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正文內(nèi)容

透射電鏡樣本的制備(編輯修改稿)

2025-05-27 12:10 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 組織無變形,微細結(jié)構(gòu)保存良好 軟硬度適中并易于調(diào)整 ? Epon812:環(huán)氧樹脂包埋劑。淡黃色液體,黏度較低,易滲入組織,對細胞結(jié)構(gòu)保存好,在配制時需充分?jǐn)嚢?。聚合后成為具有穩(wěn)定三維空間結(jié)構(gòu)的固體。 Epon812 DDSA(十二烷基琥珀酸酐) 固化劑:控制軟度 MNA (甲基內(nèi)次甲基鄰苯二甲酸酐) 固化劑:控制硬度 DMP30( 2,4,6三,二甲氨基甲基苯酚) 加速劑 包埋劑配方 季節(jié)配比 包埋液成份 5mL 10mL 20mL 30mL 40mL 50mL 春秋 Epon812 DDSA MNA DMP30 夏 Epon812 DDSA MNA DMP30 冬 Epon812 DDSA MNA DMP30 包埋板 切片 ? 修塊 ? 切片 超薄切片機 ? 機械推進式:通過微動螺懸及微動杠桿使標(biāo)本臂向刀刃作微小推進。 ? 熱脹冷縮式推進:利用機內(nèi)金屬桿在加熱或冷卻的微小變化來推進。 ? 判斷切片厚度:利用切片反射的光和從切片下水面反射光發(fā)生干涉,不同厚度切片在顯微鏡下呈現(xiàn)不同的干涉色,干涉色與切厚度的關(guān)系是: 灰色 4050nm 分辨率高,反差小 銀白色 5070nm 金黃色 7090nm 分辨率低,反差好 紫色 90nm以上 電子束不易穿過 FORMVAR膜制備 Formvar( PVF)溶于純二氯乙烯制成 %的制膜液 染色 ? 組織細胞的成分主要由碳、氫、氧、氮等低原子序數(shù)的元素組成,不能形成足夠的反差。 ? 利用重金屬離子對不同細胞結(jié)構(gòu)的結(jié)合能力不同,使各細胞結(jié)構(gòu)對電子產(chǎn)生不同散射程 度以增強反差。 染色劑 酸酸鈾 ?核酸、核蛋白、結(jié)締組織纖維成分 ?糖原、分泌顆粒、溶酶體 ?對膜結(jié)構(gòu)染
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