開題報告-不同后處理對蟬花孢梗束腺苷含量變化的研究(編輯修改稿)
2025-02-14 22:05 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 度干燥處理后蟬花孢梗束中腺苷、麥角甾醇和甘露醇含量及變化的原因。探索蟬花孢梗束干燥的最佳工藝，以期為今后的蟬花孢梗束加工及其他蟲草制品的干燥加工工藝提供理論支持。研究方法CK：新鮮蟬花孢梗束采收后用抽濕機(jī)抽濕24小時后，再在60℃烘箱中烘干：60℃干燥：新鮮蟬花孢梗束采收后直接置于60℃烘箱中烘干；80℃干燥：新鮮蟬花孢梗束采收后直接置于80℃烘箱中烘干；108℃干燥：新鮮蟬花孢梗束采收后直接置于108℃烘箱中烘干；蒸煮后烘干：新鮮蟬花孢梗束采收后在100℃的蒸汽中蒸10min后，再置于60℃烘箱中烘干。（1）對照品溶液的制備 精密稱取10mg腺苷對照品，置于10mL容量瓶中，加超純水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得1mg/ml對照品。（2）腺苷供試品溶液的制備 ，精密稱定，置10mL塞具試管中，精密加入5mL去離子水，密塞，25℃超聲（40KHz）處理30分鐘，取上清液，即得供試品溶液。各條件下的樣品分別重復(fù)制作5次，編號備用。精確稱取供試樣品1g置于100mL容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度。100℃水浴2h，過濾，用蒸餾水洗滌殘渣；將濾液和洗液合并，并定容至200mL，備用。精確稱取供試樣品1g，置于50mL容量瓶中，加CHCl3至刻度，超聲波處理30min，放冷，再稱定重量，用CHCl3補足減少的重量，搖勻，用微量移液器量取1mL，置于Eppendorf管內(nèi)，5000rpm離心5min，用微量移液器小心吸取上清液放置于新的Eppendorf內(nèi)，備用。色譜柱：XBridgeC18色譜柱(Water，250mm，5181。m)； XBridgeC18保護(hù)住(Water，20mm，5181。m)；流動相：（5：95）；流速：；檢測波長：280nm；柱溫：25；進(jìn)樣量：20181。l定量環(huán)滿環(huán)進(jìn)樣 水分含量的測定將各樣品取出少量放入水分活度儀托盤中小心涂抹均勻后測量，待樣品的質(zhì)量持續(xù)30秒不再減少后記錄樣品的水分含量。每種樣品做5組平行實驗。（1） 腺苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定精密稱取腺苷對照品（Adenine≥99%）10mg，、 5181。g/ml、 20181。g/ml、30181。g/m l、40181。g/ml、50181。g/ml、的對照品系列溶液6份溶液，精密吸取對照品系列溶液各20微升注入高效液相色譜，按“”項下色譜測定峰面積積分值。根據(jù)樣品濃度和峰面積來制定標(biāo)準(zhǔn)曲線。以對照品溶液濃度（181。g/ml）為橫坐標(biāo)X，峰面積積分值（微伏秒）為縱坐標(biāo)Y。（2）儀器精密度實驗取濃度為5181。g/ml對照品溶液，按照“”項下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次。根據(jù)測的結(jié)果，用腺苷峰面積和腺苷含量的濃度計算出RSD ，根據(jù)RSD與 2%的大小關(guān)系，來說明儀器精密度的實驗結(jié)果是否良好，符合精密度要求。（3）重復(fù)性實驗（對照品）6份，精密稱定，按“”項供試品溶液的制備方法，制成同一濃度的供試品溶液6份，分別精密吸取各供試拼溶液1mL，各精確加入超純水1mL制成2倍供試品稀釋液，混勻，備用。按“”項下色譜條件分別檢測，測定峰面積積分值，由回歸方程得腺苷待測液濃度，根據(jù)公式1得到供試品腺苷含量（mg/g）。根據(jù)腺苷含量平均值（n=6），求出RSD%并與3%比較，來說明重復(fù)性實驗結(jié)果良好，是否符合重復(fù)性要求。 （4）準(zhǔn)確度實驗（對照品），置20mL塞具試管中，分別精密加入“”項下對照品溶液300181。g，再分別精確加入超純水10mL，搖勻按“”項下方法，制備同等濃度供試樣品溶液6份。分別精密取各供試品1mL，各精確加入超純水1mL制成2倍稀釋液，即得待測液，混勻備用。分別精密取上述待測液各20181。g，按“”項下色譜條件分別進(jìn)樣，測定峰面積積分值，由回歸方程得待測腺苷總濃度（181。g/ml）根據(jù)公式2計算回收率。若回收率在95%~105% 范圍內(nèi)， RSD%＜5%，說明回收實驗結(jié)果良好，符合標(biāo)準(zhǔn)度要求。 腺苷樣品的測定 分別精密取“”項下腺苷供試樣品待測液各20181。l，按“”項下色譜條件分別進(jìn)樣測定峰面積積分值并記錄。帶入腺苷標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計算腺苷含量。 麥角甾醇含量的測定（1）麥角甾醇標(biāo)
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