滅菌及無(wú)菌空氣的制備(編輯修改稿)
2025-05-27 02:02 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 基中微生物孢子數(shù) /（個(gè) /ml） 9 900 90 000 9000 000 900 000 000 105℃ 滅菌所需時(shí)間 /min 2 14 20 36 48 培養(yǎng)基中微生物孢子在 105 ℃ 滅菌所需時(shí)間 在實(shí)際生產(chǎn)中，不宜采用嚴(yán)重霉變的原料和腐敗的水質(zhì)。 影響滅菌效果的因素 ? 培養(yǎng)基的物理狀態(tài) 固體培養(yǎng)基比液體培養(yǎng)基滅菌時(shí)間長(zhǎng)； 顆粒越大 ，滅菌時(shí)蒸汽穿透所需時(shí)間越長(zhǎng)，滅菌難，對(duì)于小于 1mm的顆粒培養(yǎng)基，不必考慮顆粒對(duì)滅菌的影響，但含有少量大顆粒和粗纖維的培養(yǎng)基的滅菌，則要適當(dāng)提高溫度，在不影響培養(yǎng)基質(zhì)量的條件下，采用粗過(guò)濾的方法預(yù)先處理，以防止培養(yǎng)基結(jié)塊而造成滅菌不徹底。 6. 其他 ：微生物細(xì)胞的含水量、菌齡、攪拌和空氣排除情況等會(huì)影響培養(yǎng)基的滅菌效果。 三、發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌工藝 分批滅菌 （ 實(shí)罐滅菌 ， 實(shí)消 ） 連續(xù)滅菌 （ 連消 ） 固體滅菌 （一）分批滅菌 分批滅菌也叫間歇滅菌或 實(shí)罐滅菌、實(shí)消 。 培養(yǎng)基的分批滅菌就是將配制好的培養(yǎng)基放在發(fā)酵罐或其他裝置中，通入蒸汽將培養(yǎng)基和所用設(shè)備一起進(jìn)行加熱滅菌的過(guò)程， 也稱為實(shí)罐滅菌，或?qū)嵪? 優(yōu)點(diǎn)：無(wú)需其他附屬設(shè)備，操作簡(jiǎn)便； 缺點(diǎn)：加熱和冷卻時(shí)間長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)成分有一定損失，不能采用高溫快速滅菌 一般采用 121℃ 分批滅菌的時(shí)間計(jì)算 若不計(jì)升溫階段所殺滅的菌數(shù)，把培養(yǎng)基中所有的菌均看成在保溫階段被殺死，可粗略計(jì)算滅菌所需時(shí)間。 例：發(fā)酵罐內(nèi)裝 40m3培養(yǎng)基，在溫度 121℃ 下進(jìn)行實(shí)罐滅菌。原污染程度為每毫升 2 105感染耐熱細(xì)菌芽孢， 121℃ 時(shí)滅菌速率常數(shù)為 ，求滅菌失敗概率為 。 解： N0=40 106 2 105（個(gè)） Nt=（個(gè)） k= ㏑ 滅菌時(shí)間： t= N0 Nt 1 k = ㏒ （ 8 1015） =（ min） 240 160 120 80 時(shí)間（ min) 0 50 100 150 溫度 升溫 冷卻 保溫 分批滅菌過(guò)程包括： 升溫、保溫和冷卻等三個(gè)階段。 各階段對(duì)滅菌的貢獻(xiàn)：20%、 75%、 5%。 應(yīng)當(dāng) 避免長(zhǎng)時(shí)間的升溫加熱階段 ，因?yàn)榧訜釙r(shí)間過(guò)長(zhǎng)，不僅破壞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而且也有可能引起培養(yǎng)液中某些有害物質(zhì)的生成，從而影響培養(yǎng)過(guò)程的順利進(jìn)行。 分批滅菌溫度變化曲線 分批滅菌的工藝操作 操作過(guò)程： 空罐準(zhǔn)備：清洗、檢修和檢測(cè) 升溫：把培養(yǎng)基加熱到滅菌所需的溫度，夾套和直接通蒸汽加熱 保溫維持：在滅菌溫度下保持滅菌所需時(shí)間 冷卻保壓：把培養(yǎng)基降低到接種的溫度 三路進(jìn)汽： 蒸汽直接從通風(fēng)、取樣和出料口進(jìn)入罐內(nèi)直接加熱，直到所規(guī)定的溫度，并維持一定的時(shí)間。這就是所謂的 “ 三路進(jìn)氣 ” 。 四路出汽： 直接蒸汽從排氣、接種、進(jìn)料和消沫劑管排氣 分批滅菌設(shè)備示意圖 ? 思考： 滅菌過(guò)程培養(yǎng)基的體積和成份變化，對(duì)發(fā)酵過(guò)程有何影響？ 優(yōu)點(diǎn)： 不需要專門的設(shè)備，投資少，對(duì)設(shè)備要求簡(jiǎn)單，對(duì)蒸汽的要求也比較低，而且滅菌效果可靠。 ?連續(xù)滅菌時(shí)，培養(yǎng)基可在 短時(shí)間內(nèi)加熱到保溫溫度 ，并且能 很快地被冷卻； ?因此可在比分批滅菌 更高的溫度下 進(jìn)行滅菌； ?而由于 滅菌溫度很高 ， 保溫時(shí)間 就相應(yīng)地可以 很短， 極有利于減少培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的破壞。 （二）連續(xù)滅菌 連續(xù)滅菌的溫度變化 培養(yǎng)基的連續(xù)滅菌就是將配制好的培養(yǎng)基在向發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝置輸送的同時(shí)進(jìn)行加熱、保溫和冷卻而進(jìn)行滅菌。 連續(xù)滅菌時(shí)間的計(jì)算： 連續(xù)滅菌的時(shí)
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