分子生物學(xué)第一章緒論(編輯修改稿)
2025-02-14 00:40 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 了 DNA結(jié)構(gòu)的雙螺旋模 型，搞清楚了生物遺傳的分子機(jī)制 3. 60年代，確定了遺傳信息的傳遞方式： DNA→RNA→protein is the geic material The geic material of phage T2 is DNA. DNA is the geic material is a double helix DNA is a double helix central dogma 定向基因改造設(shè)想 設(shè)想一 能否讓禾本科的植物也能夠固定空氣中的氮？ 能否讓細(xì)菌“吐出”蠶絲？ 設(shè)想二 能否讓微生物產(chǎn)生出人的胰島素、干擾素等珍貴的藥物？ 設(shè)想三 經(jīng)過多年的努力，科學(xué)家于 20世紀(jì) 70年代創(chuàng)立了可以定向改造生物的新技術(shù) —— 基因工程。 （二）技術(shù)上的四大發(fā)明 ? 基因的剪刀 —— 限制性內(nèi)切酶 ? 基因的針線 —— DNA連接酶 ? 基因的車子 —— 載體 ? 逆轉(zhuǎn)錄酶 限制性內(nèi)切酶 ? 能識(shí)別雙鏈 DNA中特定堿基順序的核酸水解酶 ? 大都從原核生物中發(fā)現(xiàn)提取的 ? 以內(nèi)切方式水解核酸鏈中磷酸二酯鍵 5’P 3’OH ? 分類： Ⅰ 型 :復(fù)合功能酶 ,兼有修飾、切割兩種特性，識(shí)別位點(diǎn) 和切割位點(diǎn)不一致，不能形成特異片段。 Ⅲ 型：與 Ⅰ 型相似。 Ⅱ 型：通常所說的限制性內(nèi)切酶，識(shí)別序列為 4～ 6個(gè) bp。 DNA連接酶 ?將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來，使之成為一個(gè)完整的 DNA分子。 ?連接的部位： 磷酸二酯鍵，不是氫鍵 載體 ? 是攜帶靶 DNA片段進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增和表達(dá)的工具。 ? 質(zhì)粒（ plasmid)為最常用的載體。 可自主復(fù)制 有遺傳標(biāo)記和篩選標(biāo)記 具多克隆位點(diǎn) 逆轉(zhuǎn)錄酶 1970年， Baltimore和 Temin等同時(shí)各自發(fā)現(xiàn)了逆轉(zhuǎn)錄酶，打破了遺傳學(xué)的中心法則，使真核基因的制備成為可能 1973年 Cohen完成第一個(gè)基因工程實(shí)驗(yàn) 經(jīng)體外重組獲得雜合 DNA 雜合子轉(zhuǎn)化入大腸桿菌 ?所需元件： 限制性內(nèi)切酶 連接酶 載體 受體細(xì)胞 基因工程過程示意圖 ① 從細(xì)胞中分離出 DNA ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ② 限制酶截取DNA片斷 ③ 分離大腸桿菌中的質(zhì)粒 ④ DNA重組 ⑤ 用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌 ⑥ 培養(yǎng)大腸桿菌克隆大量基因 Two Methods for Delivering DNA into Plant Cells 制備抗蟲 轉(zhuǎn)基因植 物。 分離毒素蛋白基因 將毒素基因插入 到 Ti質(zhì)粒中 1994 Transgenic tomatoes sold in the shops Two methods of producing transgenic mice 轉(zhuǎn)基因 動(dòng)物的 一般制 備過 程。 轉(zhuǎn)基因動(dòng) 物的一般 制備過程 （續(xù)）。 1988 Transgenic sheep 1989 a transgenic pig 帶有人生長(zhǎng)激素基因的 轉(zhuǎn)基因小鼠 正常小鼠 Producing Enviropigs Transgenic
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