hela細胞傳代培養(yǎng)ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-10 03:41 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 4ml ? DHanks工作液試劑配方 ? DHanks原液 100ml 三蒸水 896ml % 酚紅液 4ml ? 消化液： ? 胰蛋白酶作用于與賴氨酸或精氨酸相連接的肽健 ， 除去細胞間粘蛋白及糖蛋白 ， 影響細胞骨架 ， 從而使細胞分離 。 ? ? 胰蛋白酶液濃度越高 ， 作用越強 ， 但超過一定限度會損傷細胞 。 ? 胰蛋白酶是一種黃白色粉末 ， 用無 Ca2+、 Mg2+的 PBS緩沖液配制常用的胰蛋白酶液濃度是 ％ 。 用濾器過濾除菌 。 ? 胰蛋白酶液消化時間： 210分鐘 。 ? 用含血清培養(yǎng)液終止其對細胞的消化作用 培養(yǎng)基 培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是維持體外細胞生存和生長的溶液，分天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。 天然培養(yǎng)基： 天然培養(yǎng)基有血清、血漿、和組織提取液（如雞胚和牛胚浸液）。 優(yōu)點：營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果好 缺點：來源受限。 成分復(fù)雜，影響對某些實驗產(chǎn)物的提取和實驗結(jié)果的分析。 易發(fā)生支原體污染 合成培養(yǎng)基 合成培養(yǎng)基是根據(jù)細胞生存所需物質(zhì)的種類和數(shù)量，用人工方法模擬合成的。目前已設(shè)計出許多種培養(yǎng)基，如TC19 MEM、 RPMI16 DMEM等。 合成培養(yǎng)基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質(zhì)。 優(yōu)點：標準化生產(chǎn)，組分和含量相對固定。 成本低 缺點： 缺少某些成分，不能完全滿足體外細胞生長需要。 ? 人工合成培養(yǎng)基只能維持細胞生存 ， 要想使細胞生長和繁殖 ， 還需補充一定量的天然培養(yǎng)基 （ 如血清 ） 。 ? 血清中含有： ① 多種蛋白質(zhì) （ 白蛋白 、 球蛋白 、鐵蛋白等 ） ② 多種金屬離子 ③ 激素； ④ 促貼附物質(zhì) ， 如纖粘蛋白 、 冷析球蛋白 、 膠原等 。 ⑤ 各種生長因子 ⑥ 轉(zhuǎn)移蛋白 ⑦ 不明成分
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