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dna突變技術ppt課件-wenkub.com

2025-04-28 18:15 本頁面
   

【正文】 Steps of Multipoints Mutagenesis Kit (TaKaRa) 適用于插入片段長度在。 Multi SiteDirected Mutagenesis Kit TaKaRa公司的 Multipoints Mutagenesis Kit 一種簡便快速的定點突變的方法 Stratagen公司研制的 Quickchange試劑盒 ,可以雙鏈DNA質粒為模板,只需一對引物,進行一次 PCR,在1~ 2d內(nèi)即可完成點突變過程。 優(yōu)點: 幾乎沒有特殊限制,而且成功率高,因此運用非常廣泛。 此法的成功關鍵,是要得到好的含U單鏈模板 DNA。 在正常情況下,尿嘧啶 N 糖基化酶 (ung+)可以去除摻入 DNA中的尿嘧啶殘基。a Jesu180。 ? 根據(jù)其特點可將基因突變技術分兩大類: 定點突變 表型篩選 ?隨機突變 易錯 PCR法 (Errorprone PCR) ?降低一種 dNTP的量(降至 5% 10%) ?加入 dITP來代替被減少的 dNTP ?緩沖液中另加 + DNA Shuffling ?外顯子、單基因和基因家族的重組裝 ?隨機引物延伸法 ?交錯延伸法 ?定點突變 點突變 —— 堿基 刪除、增補和替換 易錯 PCR(epPCR) How DNA shuffling is done in the tube ? Random fragmentation of a pool of related genes。 ? Selfpriming polymerase reaction and template switching (causing crossovers)。 s Arrizubieta等, 2022) 耐熱 p硝基苯酯酶的分子進化 (Lori Giver等, 1998)
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