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正文內(nèi)容

微生物發(fā)酵工程案例教學(xué)(編輯修改稿)

2025-02-09 22:51 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 發(fā)酵條件:有氧環(huán)境、搖床 250rev/min30℃ 。 LB培養(yǎng)基 YPD培養(yǎng)基 B培養(yǎng)基 CM培養(yǎng)基 實驗方法 用于這項研究的菌株、質(zhì)粒和引物: 實驗方法 ? DNA片段的 PCR擴(kuò)增 ? 分別構(gòu)建包含 yqhD基因的 pZR1質(zhì)粒和 dahB基因的pZR2質(zhì)粒 ? 分別構(gòu)建包含 yqhD基因的 pZR1質(zhì)粒和 dahB基因的pZR2質(zhì)粒 ? 土壤農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化 ? 啤酒酵母染色體上的 yqhD和 dhaB基因的 PCR與印跡雜交分析 ? 氣相色譜法測定 1,3丙二醇 實驗方法 分別構(gòu)建包含 yqhD基因的 pZR1質(zhì)粒和 dahB基因的 pZR2質(zhì)粒;構(gòu)建 pZR3質(zhì)粒;構(gòu)建包含 yqhD和dhaB基因的質(zhì)粒 pZR4 實驗方法 土壤農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化 在本研究通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法將 yqhD基因和 dhaB基因整合到啤酒酵母的染色體上。 第一步,質(zhì)粒 pZR4通過電穿孔轉(zhuǎn)染到農(nóng)桿菌 LBA4404,形成 LBA4404ZR4在含有博來霉素的 B培養(yǎng)基上培養(yǎng)過夜,收菌,在 B培養(yǎng)基上重懸培養(yǎng)(含或不含 100umol/l乙酰丁香酮),生長到 1x1011cell ml
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