細(xì)菌遺傳課時(shí)ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-29 07:37 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 15 20 25 時(shí)間距離 8 11 18 25 cM距離 160 220 360 500 thr leu azi ton lac gal 三、接合重組 (六 )中斷雜交與作圖 基因精確定位 中斷雜交難確定緊密連鎖基因距離 中斷雜交中已知 lac比 ade先進(jìn)入 F lac+ade+與內(nèi)基因間有 a,b兩種方式插入受體。在基本培養(yǎng)基上有 40個(gè)斑 ,顯然是兩基因沒(méi)有交換的親型 lac+ade+；在無(wú) ade的完全培養(yǎng)基上有 10個(gè)斑 ,必然是兩基因間交換產(chǎn)生的重組型 lacade+。則重組率 =lacade+數(shù)占總數(shù)的百分率。 Rf(lacade) =(lacade+)/(lac+ade++lacade+) =(10)/(40+10)=20% =(lacade+)/ade+ 所以 ,1min時(shí)間距離 ≈20cM； lac+ade+ lac ade lac+ade首次轉(zhuǎn)入型 lac ade+重組型 基本培養(yǎng) 40斑 無(wú) ade完全 10斑 大腸桿菌染色體呈環(huán)狀 三、接合重組 (六 )中斷雜交與作圖 Hfr菌株不同轉(zhuǎn)移基因的起點(diǎn)及方向也不同。 Hfr H是 thi→ gal→lac→pro→ton→azi→thr 逆時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)移； Hfr1是 azi→ton →pro→ lac→gal→thr 順時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)移，兩菌株轉(zhuǎn)移結(jié)果證明。 thi為起點(diǎn)逆時(shí)針?lè)较? azi為起點(diǎn)順時(shí)針?lè)较? pro為起點(diǎn)順時(shí)針?lè)较? （一）性導(dǎo)因子 （ F`factor） 當(dāng) F因子不規(guī)則環(huán)去，攜帶有細(xì)菌染色體片斷時(shí)產(chǎn)生含有細(xì)菌基因的 F因子，稱(chēng) F`factor。 F因子不同，插入細(xì)菌染色體位置不同，帶走細(xì)菌基因也不同。則形成的 F`因子也就不同。 F+與 Hfr 能相互轉(zhuǎn)變 F因子與寄主基因組交換、整合形成 Hfr，與菌株染色體成環(huán)剪切和環(huán)出 會(huì)形成 F+為可逆過(guò)程 四、性導(dǎo)重組 （ sex duction rebination ） 改變受體性別 三者差異：因 F `與 F+均能使 F變成 F+(環(huán)狀 DNA獨(dú)立 )，但 Hfr不能 (插入細(xì)菌基因組內(nèi) ) 基因高頻轉(zhuǎn)移 三者差異： F`與 Hfr均攜帶細(xì)菌基因， 基因隨 F因子高頻轉(zhuǎn)移；F+未攜帶細(xì)菌基因， F因子轉(zhuǎn)移快但基因轉(zhuǎn)移率低 受體形成部分二倍體 三者差異： F`與 Hfr因攜帶的細(xì)菌基因，能與細(xì)菌基因組配對(duì)形成部分二倍體， F+卻不能。 （二） F’作用特點(diǎn)及與 F+、 Hfr差異比較 四、性導(dǎo)重組 （ sex duction rebination ） （三）性導(dǎo) (sex duction)概念與過(guò)程 四、性導(dǎo)重組 （ sex duction rebination ） F`因子將甲物種基因轉(zhuǎn)入乙物種并表達(dá)的過(guò)程。 概念 過(guò)程 F`攜帶甲基因 → 侵入 乙 → 部分二倍體 → 內(nèi)外基因間重組 → 攜帶基因表達(dá)。 F+攜帶甲基因 F’ 浸染乙物種 F’ 甲基因在乙表達(dá) 將甲基因插入乙 部分二倍體 （三）性導(dǎo)（ sex duction） 四、性導(dǎo)重組 （ sex duction rebination ） ① 作基因載體： F`因子 能 自主復(fù)制、穩(wěn)定遺傳。 ② 顯隱性研究： F`因子進(jìn)入 受體后，部分二倍體中隱性基因不表達(dá)，離開(kāi)受體隱性基因能表達(dá) 。 ③ 互補(bǔ)性測(cè)驗(yàn)： F`因子進(jìn)入受體后，內(nèi)外基因功能不互補(bǔ)是同一順?lè)醋?，互補(bǔ)是不同的順?lè)醋印? ④ 基因作圖：內(nèi)外基因間重組進(jìn)行基因定位。 性導(dǎo)作圖原理 連鎖基因間距離愈近，并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo) (cosex duction)頻率愈高，反之則反。據(jù)并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率進(jìn)行基因定位，性導(dǎo)作圖方法和步驟在轉(zhuǎn)導(dǎo)作圖中講。 性導(dǎo)的意義 五、轉(zhuǎn)導(dǎo)重組與作圖（ transduction rebinating and mapping） (一 )轉(zhuǎn)導(dǎo)重組的發(fā)現(xiàn)及鑒定 ： Lederberg， 1951，鼠傷寒沙門(mén)氏菌 ： ⑴ U形管分開(kāi)兩菌株仍有 wt。說(shuō)明不是接合、性導(dǎo)重組； ⑵加二硝基苯或 DNA酶后仍有 wt。說(shuō)明不是轉(zhuǎn)化重組； ⑶ P22抗性品系的 LT2菌株替代 LT2無(wú) wt。說(shuō)明親本 LT2中有 P22 ⑷ 親本 LT2中加 P22血清也無(wú) wt。證明通過(guò)濾孔的是 P22質(zhì)粒。 P22是沙門(mén)氏菌溫和型噬菌體，又稱(chēng)過(guò)濾因子。它能裂解 LT2菌株，包裝 LT2基因進(jìn)入 LT22。 以噬菌體為媒介轉(zhuǎn)遞基因并表達(dá)稱(chēng)轉(zhuǎn)導(dǎo)重組 (transduction rebination) LT22(phetrptyrhis) LT2(phe+trp+tyr+his+) 混合 4h后 基本培養(yǎng)基培養(yǎng) 野生型菌斑率高達(dá) 105 ，為什么？ ① DavisU形管分開(kāi)雙親無(wú)野生型，不分開(kāi)有野生型，說(shuō)明是接合或性導(dǎo)重組。 ② DavisU形管分開(kāi)雙親后有野生型，可能是轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)化重組。添加二硝基苯、氯霉素或 DNA酶后無(wú)野生型產(chǎn)生說(shuō)明是轉(zhuǎn)化重組，反之為轉(zhuǎn)導(dǎo)重組。 ③ DavisU形管分開(kāi)雙親后有野生型，添加過(guò)濾因子自身血清前有野生型、添加后無(wú)野生型為轉(zhuǎn)導(dǎo)重組。 五、轉(zhuǎn)導(dǎo)重組與作圖 (二 )轉(zhuǎn)導(dǎo)、性導(dǎo)、轉(zhuǎn)化與接觸重組的區(qū)別 (三 )普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) (general transduction) 五、轉(zhuǎn)導(dǎo)重組與作圖 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) ： phage傳遞供體 基因組任一 基因，并在受體表達(dá) 轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程 侵染 供體 → 降解染色體 → 誤裝形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子→ 釋放再侵染 → 部分二倍體 → 轉(zhuǎn)導(dǎo)子命運(yùn)：①外基因降解稱(chēng)丟失；②外基因不復(fù)制稱(chēng)流產(chǎn)；③外基因被整合，供體性狀表達(dá)。 ① 普遍性：供體基因組內(nèi)任一基因均有可能被轉(zhuǎn)導(dǎo)，隨機(jī)性 ②低頻性：多為 3 105 ，該頻率來(lái)由： 沙門(mén)氏菌染色體約 23千個(gè)基因，噬菌體頭部能裝 2030個(gè)基因，占 1%；沙門(mén)氏菌中有轉(zhuǎn)導(dǎo)能力的約 %。 所以，基因普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率 = 3 105 。 (三 )普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)
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