疫定性試驗(yàn)結(jié)果判讀(周育洋)(編輯修改稿)
2025-02-13 12:15 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 其中 ﹥ 50歲者占 %~% 陽性率 %~% 我們?cè)趺磻?yīng)答 ： 供血與受血者，手術(shù)，創(chuàng)傷性檢查，院內(nèi)感染控制 。（婚檢）必查項(xiàng)目。 實(shí)驗(yàn)室診斷 （病原體 1） ? DFM暗視野顯微鏡找 Tp：病灶組織液、腫大淋巴結(jié)穿刺液。 167。 Tp呈白色發(fā)光，運(yùn)動(dòng)快速，開塞鉆樣旋轉(zhuǎn)。 167。 單次陽性率＜ 50%，多灶取樣，連續(xù)檢查。 167。 注意安全防護(hù)。 實(shí)驗(yàn)室診斷 （病原體 2） ? DFAT直接熒光抗體檢查 Tp： 167。 病灶組織液、腫大淋巴結(jié)穿刺液。涂片、干燥、丙酮固定。 167。 FITC─抗 Tp單抗 染色，熒光顯微鏡檢查。 167。 注意安全保護(hù)。 實(shí)驗(yàn)室診斷 （病原體 3） ? PCR核酸檢查 ： ? 敏感性差異大，不能區(qū)分 。 ? 已建立一些新方法（如 MGBTaqMan探針熒光定量PCR），需廣泛驗(yàn)證。 實(shí)驗(yàn)室診斷 （血清學(xué)） ? 非密螺旋體抗體試驗(yàn)（ nontreponemal antibody tests ,NTrAT） : 測(cè)抗類脂抗體（反應(yīng)素 regain）。 其 靶抗原 是宿主細(xì)胞被螺旋體感染后釋放的類脂（ lipoidal）物質(zhì)、螺旋體釋放的自身脂蛋白樣物質(zhì)（ lipoproteinlike material）和心磷脂（ cardiolipin） ? 密螺旋體抗體試驗(yàn)（ treponemal antibody tests ,TrAT） ：測(cè)抗 Tp特異抗體。 其 靶抗原 是 Tp的 Nichols株的純化處理物。 實(shí)驗(yàn)室診斷（ NTrAT） ? NTrAT： 1） VDRL（ venereal disease research laboratory） 2） RPR（ rapid plasma reagin） 3） USR（ unheated serum reagin） 4） TRUST（ toluidine red unheatedserum test） ? NTrAT：抗原為心磷脂、膽固醇、卵磷脂按適當(dāng)比例配制 的乙醇溶液 1） VDRL：待測(cè)血清加熱滅活，顯微鏡觀察。 2） USR：血清不加熱顯微鏡觀察。 3） RPR：抗原染成黑色，血清不加熱，肉眼觀察。 4） TRUST：抗原染成紅色，血清不加熱，肉眼觀察。 實(shí)驗(yàn)室診斷 （ TrAT） ★ TPHA （ hemagglutination assay） ★ TPPA（ particle agglutination assay） ★金標(biāo)記免疫層析 ★ ELISATP ★ FTAABS（ fluorescent Tpantibody absorption） ★ FTAABSDS（ FTAABS double staining） ★免疫印跡試驗(yàn) ? TrAT：抗原為梅毒螺旋體 Nichols株特異抗原。 （ 1） TPHA： Nichols株超聲或 SDS提取抗原，包被甲醛、鞣酸處理的 SRBC,遇血清中抗體血凝。血清用 Reiter株，牛、羊 RBC，正常兔血清和兔睪丸提取物吸收。 （ 2） TPPA：染成紅色明膠顆粒包被抗原。試劑盒中未配吸收劑。 （ 3） ELISA：純化或重組 （ 15000、 17000、 4202 47000）包被，間接法或雙抗原夾心法。未配吸收劑。 （ 4） FTAABS: Nichols株制片，丙酮固定，待測(cè)血清用含 Reiter株吸收劑吸收。 FITC抗人 IgG（ IgM）示蹤。 （ 5） FTAABSDS：同上，第一次熒光染色用四甲基異硫氰酸羅達(dá)明標(biāo)記的抗人 IgG ；第二次熒光染色用 FITC標(biāo)記抗 Tp抗體。 （ 6）免疫印跡（ WB）： Nichols株純化抗原 SDSPAGE，電轉(zhuǎn)印至 NC膜或 PVDF膜，待測(cè)血清不吸收，與膜上抗原反應(yīng)，再與酶標(biāo)抗人 IgG反應(yīng)，顯色。 （ 7）金標(biāo)記免疫層析：膜條上包被純化的 Tp抗原，待測(cè)血清不吸收，與膜端金標(biāo)抗人 IgG結(jié)合后層析至測(cè)試區(qū)與 Tp抗原結(jié)合，出現(xiàn)呈色條帶。 梅毒血清學(xué)試驗(yàn)敏感性與特異性 試驗(yàn) 敏感性 特異性 一期 二期 潛伏 三期 VDRL 78（ 74~87） 100 95（ 88~100） 71（ 37~94） 98（ 96~99） RPR 86（ 77~100） 100 98（ 95~100） 73（ 36~96） 98（ 93~99） USR 80（ 72~88） 100 95（ 88~100） ─ 99 TRUST 85（ 77~86） 100 98（ 95~100） ─ 99（ 98~99） NTrAT 試驗(yàn) 敏感性 特異性 一期 二期 潛伏 三期 FTAABS 84（ 70~100 ） 100 100 96 97（ 94~100） FTAABSDS 80（ 69~90） 100 100 ─ 98（ 97~100） TPHA 76（ 69~90） 100 97（ 97~100） 94 99（ 98~100） TPPA 80（ 86~100） 100 100 ─ 96（ 95~100） ELISAIgG ……………… 97 （ 97~100） ………… 99 （ 98~100） 注：無分期資料 TrAT 梅毒實(shí)驗(yàn)室檢查難點(diǎn) ? 本屬包括 4種對(duì)人致病和至少 6種對(duì)人不致病的密螺旋體。 Tp和其它該屬螺旋體在形態(tài)學(xué)上無法區(qū)別；核酸雜交試驗(yàn) DNA同源性 ≧ 95%；已知的基因序列高度一致性；蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)及與某些單克隆抗體反應(yīng)幾乎相同。 ? 因此，只能依靠對(duì)人和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的致病譜來加以區(qū)別。 螺旋體的分類及致病性螺旋體種類 屬 種 疾 病 傳播方式或媒介 Ⅰ 疏螺旋體（ Borrelia） 伯氏疏螺旋體 萊姆病
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