[醫(yī)學(xué)]核酸基礎(chǔ)知識(shí)(編輯修改稿)
2025-02-12 04:37 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 收 1 2 3 鑒定純度： 純 DNA的 A260/A280應(yīng)為 純 RNA的 A260/A280應(yīng)為 五、變性、復(fù)性和分子雜交 變性 —— 在物化因素影響下，核酸互補(bǔ)堿基之間的氫鍵斷裂的現(xiàn)象。 ? DNA：雙鏈變成兩條單鏈 ? RNA：局部雙螺旋被破壞，失去原有的空間構(gòu)象 五、變性、復(fù)性和分子雜交 復(fù)性 —— 變性 DNA在一定條件下，兩條互補(bǔ)的單鏈重新締合而恢復(fù)天然的雙螺旋結(jié)構(gòu)，其物理性質(zhì)和生物活性隨之恢復(fù)的過(guò)程。 ?熱變性的 DNA在緩慢冷卻后可以復(fù)性，也稱為 退火 。 五、變性、復(fù)性和分子雜交 分子雜交 —— 在變性的 DNA溶液中加入外源 DNA單鏈分子或RNA單鏈分子，去掉變性條件后復(fù)性形成雙螺旋結(jié)構(gòu)的過(guò)程。 ? DNA雜交： DNADNA ? RNA雜交： DNARNA 意義： ? 基因診斷最常用的基本技術(shù)，是定性、定量檢測(cè)特異 DNA或 RNA片段的有力工具。 探針變性 （加熱）雜交 （緩慢冷卻）復(fù)性 （緩慢冷卻）（加熱）（緩慢冷卻）（緩慢冷卻）（加熱）（加熱）（緩慢冷卻）（緩慢冷卻）（緩慢冷卻）（緩慢冷卻）第五節(jié) 核苷酸代謝 一、體內(nèi)核苷酸分布情況及來(lái)源 二、核苷酸的分解代謝 三、核苷酸的合成代謝 一、體內(nèi)核苷酸分布情況及來(lái)源 分布情況 ? 體內(nèi)核苷酸主要是 5′ 核苷酸，核糖核苷酸濃度（ mmol）遠(yuǎn)大于脫氧核糖核苷酸（ μ mol）。 ATP最多。 體內(nèi)核苷酸的來(lái)源 ? 食物核酸消化吸收 ? 體內(nèi)核酸的降解 ? 體內(nèi)生物合成：完全能夠滿足機(jī)體需要 嘌呤核苷酸的分解 過(guò)程： AMP GMP 次黃嘌呤 黃嘌呤 尿酸 二、核苷酸的分解代謝 黃嘌呤氧化酶 腺嘌呤脫氨酶 鳥嘌呤脫氨酶 A G 正常： 119~357181。mol/L 痛風(fēng)癥的治療機(jī)制 鳥嘌呤 次黃嘌呤 黃嘌呤 尿酸 黃嘌呤氧化酶 別嘌呤醇 胞嘧啶 尿嘧啶 胸腺嘧啶 二氫尿嘧啶 β脲基丙酸 β脲基異丁酸 CO2 +NH3 H2NCH2CH2COOH β丙氨酸 H2NCH2CHCOOH CH3 β氨基異丁酸 嘧啶核苷酸的分解 二、核苷酸的分解代謝 二、核苷酸的合成代謝 ?從頭合成途徑 (de novo synthesis pathway) ?補(bǔ)救合成途徑 (salvage synthesis pathway) 利用磷酸核糖、氨基酸、一碳單位及 CO2等簡(jiǎn)單物質(zhì)為原料，經(jīng)過(guò)一系列酶促反應(yīng)，合成核苷酸的途徑 利用體內(nèi)游離的嘌呤或嘌呤核苷，經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的反應(yīng)，合成核苷酸的過(guò)程 （一） 嘌呤核苷酸的合成 從頭合成途徑： ? 原料 ： 天冬氨酸 、 甘氨酸 、谷氨酰胺、一碳單位、 CO 5磷酸核糖 ? 場(chǎng)所 ：肝臟（主要）、小腸粘膜、胸腺 C C C C C N N N N ? 過(guò)程 ： 5磷酸核糖 +ATP PRPP+AMP IMP AMP GMP PRPP合成酶 天冬氨酸 甘氨酸 谷氨酰胺 一碳單位CO2 CO2AspGly甲酰基（一碳單位）Gln（酰胺基）甲?；ㄒ惶紗挝唬?腺苷酸代琥珀酸合成酶 ③ IMP脫氫酶 ②腺苷酸代琥珀酸裂解酶 ④ GMP合成酶 AMP ADP ATP ADP ATP 激酶 ADP ATP 激酶 GMP GDP GTP ADP ATP 激酶 ADP ATP 激酶 補(bǔ)救合成途徑： ? 原料 ：體內(nèi)游離的嘌呤和嘌呤核苷 ? 場(chǎng)所 ：脾臟、腦、骨髓等胞液 ? 過(guò)程 腺嘌呤 +PRPP AMP+PPi 次黃嘌呤 IMP 鳥嘌呤 GMP ? 嘌呤核苷的再利用 ： 腺嘌呤核苷 AMP APRT +PRPP HGPRT 腺苷激酶 ATP ADP （一） 嘌呤核苷酸的合成 （二）嘧啶核苷酸的合成 從頭合成途徑 ? 原料 ： 氨基甲酰磷酸 、 天門冬氨酸 、 5磷酸核糖 ? 場(chǎng)所 ：肝細(xì)胞胞液 ? 過(guò)程 ： ①先合成嘧啶環(huán)，再與在 PRPP相連，首先 合成 UMP ② 再由 UMP轉(zhuǎn)化為 UDP、 UTP、 CMP 氨基甲酰磷酸天冬氨酸① UMP的合成： ? UMP合成原料： 谷氨酰胺 、 CO （ 谷氨酰胺 +CO2+ATP+ → 氨基甲酰磷酸 ） 、天冬氨酸、 5磷酸核糖 。 O C HN CH C CH N R5P O ② UTP、 CTP的合成： ? UMP UDP UTP ? UTP+Gln+ATP
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