內容： ? 外植體的選擇 ? 外植體的滅菌 ? 外植體的接種和培養(yǎng) ? 外植體的成苗途徑 ? 污染的原因及預防措施 ? 外植體的褐變及其防止措施 ? 培養(yǎng)物的玻璃化現(xiàn)象及其預防措施 一、外植體的選擇 外植體 （ Explant） ： 是指植物離體培養(yǎng)中的各種接種材料。包括植物體的各個器官、組織、細胞和原生質體等。 外植體選擇的要求 ? 選擇優(yōu)良的種質：材料的選擇要有目的 ,具有一定的代表性 ,提高成功率 ,增加實用性。 ? 選擇健壯的植株：選取發(fā)育正常的器官或組織，再生能力強，組培易成功。 ? 選擇合適的大小：根據(jù)不同的植物而異，太大容易污染，太小，多形成愈傷組織甚至難于成活。一般在 。 ? 選擇最適的時期：一般按植物生長的最適時期選取材料 外植體的類型 莖尖（園藝植物組織培養(yǎng)中應用最多，繁殖率高，不易發(fā)生遺傳變異，但取材有限） 莖段（采用嫩莖的切段促進腋芽萌發(fā)，取材容易） 葉（幼嫩葉片組織通過愈傷組織或不定芽分化產(chǎn)生植株，取材容易，操作方便，但易發(fā)生變異）； 花球和花蕾 種子、根、塊根、塊莖、花瓣等。 二、外植體的滅菌 外植體的消毒是組培成功與否的第一關鍵步驟。 ?外植體的預處理： 對外植體進行修整 ,去掉不要的部分 ,在流水下沖洗干凈 . ?外植體的表面滅菌： 原則： 充分滅菌，但不傷外植體；不同的外植體，滅菌的要求也不一樣 常用滅菌藥劑的使用和效果 消毒劑 使用濃 /% 清除難易 消毒時/min 滅菌效果 次氯酸鈉 2 易 530 很好 次氯酸鈣 910 易 530 很好 漂白粉 飽和溶液 易 530 很好 升汞 較難 210 最好 酒精 7075 易 好 過氧化氫 1012 最易 515 好 溴水 12 易 210 很好 硝酸銀 1 較難 530 好 抗菌素 450mg/L 中 3060 較好 常用的滅菌方法 ? (1)莖尖、莖段及葉片等的消毒：用清潔劑清洗75%酒精浸泡 1020min無菌水洗 23次或 Naclo或升汞溶液泡 1015min無菌水洗 34次 ? （ 2）果實和種子的消毒
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