【文章內(nèi)容簡介】 , 下列各項中 , D 是不正確的。 A. 電鏡用的是電子束 , 而不是可見光 B. 電鏡樣品要在真空中觀察 , 而不是暴露在空氣中 C. 電鏡和光鏡的樣品都需要用化學(xué)染料染色 D. 用于電鏡的標(biāo)本要徹底脫水 , 光鏡則不必 C 來進(jìn)行觀察。 A. 相差顯微鏡 B. 熒光顯微鏡 C. 倒置顯微鏡 D. 普通光學(xué)顯微鏡 D 。 A. 核糖體 B. 線粒體 C. 未破碎的 D. 微粒體細(xì)胞核 D 。 ? D A. 光源的波長λ B. 物鏡的鏡口角α C. 介質(zhì)的折射率 n D. 放大倍數(shù) 四、問答題 1．動物體細(xì)胞克隆有什么意義 ? 答：動物體細(xì)胞克隆技術(shù)的成功對生命科學(xué)的發(fā)展具有重要的推動作用，不僅證明了動物的體細(xì)胞具有全能性， 而且有巨大的應(yīng)用前景。例如結(jié)合轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)藥物?，F(xiàn)在很多藥物如胰島素、生長激素、表皮生長因子等都是動物細(xì)胞體內(nèi)正常的代謝物，某些病人由于產(chǎn)生這些物質(zhì)的功能發(fā)生缺陷，導(dǎo)致了相應(yīng)疾病的發(fā)生，目前的治療方法就是給這些病人注射這類藥物。由于這類藥物本身是來自動物的某些臟器，制備這種藥物就需要大量 的動物提供臟器，因此成本就很高，如果通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)把相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)入到哺乳動物，讓動物的乳汁生產(chǎn)具有療效的蛋白質(zhì)就會降低成本，再結(jié)合動物體細(xì)胞克隆技術(shù)，將這種轉(zhuǎn)基因動物大量無性繁殖克隆，就可以大大提高產(chǎn)量，大幅度降低成本，同時也保證了所轉(zhuǎn)基因的穩(wěn)定。該項技術(shù)也可以生產(chǎn)供動物本身和人類器官移植的動物， 解決器官捐贈長期缺乏的問題。另外，動物體細(xì)胞克隆技術(shù)在基因結(jié)構(gòu)和功能、基因治療、遺傳病及人類衰老等的研究方面都具有巨大的潛力。 2．什么是細(xì)胞培養(yǎng)， 應(yīng)注意哪些問題 ? 答：在體外模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，培養(yǎng)從機(jī)體中 取出的細(xì)胞，并使之生存和生長的技術(shù)為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中最有價值的技術(shù)，通過細(xì)胞培養(yǎng)可以獲得大量的細(xì)胞，也可通過細(xì)胞培養(yǎng)研究細(xì)胞的運(yùn)動、細(xì)胞的信號傳導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝等。細(xì)胞培養(yǎng)的突出特點(diǎn)是在離體條件下觀察和研究細(xì)胞生命活動的規(guī)律。培養(yǎng)中的細(xì)胞不受體內(nèi)復(fù)雜環(huán)境的影響，人為改變培養(yǎng)條件 (如物理、化學(xué)、生物等外界因素的變化 )即可進(jìn)一步觀察細(xì)胞在單因素或多因素的影響下的生理功能變化。然而，細(xì)胞在體外環(huán)境的局限性，又使細(xì)胞的形態(tài)與功能不能與體內(nèi)的同類細(xì)胞完全等同。 體外培養(yǎng)細(xì)胞必需注意三 個環(huán)節(jié)∶物質(zhì)營養(yǎng)、生存環(huán)境和廢物的排除。 體外培養(yǎng)細(xì)胞所需的營養(yǎng)是由培養(yǎng)基提供的。培養(yǎng)基通常含有細(xì)胞生長所需的氨基酸、維生素和微量元素。一般培養(yǎng)細(xì)胞所用的培養(yǎng)基是合成培養(yǎng)基，它含有細(xì)胞生長必需的營養(yǎng)成分，但是在使用合成培養(yǎng)基時需要添加一些天然成分，其中最重要的是血清，以牛血清為主。這是因為血清中含有多種促細(xì)胞生長因子和一些生物活性物質(zhì)。 由于血清中含有一些不明成分，對于特殊目的細(xì)胞培養(yǎng)是不利的。為此，研究人員正在探索無血清培養(yǎng)細(xì)胞的條件，并已經(jīng)取得一些進(jìn)展。由于機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞生長通常需要不同的細(xì)胞因子進(jìn)行調(diào)節(jié) ，所以在無血清培養(yǎng)時仍然需要添加必要的因子，包括：促細(xì)胞生長因子 (如 EGF)、促貼附物 (如層粘連蛋白 )和其它活性物質(zhì) (如轉(zhuǎn)鐵蛋白 )。無血清培養(yǎng)排除了有血清培養(yǎng)時血清中不明因素的干擾，使實(shí)驗結(jié)果更加可靠。 體外細(xì)胞培養(yǎng)必需模擬體內(nèi)細(xì)胞生長的環(huán)境。環(huán)境因素主要是指∶無菌環(huán)境、合適的溫度、一定的滲透壓和氣體環(huán)境。氣體主要有兩種∶ O2 和 CO2。后者對于維持細(xì)胞培養(yǎng)液的酸堿度十分重要。 活體內(nèi)生長的細(xì)胞所產(chǎn)生的代謝物和廢物通過一定的系統(tǒng)進(jìn)行利用和排除。體外培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生的代謝物和廢物積累在培養(yǎng)液中，所以定期更換培養(yǎng)液， 對于體外細(xì)胞培養(yǎng)也是至關(guān)重要的。 3．什么是細(xì)胞系和細(xì)胞株 ? 答：原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后即為細(xì)胞系 (cell line)， 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數(shù)有限， 可稱為有限細(xì)胞系 (finite cell line)， 如可以連續(xù)培養(yǎng)， 則稱為連續(xù)細(xì)胞系 (continuous cell line)， 培養(yǎng) 50 代以上并無限培養(yǎng)下去。 從一個經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系由單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群稱細(xì)胞株 (cell strain)。所以細(xì)胞株是通 過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講，可培養(yǎng)到 4050 代。 4．何謂乳腺生物反應(yīng)器， 它的出現(xiàn)有什么意義 ? 答：乳腺生物反應(yīng)器是根據(jù)細(xì)胞生物學(xué)中蛋白質(zhì)合成與分選的機(jī)理，結(jié)合基因工程技術(shù)、動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)等，利用動物的乳腺分泌某些具有重要價值的基因產(chǎn)物。 乳腺生物反應(yīng)器是一項綜合技術(shù)，發(fā)展乳腺生物反應(yīng)器不僅需要基因工程技術(shù)，也需要動物胚胎技術(shù)，轉(zhuǎn)基因技術(shù)，蛋白質(zhì)提純技術(shù)和常規(guī)畜牧技術(shù)。乳腺生物反應(yīng)器有特殊優(yōu)點(diǎn)。乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥品，基本上是一個畜牧業(yè) 過程。 表 31 電鏡與光鏡的比較 利用樣品對光的吸收形成明暗反差和顏色變化 要求真空 不要求真空 玻璃透鏡 玻璃透鏡 可 見光（ 400700） 紫外光 （約 200nm) 200nm LM FM 成像原理 真空 透鏡 光源 分辨本領(lǐng) 顯微鏡 問答： （ 1）、電鏡為何要求一定的真空度？ 答：如果含有很多的其它分子，會與電子發(fā)生 碰撞 ，使電子散射，引起眩光，影響成像質(zhì)量；碰撞也會使電子束 不穩(wěn)定 ，產(chǎn)生閃爍現(xiàn)象；灼熱的燈絲遇氣體也 易腐蝕和斷裂 。 （ 2）、電鏡為何要有記錄系統(tǒng)？ 電子成像。肉眼無法觀察帶有“樣品信息”的電子束 第四章 細(xì)胞質(zhì)膜 一、名詞解釋 1. 脂質(zhì)體 (liposome): 是根據(jù)磷脂分子可在水相中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的趨勢而制備的人工膜，脂質(zhì)體中可以裹入不同的藥物或酶等具有 特殊功能的生物大分子。 2. 流體鑲嵌模型 (fluid mosaic model)。 主要強(qiáng)調(diào)： ，膜脂和膜蛋白均可側(cè)向運(yùn)動 3. 細(xì)胞膜 (cell membrane): 又稱質(zhì)膜，是指圍繞在細(xì)胞最外層，由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成的生物膜。 4. 去垢劑 (detergent): 是一端親水一端疏水的兩性小分子，是分離與研究膜蛋白的常用試劑。 5. 膜內(nèi)在蛋白 (integral proteins): 又稱整合蛋白，多數(shù)為跨膜蛋白，與膜緊密結(jié)合。 6. 細(xì)胞外被 (cell coat): 又稱糖萼，曾用來指細(xì)胞膜外表面覆蓋的一層粘多糖基質(zhì)，實(shí)際上細(xì)胞外被中的糖與細(xì)胞膜的蛋白分子或脂質(zhì)分子是共價結(jié)合的 ,形成糖蛋白和糖脂，所以，細(xì)胞外被應(yīng)是細(xì)胞膜的正常結(jié)構(gòu)組分，它不僅對膜蛋白起保護(hù)作用，而且在細(xì)胞識別中起重要作用。 7. 細(xì)胞外基質(zhì) (extracellular matrix): 是指分布于細(xì)胞外空間 ,由細(xì)胞分泌的蛋白和多糖所構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。細(xì)胞外基質(zhì)將細(xì)胞粘連在一起構(gòu)成組織，同時，提供一個細(xì)胞外網(wǎng)架，在組織中或組織之間起支持作用。 8. 透明質(zhì)酸 (hyaluronic acid): 是一種 重要的糖胺聚糖，是增殖細(xì)胞和遷移細(xì)胞胞外基質(zhì)的主要成分，尤其在胚胎組織中。 9. 細(xì)胞連接 (cell junctions): 是多細(xì)胞有機(jī)體中相鄰細(xì)胞之間通過細(xì)胞質(zhì)膜相互聯(lián)系，協(xié)同作用的重要組織方式。 10. 細(xì)胞粘著 : 11. 整聯(lián)蛋白家族（ integrin）： 在細(xì)胞識別的基礎(chǔ)上，同類細(xì)胞發(fā)生聚集，形成細(xì)胞團(tuán)或組織的過程。 12. 連接子（ connexon） : 構(gòu)成間隙連接的基本單位。 13. 免疫球蛋白超家族的 CAM（ Ig— superfamily） : 分子結(jié)構(gòu)中具有與免疫球蛋白類似的結(jié)構(gòu)域的 CAM 超家 族。 二、選擇題 1. 膜脂的主要成分包括 D 。 ①磷脂 ②糖脂 ③膽固醇 ④中性脂質(zhì) A.① B.② C.①② D.①②③④ 2. 膜脂分子有 4 種運(yùn)動方式，其中生物學(xué)意義最重要的是 .A 。 3. 與細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)接觸的膜面稱為質(zhì)膜的 B 。 4. 細(xì)胞外被又稱 .D 。 5. A 是胞外基質(zhì)最基本成分之一。 6. 原膠原是由（ C ）條多肽鏈盤旋成的三股螺旋結(jié)構(gòu)。 7. 膠原纖維具有很高的抗張力強(qiáng)度，特別是（ A ）型膠原。 A.Ⅰ B.Ⅱ C.Ⅲ D.Ⅳ 8. C 是各種動物胚胎及成體組織的基膜的主要結(jié)構(gòu)組分之一。 9 C 能促進(jìn)細(xì)胞遷移。 10. 個體發(fā)生中出現(xiàn)最早的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白是 B 。 11. C 可以與多種生長因子結(jié)合，作為胞外激素富集與貯存庫。 12. 緊密連接存在于 C 。 胞間 13. 能夠封閉細(xì)胞間隙的連接是 B 。 14. 能夠使細(xì)胞錨定靜止又能誘導(dǎo)細(xì)胞運(yùn)動遷移的是 D 。 15. 參與粘著斑形成的是 A 。 A. 纖連蛋白 16. 上皮細(xì)胞與基質(zhì)的連接是 B 。 17. 下列物質(zhì)能夠通過縫隙連接的是 B 。 ①礦物質(zhì) ②蛋白質(zhì) ③氨基酸 ④維生素 ⑤多糖 A.①⑤ B.①③④ C.①③⑤ D.②④ 18. 影響縫隙連接通道開閉的因素有 D 。 ① pH ② Ca2+濃度 ③膜電位 ④細(xì)胞受損 ⑤連接蛋白變構(gòu) A.①② B.①②③ C.①②③④ 19. 依賴縫隙連接完成的生命活動有 C 。 ①神經(jīng)元間的電突觸處沖動傳導(dǎo)②細(xì)胞吞噬③心肌收縮④細(xì)胞分裂⑤小腸平滑肌蠕動 A.①② B.②④⑤ C.①③⑤ 20. 體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞的貼壁生長與 D 有關(guān)。 A 橋粒 21. 白細(xì)胞是通過 B 粘著因子的作用滾動式地集中到炎癥發(fā)生部位。 22. 細(xì)胞粘著中完全不依賴于 Ca2+的是 C 。 三、判斷題 1. 膜周邊蛋白與生物膜結(jié)合得比膜內(nèi)在蛋白更緊密。 （ ） 2. Triton X100 常用來使細(xì)胞膜的通透性增加，它是離子型去垢劑。 （ ） 3. 通常細(xì)胞不直接與Ⅳ型膠原或蛋白聚糖結(jié)合，而是通過層粘連蛋白將細(xì)胞錨定于基膜上。 （ √ ） 4. 層粘連蛋白是高分子量糖蛋白。 （ ） 5. 纖連蛋白的主要功能是介導(dǎo)細(xì)胞粘著 。 （ √ ） 6. 層粘連蛋白促進(jìn)細(xì)胞遷移。 （ ） 7. 彈性纖維與膠原纖維共同存在，分別賦予組織以彈性及抗張性。 （ √ ） 8. 彈性蛋白是高度親水的非糖基化蛋。 （ ） 9. 植物細(xì)胞壁也含有少量糖蛋白。 （ √ ） 四、填空題 1. 生物膜的基本特征是 流動性 _、 不對稱性 _。 2. 跨膜結(jié)構(gòu)域含較多氨基酸殘基的膜內(nèi)在蛋白的二級結(jié)構(gòu)為 α螺旋 ，它也可能是多數(shù)跨膜蛋白的共同特征。 3. 膜蛋白的功能有 運(yùn)輸 _、 識別 _、 酶活性 _、 細(xì)胞連接 、 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) _與骨架和胞外基質(zhì)的連接。 4. 常用來分離研究膜蛋白，使細(xì)胞膜崩解的試劑是 去垢劑 。 5. 與人紅細(xì)胞表面 ABO 血型相關(guān)的膜脂是 糖脂 。 6. 影響膜脂流動性的因素有 脂肪酸長度 、 脂肪酸飽和度 、 溫度 、 膽固醇含量 。 7. 膠原 是動物體內(nèi)含量最豐富的蛋 白，約占人體蛋白總量的 30%以上。 8. 膠原是細(xì)胞外基質(zhì)中最主要的 水不溶性 _纖維蛋白。 9. 膠原纖維的基本結(jié)構(gòu)單位是 原膠原 。 10. 糖胺聚糖是由重復(fù)的二糖單位構(gòu)成的長鏈多糖，其二