生物選修1課堂教學課件微生物的分離與計數(shù)(編輯修改稿)
2025-02-12 19:23 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 培養(yǎng)基進行尿素分解菌的分離過程中，從對應稀釋倍數(shù)為 106的培養(yǎng)基中， A、B兩同學分別得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果。 A同學篩選出 150個菌落。 B同學篩選出 50個菌落。 B認為 A的培養(yǎng)基被雜菌污染了，或培養(yǎng)基中混入了其他含氮物質(zhì)，因而導致不能分解尿素的細菌也能在該培養(yǎng)基中生長。 A確認自己的操作無誤，但也拿不出能令人信服的證據(jù)。 請你幫助 A同學改進實驗，提供具有說明了的證據(jù)。 設置對照 — 同等條件下，培養(yǎng)空白培養(yǎng)基 ?設置對照 設置對照的目的： 排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。 對照實驗 是指除了 被測試 的條件外，其他條件都 相同 的實驗。滿足該條件的稱為 對照 組，未滿足該條件的稱為 實驗 組。 尿素培養(yǎng)基 未接種的尿素培養(yǎng)基 105 104 ?實驗過程 （一）土壤取樣 取樣的位置： 土壤，天然培養(yǎng)基，含有大量的微生物，其中 70～90％是細菌。在富含有機質(zhì)的土壤層的 3～8cm處中分布著絕大多數(shù)的細菌。 取樣要求：鏟去表層土。 菌落計數(shù) 配制土壤溶液 系列稀釋 涂布平板與培養(yǎng) （二）樣品稀釋 （ 1）測細菌數(shù)：一般用 10 10 106稀釋液 （ 2）測放線菌：一般用 10 10 105稀釋液 （ 3）測真菌數(shù)：一般用 10 10 104稀釋液 原則：確保平板上的菌落數(shù)在 30～300之間。 （三）微生物的培養(yǎng)與觀察 接種：用適當?shù)南♂屢鹤魍坎计桨? 培養(yǎng)：細菌： 30～37℃ ， 1～2d。 放線菌 :25～28℃, 5 ～7d。 霉菌 : 25～28℃, 3 ～4d. 觀察： 24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目 “ 穩(wěn)定 菌落 ” 為觀察對象 （四）鑒定 鑒別培養(yǎng)基：不影響微生物的生存 酚紅培養(yǎng)基： 鑒定分解尿素的細菌 原理：脲酶催化尿素分解成氨 → 培養(yǎng)基堿性增強 → 酚紅變紅 →脲酶陽性 復習 纖維素酶是一種 復合酶 ，一般認為它至少包括三種組分 ，即 C1酶、 CX酶和葡萄糖苷酶 ，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種 酶將纖維二糖分解成葡萄糖。 纖維素 纖維二糖 葡萄糖 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 背景知識 濾紙崩潰法 纖維素酶活性的測定實驗： 背景知識 剛果紅可以與纖維素形成 紅色復合物 ，當纖維素被 纖維素酶 分解后，紅色復合物無法形成，出現(xiàn)以 纖維素分解菌 為中心的 透明圈 ，我們可以通過 是否產(chǎn)生透明圈 來篩選纖維素分解菌。 背景知識 實驗流程示意圖 一、實驗目的 二、實驗原理 三、所需儀器、材
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