原核生物的基因重組(編輯修改稿)
2025-02-09 14:36 本頁面
【文章內容簡介】 )是非溶源性細菌 一個表面看起來的常規(guī)研究卻導致 一個驚奇和十分重要發(fā)現(xiàn)的重要例證！ 基因的傳遞很可能是由可透過“ U”型管濾板的 P22噬菌體介導的 (在接種 LT22A的一端出現(xiàn)了原養(yǎng)型 ) （普遍性轉導這一重要的基因轉移途徑的發(fā)現(xiàn)） (2) 轉導模型 轉導噬菌體為什么 “ 錯” 將宿主的 DNA包裹進去 ? 噬菌體的 DNA包裝酶 也能識別染色體 DNA上類似 pac的位點 并進行切割，以 “ headful”的包裝機制包裝進 P22噬菌體外殼， 形成只含宿主 DNA的轉導噬菌體顆粒 （假噬菌體） 。 因為染色體上的 pac與 P22 DNA的 pac序列不完全相同， 利用效率較低，這種 “ 錯裝 ” 機率一般僅約 106108 形成轉導顆粒的噬菌體可以是溫和的，也可以是烈性的，但必須具有能偶爾識別宿主 DNA的包裝機制，并在宿主基因組完全降解以前進行包裝。 普遍性轉導的基本要求： 普遍性轉導的三種后果： 進入受體的外源 DNA通過與細胞染色體 的重組交換而形成穩(wěn)定的轉導子 流產轉導（ abortive transduction） 轉導 DNA不能進行重組和復制，但其攜帶的基因可經過轉錄而得到表達。 特點：在選擇培養(yǎng)基平板上形成微小菌落 外源 DNA被降解，轉導失敗。 如果受體菌通過普遍轉導獲得了供體菌 DNA片段后，在其體內不發(fā)生基因的交換、整合和復制，只進行轉錄、翻譯和性狀的表達。這種轉導被稱為流產轉導 . 2. 局限轉導（ restricted transduction） 定義： 通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數(shù) 特定基因攜帶到受體菌中，并與后者的基因 組整合、重組，形成轉導子的現(xiàn)象。 媒介： 部分缺陷噬菌體 （丟失自身一部分基因，并被 同等長度的宿主基因所取代） 只能轉導個別特定基因 大腸桿菌中 λ噬菌體的正常裂解及半乳糖基因轉導噬菌體的形成過程 低頻轉導（ LFT） 的定義 : 誘導溶源性大腸桿菌而產生的細胞裂解產物中，除含有正常的噬菌體外，還有少數(shù)（ 106）轉導噬菌體顆粒，因此，用誘導 λ溶源性菌株得來的噬菌體進行轉導時的轉導頻率不過 106 ， 稱為低頻轉導 。 高頻轉導 (HFT): 如果細菌染色體中整合有一個正常的 λ噬菌體時， 缺陷 λ噬菌體也能整合到同一細菌染色體上 （因為正常λ噬菌體整合后，產生兩個細菌 /噬菌體雜合 att位點，缺陷 λ噬菌體可以在該位點插入），這種細菌稱為雙重溶源菌 . 雙重溶源菌中，正常 λ噬菌體稱為 輔助噬菌體 ，因為它幫助缺陷噬菌體整合和繁殖。 雙重溶原菌 在紫外輻射等因子的誘導下 ,原噬菌體容易被切割下來， 產生等量的缺陷噬菌體和正常噬菌體，該裂解物稱為高頻率轉導裂解物 ，用這樣的裂解物去感染細菌，將比低頻率轉導裂解物產生多得多的轉導子。這一過程稱為高頻轉導。 大腸桿菌的低頻轉導和高頻轉導比較： uv K12(λ ) LFT 裂解物 λ
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