hplc方法學ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-10 07:02 本頁面
【文章內容簡介】 ， 過高會降低塔板數(shù) 。 ? 當流動相粘度增加時 ， 塔板數(shù)會降低 ， ? 對于反相體系 ， 水的粘度較高意味著在高溫時操作有利于最大限度的增大塔板數(shù) ， 在 50度時較好 。 ? 工作壓力：低于 150bar ? 操作時間：應盡可能短 ? 峰高：只要檢測靈敏度有限，需要窄而高的峰 ? 溶劑應用：對日常工作、大量實驗，每次進樣少消耗流動相為好 ? 保留值與分離度的重現(xiàn)性 ? 1選柱時 ， 應考慮其化學性質 ? 2在流動相中用緩沖劑 ， 以除去化學的或硅羥基效應 ，盡量減少譜峰拖尾 。 ? 3保證溫度 、 流速 、 和壓力 、 溶劑成分恒定 ? 4脫氣 ? 5保證上樣不超載 1～ 10ug/mg填料 。 ? 6使用同一批生產(chǎn)批號的材料 ? 柱壞 ? 污物在柱進口處堆積 ? 樣品超載 ? 樣品溶劑不合適 ? 化學或次級保留效應 ? 緩沖不足 ? 重金屬污染 ? 進樣閥體積過大 ? 進樣閥 、 色譜柱及檢測器之間的管線過長或直徑過粗 ? 檢測器流動池體積過大 ? 1檢測條件的選擇 ? 2梯度洗脫進行首次實驗 ? 3優(yōu)化流動相的選擇性 ? 提高分離度有三種方法： ? 1 提高塔板數(shù) ? 2 改變有機相比例 ， 以改變譜峰間距 ? 3 更換流動相溶劑 ， 以改變譜峰間距 ? 一次初始的梯度操作通常足以判斷出大約正確的溶
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