【文章內容簡介】
nd Gln573) are shown in red. Two mutations in close proximity of the active site (Pro511 and Asp908) are shown in magenta. Two mutations far away from the active site and on the protein surface (Val9 and Gln135) are shown in green. The rest of the substrate binding and active site residues are shown in yellow.. 牛乳糖酶到巖藻糖苷酶的直接進化( JIHU ZHANG等, 1997) 二、隨機引物 PCR(RPR)和重組裝 How DNA shuffling works ? 多功能氧化酶的定向進化 ( Hikaru Suenaga等 ,2022) 三、交錯延伸 PCR突變法 (StEP) How DNA shuffling works ? 枯草桿菌蛋白酶 E熱穩(wěn)定性的分子進化 ( Huimin Zhao等, 1999) 進化的熱穩(wěn)定性枯草芽孢桿菌蛋白酶 E的突變譜系 進化后的枯草桿菌蛋白酶 E 正面 反面 芽孢桿菌脲酸酶的定向 進化 ( SuHua Huang等 ,2022) 定點突變的研究意義 ? 研究基因結構與功能之間的關系 2. 對編碼基因進行突變 ? 檢驗特定殘基在蛋白質結構、催化活性和配基結合能力中的作用 ? 獲得突變蛋白 定點突變的類型 ? 寡核苷酸介導的基因突變 指用含有突變堿基的寡聚核苷酸片斷作為引物,在聚合酶的作用下啟動 DNA分子進行復制。 ? 盒式突變 是利用一段人工合成的含基因突變序列的寡核苷酸片段,取代野生型基因中的相應序列。 ? PCR介導的基因突變 DNA定點突變的種類 ?寡聚核苷酸介導 替換、插入、刪除 ?盒式突變