法學]第五章分子熒光分析法(編輯修改稿)
2025-02-08 14:57 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 吸電子基，使熒光減弱甚至熄滅 （ 4） 剛性平面結(jié)構(gòu)：可降低分子振動 ， 減少與溶劑的相互作用 ， 故具有很強的熒光 。 如熒光素和酚酞有相似結(jié)構(gòu) ， 熒光素有很強的熒光 ， 酚酞卻沒有 。 四、熒光強度與熒光物質(zhì)濃度的關(guān)系 a b cII F ??KcI F ?稀溶液 五、影響熒光強度的因素 2. 溶劑的影響 除一般溶劑效應(yīng)外 ， 溶劑的極性 、 氫鍵 、 配位鍵的形成都將使化合物的熒光發(fā)生變化 。 3. 溶液 pH 對酸堿化合物 ， 溶液 pH的影響較大 ， 需要嚴格控制 。 1. 溫度的影響 熒光強度對溫度變化敏感 ， 溫度增加 ， 外轉(zhuǎn)換去激活的幾率減少 ， 增加熒光效率 ， 從而增加熒光強度 。 ?pH值 N H 3 + N H N H 2 O HO H H +H + pH2 pH7~12 pH13 弱酸、弱堿 藍色熒光 4. 散射光： 瑞利散射光 ：選擇適當?shù)臒晒鉁y定波長或選用濾光片可消除 拉曼散射光 ：選擇適當激發(fā)波長的方法消除 一部分光由于光子與物質(zhì)分子的相互碰撞，使光子的運動方向發(fā)生改變而向不同方向散射。 硫酸奎寧在不同激發(fā)波長下的熒光 (a)與拉曼光譜 (b) 熒光光譜 拉曼光譜 瑞利光 320nm 拉曼光 360nm 拉曼光 400nm 熒光 448nm 激發(fā) 320nm 激發(fā) 350nm 瑞利光 350nm 5. 熒光熄滅 熒光熄滅（熒光猝滅）： 由于熒光物質(zhì)分子與溶劑分子或其它溶質(zhì)分子碰撞而引起 熒光強度降低 或熒光強度與濃度不呈線性關(guān)系的現(xiàn)象。 熒光熄滅劑 ：引起熒光熄滅的物質(zhì)。 如鹵素離子、重金屬離子、氧分子及硝基化合物、羰基、羧基化合物均為常見的熒光熄滅劑。 熒光自熄滅： 熒光物質(zhì)濃度超過 1g/L時，增加熒光分子間碰撞幾率而產(chǎn)生的熒光熄滅現(xiàn)象。 熒光熄滅法： 利用 熒光物質(zhì)熒光強度的減弱與熒光熄滅劑的濃度呈線性關(guān)系 測定熒光熄滅劑含量的方法。 (濃度限量 1?g~1mg/ml) 930型熒光計光路示意圖 激發(fā)濾光片 發(fā)射濾光片 ? 第二節(jié) 熒光分析儀器 一 . 主要組成及部件的功能 熒光分光光度計工作原理基及儀器結(jié)構(gòu)框圖 光源 氙燈 激發(fā)單色器 樣品池 光電倍增管 數(shù)據(jù)處理 儀器控制 光源 樣品池 激發(fā) 單色器 檢測器 數(shù)據(jù)處理 儀器控制 發(fā)射 單色器 發(fā)射單色器 問題： 熒光分光光度計與紫外 可見分光光度計有何異同點 ？ ?熒光分析
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