【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 已知的有效藥物、有效療法或公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)療法作對(duì)照。 ? 在實(shí)驗(yàn)室研究中常用于某種新檢驗(yàn)方法是否能代替?zhèn)鹘y(tǒng)方法的研究。 自身對(duì)照 ? 在同一個(gè)體身上觀察實(shí)驗(yàn)處理前后某種指標(biāo)的變化，即把實(shí)驗(yàn)處理前的觀察指標(biāo)作為實(shí)驗(yàn)處理后同一指標(biāo)變化的對(duì)照，可有效減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)處理反應(yīng)的影響。 ? 例如：機(jī)體對(duì)稱部位自身對(duì)照： 研究某治療燒傷新藥的療效，就可選用有對(duì)稱部位被燒傷(如雙前肢或雙后肢等 )的受試對(duì)象，一部位用燒傷新藥，另一部位用其它公認(rèn)有效藥物 隨機(jī)化 (randomization)： 除了處理因素外，其它所有可能產(chǎn)生混雜效應(yīng)的非處理因素在各組中（對(duì)照和實(shí)驗(yàn)組）盡可能保持一致，保證和提高各組的均衡性，也是資料統(tǒng)計(jì)分析時(shí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)推斷的前提。 ? 抽樣隨機(jī) 每一個(gè)符合條件的實(shí)驗(yàn)對(duì)象參加實(shí)驗(yàn)的機(jī)會(huì)相同，即總體中每個(gè)個(gè)體有相同的機(jī)會(huì)被抽到樣本中來(lái)；保證樣本的 代表性 。 ? 分組隨機(jī) 每個(gè)實(shí)驗(yàn)對(duì)象分配到不同處理組的機(jī)會(huì)相同，保證其他因素在對(duì)比組間的 均衡性 。 ? 實(shí)驗(yàn)順序隨機(jī) 每個(gè)實(shí)驗(yàn)對(duì)象接受處理先后的機(jī)會(huì)相同；使實(shí)驗(yàn)順序的影響也達(dá)到 均衡 。 機(jī)會(huì)均等 隨機(jī)化的方法 ? 抽簽或擲硬幣 ? 隨機(jī)數(shù) (random number)： 隨機(jī)數(shù)字表和計(jì)算機(jī) (或計(jì)算器 )的偽隨機(jī)數(shù)發(fā)生器。 ? 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中常用的兩種隨機(jī)化方法：完全隨機(jī)化和分層隨機(jī)化 完全隨機(jī)化 (plete randomization) 直接對(duì)受試對(duì)象進(jìn)行隨機(jī)化分組 (1)編號(hào)：將 n個(gè)受試對(duì)象編號(hào)，動(dòng)物可按體重大小。 (2)取隨機(jī)數(shù)：可從隨機(jī)數(shù)字表或計(jì)算器或計(jì)算機(jī)獲得。每個(gè)受試對(duì)象獲得的隨機(jī)數(shù)可是一位數(shù)，也可是兩位數(shù)或三位數(shù)，一般要求與 n的位數(shù)相同。 (3)確定組別 ：根據(jù)受試對(duì)象獲得的隨機(jī)數(shù)決定受試對(duì)象在哪一組。 分 兩組 可按隨機(jī)數(shù)的奇偶；分 k組 可按隨機(jī)數(shù)除以 k后的余數(shù)進(jìn)行分組 。 完全隨機(jī) 例：試將同性別、體重相近的 15只動(dòng)物分到 A、 B、 C三組 (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12) (13) (14) (15) 88 56 53 27 59 33 35 72 67 47 77 34 55 45 70 B C C A C C B B A B A C A B C 1 2 2 0 2 0 2 0 1 2 2 1 1 0 1 ? 先對(duì)可能影響實(shí)驗(yàn)過(guò)程和結(jié)果的混雜因素進(jìn)行分層，然后在每一層內(nèi)進(jìn)行完全隨機(jī)化。 ? 配對(duì)隨機(jī)化 (paired randomization)和區(qū)組隨機(jī)化 (block randomization)可看成是分層隨機(jī)化的實(shí)際應(yīng)用。 ? 基本步驟： 1. 分層 2. 編號(hào)排序：將每層的受試對(duì)象編號(hào)排序，如體重從輕到重，時(shí)間由前至后等。 3. 取隨機(jī)數(shù)：同樣可從隨機(jī)數(shù)字表或計(jì)算器或計(jì)算機(jī)獲得。 4. 確定組別：根據(jù)每層受試對(duì)象獲得的隨機(jī)數(shù)的 大小順序 決定受試對(duì)象在哪一組。 分層隨機(jī)化 (stratified randomization) ? 例 :為比較四種抗癌藥物 (A, B, C, D)的療效，將小鼠體重作為分層或區(qū)組因素，試分配處理。 表 8 2 小白鼠區(qū)組隨機(jī)化的結(jié)果 分 隨機(jī)數(shù) 隨機(jī)數(shù)序號(hào) 隨機(jī)排列結(jié)果 層 鼠 1 鼠 2 鼠 3 鼠 4 鼠 1 鼠 2 鼠 3 鼠 4 鼠 1 鼠 2 鼠 3 鼠 4 1 81 46 77 61 4 1 3 2 D A C B 2 08 39 74 00 2 3 4 1 B C D A 3 99 24 72 48 4 1 3 2 D A C B ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? b 33 72 15 99 2 3 1 4 B C A D 重復(fù) (repetition)： 是消除非處理因素影響的又一重要手段，重復(fù)的目的是使均數(shù)逼真，并穩(wěn)定標(biāo)準(zhǔn)差，這樣才使統(tǒng)計(jì)量（樣本指標(biāo)）代表參數(shù)（總體指標(biāo)），統(tǒng)計(jì)推斷才具有可靠的前提。重復(fù)程度表現(xiàn)為樣本含量的大小和重復(fù)次數(shù)的多少。 可靠性 ? 整個(gè)實(shí)驗(yàn)的重復(fù) :確保實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性，以提高實(shí)驗(yàn)的可靠性； ? 用多個(gè)受試對(duì)象進(jìn)行重復(fù) ：避免把個(gè)別情況誤認(rèn)為普遍情況，把偶然性或巧合的現(xiàn)象當(dāng)作必然的規(guī)律，通過(guò)一定數(shù)量的重復(fù)，使結(jié)論可信； ? 同一受試對(duì)象的重復(fù)觀察 :保證觀察結(jié)果的精度。例如，血壓一般都測(cè) 3次，以 3次的均數(shù)作為最終結(jié)果。 重復(fù)例數(shù)的決定因素： ?實(shí)驗(yàn)處理效果的明顯性 ?實(shí)驗(yàn)誤差的大小 ?動(dòng)物個(gè)體變異的大小 ?資料性質(zhì) ?第一類誤差 α ?第二類誤差 β ?實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的類型 樣本含量估計(jì)的意義 ? 過(guò)小， 所得指標(biāo)不穩(wěn)定，用以推斷總體的精密度和準(zhǔn)確度差；檢驗(yàn)的功效低，應(yīng)有的差別不能顯示出來(lái)，難以獲得正確的研究結(jié)果，結(jié)論也缺乏充分的依據(jù)。 ? 過(guò)大， 會(huì)增加實(shí)際工作的困難，浪費(fèi)人力、物力和時(shí)間。 重復(fù)例數(shù)的計(jì)算方法： 一般估測(cè)法 ? 小動(dòng)物 (大鼠、小鼠、蛙、魚 )：每組 1030例 ,計(jì)量資料每組不少于 10例 , 計(jì)數(shù)資料每組不少于 30例； ? 中等動(dòng)物 (豚鼠、家兔 ) 每組 820例 ,計(jì)量資料每組不少于 8例 , 計(jì)數(shù)資料每組不少于 20例； ? 大動(dòng)物 (犬、貓、豬、羊等 ) 每組 620例 ,計(jì)量資料每組不少于 6例 , 計(jì)數(shù)資料每組不少于 20例 . 假設(shè)檢驗(yàn)時(shí)通過(guò)公式計(jì)算或查表： 需明確如下指標(biāo)： ① 所比較的兩個(gè)總體參數(shù)間的差值，若無(wú)法得到參數(shù)的信息，可作預(yù)實(shí)驗(yàn)或?qū)I(yè)上公認(rèn)的差值代替； ② 總體標(biāo)準(zhǔn)差，常用預(yù)試的樣本標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)估計(jì)； ③ 第一類誤差的概率 (α )，既檢驗(yàn)水準(zhǔn)； ④ 檢驗(yàn)效能 1－ β 公式： n=2б2(tα+tβ)2/δ2 n為樣本含量， б為標(biāo)準(zhǔn)差； tα取有顯著性的 t分布值， =； tβ為無(wú)顯著性的 t分布值， 1β為實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)?zāi)芰?，?dòng)物實(shí)驗(yàn)一般取 1β=， =； δ為處理組與對(duì)照組均值間的差異，可從預(yù)實(shí)驗(yàn)或文獻(xiàn)資料庫(kù)中獲得。 有些實(shí)驗(yàn)單做一種動(dòng)物還不夠， 應(yīng)當(dāng)重復(fù)做幾種動(dòng)物。這不僅可以比較不同動(dòng)物的差別，而且可以在不同動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)新問(wèn)題，提供新的線索。 如動(dòng)脈粥樣硬化的實(shí)驗(yàn)，不同動(dòng)物在血管的結(jié)構(gòu)、病變、 α和 β脂蛋白的比例以及膽固醇的水平各有不同，這樣不僅可以比較一些不同動(dòng)物病理變化，也可以根據(jù)這些不同的變化尋找生化指標(biāo)與病變形成的關(guān)系，把實(shí)際工作推進(jìn)一步。 由于不同種屬動(dòng)物有不同的功能和代謝特點(diǎn)，所以在 肯定一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)最好采用兩種以上的動(dòng)物進(jìn)行比較觀察， 其中一種應(yīng)該是非嚙齒類動(dòng)物。尤其是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果要外推到人的實(shí)驗(yàn)，所選用的動(dòng)物品種應(yīng)不少于 3種，而且其中之一不應(yīng)是嚙齒類動(dòng)物。常用的生物序列是小鼠 —— 大鼠 —— 犬（小型豬或猴）。 小鼠 大鼠 犬 猴 小型豬 一致性原則： 一個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案的均衡性好壞，關(guān)系到實(shí)驗(yàn)研究的成敗。應(yīng)充分發(fā)揮具有各種知識(shí)結(jié)構(gòu)和背景的人的作用， 群策群力，方可有效地提高實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案的均衡性。 要求實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組除了處理因素不同之外，實(shí)驗(yàn)對(duì)象、實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)環(huán)境、實(shí)驗(yàn)時(shí)間、藥品、儀器、設(shè)備、操作人員等等，均應(yīng)力求一致。即： ① 動(dòng)物： 品系、體重、年齡、性別、飼料和飼養(yǎng)方式等方面一致 ② 環(huán)境： 實(shí)驗(yàn)室溫度、氣壓、濕度、季節(jié)和時(shí)間等環(huán)境條件一致 ③ 儀器： 種類、型號(hào)、靈敏度、精確度、零點(diǎn)漂移、電壓穩(wěn)定性、操作步驟和熟練程度等方面一致 ④ 藥物： 廠商、批號(hào)、純度、劑型、劑量、注射容量和速度、酸堿度、溫度、給藥途徑和給藥順序等方面保持一致。 彈性原則： 即所謂空缺原則，指的是在時(shí)間分配上留有空缺。適當(dāng)?shù)目杖笔欠浅１匾?，只有這樣才能富有彈性的實(shí)施實(shí)驗(yàn)計(jì)劃，并不斷地調(diào)整好自己的實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。 最經(jīng)濟(jì)原則： 不論什么實(shí)驗(yàn)，都有它的最優(yōu)選擇方案，這包括在資金的使用上，也包括人力時(shí)間的損耗上，必要時(shí)可以預(yù)測(cè)一下自己實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)出和投入的比值，這個(gè)比值越大越好，當(dāng)然是以你所擁有的實(shí)驗(yàn)條件為基礎(chǔ)。 四、常用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法簡(jiǎn)介 單組比較設(shè)計(jì)： 是指在同一個(gè)體上觀察處理前后某種觀測(cè)指標(biāo)的變化。又稱為 自身對(duì)照設(shè)計(jì) 。如果施與每個(gè)受試對(duì)象的處理是相互交叉的，又稱為交叉設(shè)計(jì)。自身對(duì)照有 3種形式： ① 對(duì)每個(gè)觀察單位進(jìn)行兩次觀察，第一次觀察不給處理，第二次觀察給予處理，兩次結(jié)果的差值作為實(shí)驗(yàn)效應(yīng) ② 對(duì)每個(gè)觀察單位進(jìn)行兩次觀察，第一次是處理 A，第