工業(yè)微生物接種技術(shù)(編輯修改稿)
2025-02-14 01:25 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 可能伸入試管的其他部位也灼燒滅菌 4）拔出棉塞 5）取菌：用冷卻接種針的針尖沾取少量菌種 6）穿刺：水平法和垂直法。 將接種針自培養(yǎng)基中心平穩(wěn)、快速垂直刺入培養(yǎng)基， 至接近試管底部，然后沿接種線拔出 7）塞上棉塞 8）接種針灼燒滅菌 （ 1）劃線接種 目的：使混合的細菌呈單個分散生長，形成單個菌落，以便獲得純菌。 分區(qū)劃線法 第一區(qū)劃線 滅菌接種環(huán) 第二區(qū)劃線 滅菌接種環(huán) 第三區(qū)劃線 滅菌接種環(huán) ※ 適用于含菌量較多的標本 連續(xù)劃線法 ※ 適用于含菌量較少的標本 稀釋法：微生物分離、純化 ?稀釋倒平板法 :菌懸液稀釋 — 不同梯度的稀釋液少許與培養(yǎng)基混合 — 搖勻 — 倒培養(yǎng)皿中 ?稀釋混合平板法（傾注法）： 稀釋 — 培養(yǎng)皿中加入不同梯度的菌懸液 1mL— 加 45℃ 左右 的培養(yǎng)基 — 搖勻 ?稀釋涂布平板法：倒平板 稀釋 接種 —涂布 各種接種方法的用途 用于鑒定和保存菌種。 可觀察細菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象或用作生化反應實驗 穿刺接種法，用于保存菌種或觀察細菌動力 ? 目的： 使混合的細菌呈單個分散生長，形成單個菌落，以便獲得純菌。 ? 方法： – 分區(qū)劃線法： 適用于含菌量較多的標本。 – 連續(xù)劃線法： 適用于含菌量較少的標本。 ： 用于 分離、 測定標本中活菌數(shù)和藥敏實驗細菌接種 ： 用于活細菌計數(shù)。 是將需要的某種微生物從混雜的微生 物群體中分離出來，得到只含有一種 微生物的培養(yǎng)物。 是由一個單細胞或一種細胞群繁殖 得到的后代稱純培養(yǎng)。 菌種的分離 微生物的純培養(yǎng) 三、菌種的分離方法 ? 獲得純培養(yǎng)的方法 ： 平板劃線分離法 1 2 單細胞挑取法 3 組織分離法 4 選擇培養(yǎng)基分離 5 三、菌種的分離方法 稀釋平板分離法 單細胞挑取法 用顯微挑取器，從待分離材 料中挑取一個細胞來培養(yǎng)，從 而獲得純培養(yǎng)的方法。 毛細管法： 用毛細管提取微生物個體，適于較大微生物 顯微操作儀： 用顯微針、鉤、環(huán)等挑取單個細胞或孢子 小液滴法： 將經(jīng)過適當稀釋后的樣品制成小液滴，在顯微鏡下選取只含一個細胞的液滴來進行純培養(yǎng)物的分離。 組織分離法 分離步驟 ⑴制作培養(yǎng)基并對培養(yǎng)基滅菌。 ⑵對組織塊進行消毒處理： 在無菌條件 下，用無菌刀片切取小塊受病組織，放 入 %的升汞水中浸泡 23min，再用無 菌水沖洗數(shù)次。 是用感病的生物體組織來分離微生 物得到純培養(yǎng)物的方法。 ⑶接種： 把組織塊分割成小塊，放到平板培 養(yǎng)基表面。每個平皿中放入 35個小組織塊 ⑷培養(yǎng) :適溫培養(yǎng)到組織塊周圍長出單菌落 ⑸轉(zhuǎn)管純化： 將需要的單菌落轉(zhuǎn)接到斜面試 管培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后得到純培養(yǎng)物。 此種方法適合于病原微生物的分離。 ? 使待分離微生物生長特征“突出”； ?抑制大多數(shù)其它微生物的生長； ?使待分離微生物生長更快。 微生物群落中數(shù)量占少數(shù)的微生物得到分離純化： 顏色反應：分離特定的菌株 牛奶平板：分離蛋白酶產(chǎn)生菌 ? 使待分離微生物生長特征“突出” ? 高溫下培養(yǎng)：分離嗜熱細菌 ? 培養(yǎng)基中不含 N：分離固氮菌 ? 培養(yǎng)
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