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原核生物的基因重組(已修改)

2025-01-25 14:36 本頁面
 

【正文】 第六節(jié) 原核生物的基因重組 基因重組 ( gene rebination): 將兩個不同性狀個體的基因通過一定的方式轉移到一起,并發(fā)生重新組合,產(chǎn)生新的遺傳性狀的過程,稱為基因重組 (gene rebination)或遺傳重組。 重組 : 遺傳物質在 分子水平 上發(fā)生的交換; 雜交 : 在 細胞水平 上遺傳物質的交換 . 雜交必然包含著重組,但重組不僅限于雜交這一形式。 原核生物的基因重組類型 4種形式: 1)轉化 2)轉導 3)接合 4)原生質體融合 一、 轉化( transformation) 定義 : 受體細胞直接吸收供體細胞的 DNA片段 , 并與其染色體同源片段進行遺傳物質交換,從而使受體細胞獲得新的遺傳性狀的現(xiàn)象。 轉化子( transformant) : 經(jīng)轉化后出現(xiàn)了供體性狀的受體細胞稱為 轉化子 , 即轉化成功的菌落。 目前已知有二十多個種的 G+和 G細菌具有自然轉化的能力 此過程可以發(fā)生在土壤和海洋環(huán)境中,可能是自然界遺傳交換的重要方式。 自然遺傳轉化( natural geic transformation) 人工轉化( artificial transformation) 感受態(tài)細胞 ( petent cell) : 具有攝取外源 DNA能力的細胞 1. 感受態(tài) 感受態(tài):是指受體細胞最易接受外源 DNA片段并能實現(xiàn)轉化的一種生理狀態(tài)。一個細菌能否出現(xiàn)感受態(tài)是由其遺傳性決定的,但受環(huán)境條件的影響也很大,因而表現(xiàn)差別很大。 感受態(tài)因子: 調節(jié)感受態(tài)的一類特異蛋白,它包括三種主要成分:膜相關 DNA結合蛋白、細胞壁自溶素和幾種核酸酶。 自然感受態(tài)與人工感受態(tài)的不同? 自然感受態(tài) 的出現(xiàn)是細胞一定生長階段的生理特性 (如肺炎鏈球菌的感受態(tài)出現(xiàn)在對數(shù)生長期) 受細菌自身的基因控制 人工感受態(tài) 則是通過人為誘導的方法,使細胞具有 攝取 DNA的能力,或人為地將 DNA導入細胞內。 ( 該過程與細菌自身的遺傳控制無關! ) 進行自然轉化,需要二方面必要的條件: ( 1)建立了 感受態(tài)的受體細胞 ( 2)外源游離 DNA分子 感受態(tài)的機理研究: 局部原生質體化假說: 處于感受態(tài)的細胞局部失去了細胞壁,使外源 DNA能順利經(jīng)膜進入菌體。 酶受體假說: 受體細胞表面出現(xiàn)了一種能結合 DNA并使之進入細胞的酶。 2. 轉化模型 ( 1) 轉化因子 本質是離體的 DNA片斷或質粒 DNA 。 轉化因子進入細胞前還會被酶解成更小的片段 , 約 8kb。 在不同的微生物中 , 轉化因子的形式不同 , dsDNA,ssDNA. 革蘭氏陰性的嗜血桿菌中 , 細胞只吸收 dsDNA形式的轉化因子 , 但進入細胞后需經(jīng)酶解為 ssDNA, 才能與受體菌的基因組整合; 革蘭氏陽性的鏈球菌和芽孢桿菌中 , dsDNA的一條鏈必須在胞外降解 , 只有 ssDNA形式的轉化因子才能進入細胞 。 但不管何種情況 , 最易與細胞表面結合的仍是 dsDNA。 由于每個細胞表面能與轉化因子相結合的位點有限 ( 如肺炎鏈球菌約 10個 ) , 因此 , 從外界加入無關的 dsD
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