豬瘟耐熱凍干保護(hù)劑活疫苗(編輯修改稿)
2025-02-13 13:09 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 氫鍵的能力，從而阻止和限制細(xì)胞膜因脫水而融合，降低相變溫度，使脂膜不易向凝膠相轉(zhuǎn)變而保持液晶相，增加膜的流動(dòng)性 ? 保護(hù)劑對(duì)蛋白質(zhì)的保護(hù) 由于蛋白質(zhì)分子中存在大量的氫鍵，結(jié)合水通過氫鍵與蛋白質(zhì)分子聯(lián)結(jié)。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)在冷凍干燥過程中失去水分后，保護(hù)劑的羥基能夠替代蛋白質(zhì)表面上水的羥基，使蛋白質(zhì)表面形成一層“水合層”，這樣就可以保護(hù)氫鍵的連結(jié)位置不直接暴露在周圍環(huán)境中，從而保持了蛋白質(zhì)天然結(jié)構(gòu)和功能的完整性 3 儲(chǔ)藏過程中的保護(hù)機(jī)理 干燥過程中出現(xiàn)的引起蛋白質(zhì)變質(zhì)的時(shí)間尺度為小時(shí)，而對(duì)于儲(chǔ)藏而言，時(shí)間尺度為月或年。在正確冷凍干燥工藝中，要求產(chǎn)品溫度接近于其玻璃化轉(zhuǎn)變溫度，而在正確的儲(chǔ)藏條件下，環(huán)境溫度應(yīng)當(dāng)比其玻璃化轉(zhuǎn)變溫度低得多，以獲得很長(zhǎng)的松弛時(shí)間 ? 保護(hù)劑指導(dǎo)原則 ? 蛋白質(zhì)、二糖、氨基酸和緩沖鹽水 ? 疫苗塊的倒塌溫度由賦形劑組成的相對(duì)濃度決定 ? 保護(hù)劑應(yīng)在抗原收獲或凍干前加入抗原中 ? 它應(yīng)含有中和羧基活性的物質(zhì) ? 電解質(zhì)成分應(yīng)含量最少 ? 影響保護(hù)劑的因素 ? 種類、濃度、配制方法 ? 滅菌方法 ? pH值 ? 制品表面積 四 . 耐熱保護(hù)劑在 配制 過程中注意事項(xiàng) 1. 保護(hù)劑在配制過程中注意事項(xiàng) ? 水的標(biāo)準(zhǔn) ? 稱量的準(zhǔn)確度和誤差 ? 溶解順序 ? 大分子物質(zhì)與小分子物質(zhì)混合 ? 保護(hù)劑貯存溫度 ① 配制過程中水的要求 配制用水為注射用水或去離子水，水的電導(dǎo)率＜ 1μ s/cm（相當(dāng)于 100萬 Ω）。 ② 保護(hù)劑的稱量 在配制過程中，用量筒準(zhǔn)確量取所需注射用水量， 準(zhǔn)確稱取各保護(hù)劑成分逐次加入，一種成分完全 溶解后再加入另一種成分，直至完全加完。（操作 必須由 2個(gè)人來完成， 1人稱量、 1人復(fù)核）。 ③ 按照保護(hù)劑配方中的先后順序依次加入溶解。 ④ 大分子物質(zhì)與小分子物質(zhì)混合時(shí)，邊搖邊加，使二者充分混勻，混合后觀察有無沉淀，如有沉淀應(yīng)停止使用。 ⑤ 耐熱保護(hù)劑均應(yīng)按保護(hù)劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行保存，不合理的保存也會(huì)影響保護(hù)劑的耐熱性能。 2. 耐熱保護(hù)劑的滅菌 ? 大分子部分（高壓部分） ? 高壓溫度高，時(shí)間過長(zhǎng) 高壓瓶子的大小也會(huì)影響保護(hù)劑的性能，同是一批 保護(hù)劑，使用 1000ml裝量瓶與 8000ml裝量瓶高壓后 保護(hù)劑的性能有明顯差異，裝液體多的瓶子上溫時(shí) 間較慢，這樣在達(dá)到某一溫度就需要很長(zhǎng)時(shí)間，導(dǎo) 致保護(hù)劑中各成分分解變性 ? 高壓后悶鍋現(xiàn)象 保護(hù)劑在高壓后不及時(shí)打開高壓鍋門，致使保 護(hù)劑在同一溫度停留的時(shí)間比較長(zhǎng)，影響保護(hù) 劑中各成分性能，導(dǎo)致保護(hù)劑在凍干過程中起 不到保護(hù)作用 解決方法： 按耐熱保護(hù)劑滅菌的要求時(shí)間、溫度進(jìn)行操作 （ 121℃15 分鐘） ,建議使用適當(dāng)?shù)娜萜?，裝量不 宜過大（達(dá)到上溫快、降溫快）。高壓后，儀表 降至零，應(yīng)立即打開高壓鍋門，不要把保護(hù)劑悶 在鍋里等冷卻后取出，更不要在高壓鍋里過夜 ? 小分子部分（過濾部分） 不匹配的濾芯也會(huì)影響保護(hù)劑的質(zhì)量。不合理濾芯 對(duì)耐熱保護(hù)劑中各物質(zhì)分子吸附過多，致使保護(hù)劑 各成分的最終含量低于保護(hù)劑配方的要求含量。影 響耐熱保護(hù)劑活疫苗的產(chǎn)品質(zhì)量 解決方法： 要求吸附性小的濾芯，最好是進(jìn)口的。進(jìn)口濾芯 （ Millipore）即可以增加使用次數(shù)，除菌效果 又好。國(guó)產(chǎn)濾芯吸附性大，而且使用次數(shù)少，又 不穩(wěn)定，影響保護(hù)劑的質(zhì)量 3. 耐熱保護(hù)劑保存與使用 ? 按耐熱保護(hù)劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求保存。大分子部 分與小分子部分按比例混合后置 2～ 8℃ 保存，一 般不要超過 10日 ? 每一種保護(hù)劑在使用過程中禁止單一加入 (如：將小分子加入抗原后，再加入大分子物質(zhì) )， 應(yīng)將小分子物質(zhì)與大分子物質(zhì)按比例混合均勻后 與抗原混合，進(jìn)行分裝 五 . 凍干工藝的優(yōu)化 ? 凍干過程 1 預(yù) 凍 2 一次干燥（冰升華） 3 二次干燥（解吸附作用） 凍 ? 預(yù)凍速度：控制在每分鐘下降 1℃ 左右 ? 產(chǎn)品降至－ 40℃ 或凍干機(jī)所能降的溫度，確保箱內(nèi)所有疫苗瓶?jī)?nèi)都降到共熔點(diǎn) 以下 ? 一般以每小時(shí) 2～ 5℃ 為宜 ? 板層溫度應(yīng)控制在 10℃ 至 3℃ 之間 ? 獸用活疫苗在 30℃ 或以下溫度進(jìn)行 ? 真空應(yīng)維持在 100－ 120tor(13332－ 16000帕斯卡） ? 成品看不到冰，產(chǎn)品溫度開始向板層溫度靠近 3. 二次干燥 ? 以 5～ 10℃ /h 為宜，最終制品溫度不能超過它的安全溫度 ? 每步增加板層溫度，每 2小時(shí)升溫 10℃ 成品溫度應(yīng)該迅速等于板層溫度
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