核醫(yī)學(xué)放射性標(biāo)記化合物(編輯修改稿)
2025-02-04 10:53 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 截面； ③ 加入催化劑 ， 提高比活度 。 24 催化交換法標(biāo)記 ： 將氚化溶液加入催化劑與待標(biāo)記物進(jìn)行反應(yīng)。 氚標(biāo)化學(xué)合成法： 適合于含前體的化合物，先用氧化劑使之脫氫制成不飽各前體。然后操作如下：前體（如烯烴、炔烴等） + 氚氣 — 氚標(biāo)化合物 催化鹵素置換法： 氚易在催化條件下與溴、碘原子發(fā)生置換反應(yīng)。 氚化金屬還原法： 定位標(biāo)記。 氚標(biāo)生物化成法： 將氚標(biāo)化合物經(jīng)酶促作用，轉(zhuǎn)化為另外一種氚標(biāo)記化合物。 25 四、一般實(shí)驗(yàn)室常用核素標(biāo)記 （ 一 ） 放射性碘標(biāo)記物的一些概念 125I的特性： ① 半衰期適中 ， 商品化 ， 易貯存 ，處理容易 。 ② 類似低能 γ 射線 ， 易測(cè)量 ， 輻射自分解小 ， 標(biāo)記物穩(wěn)定性好 。 125I蛋白質(zhì) 、 多肽 的放射性碘標(biāo)技術(shù)：標(biāo)記部位在絡(luò)氨酸殘基苯環(huán)上的氫 （ 氫被碘替代 ） 。 26 影響因素 ① 蛋白質(zhì)分子中絡(luò)胺酸殘基的數(shù)量及他們分子中暴露程度 。 ② 碘化物的用量 ， 反應(yīng)條件（ PH、 溫度 、 反應(yīng)時(shí)間 ） 、 氧化劑的性質(zhì) 。 （ 二 ） 碘標(biāo)記方法及分類： 氯胺 T法： CHT叫 N氯代對(duì)甲苯磺酰胺鈉鹽，為溫和氧化劑。它在水中產(chǎn)生次氯酸，次氯酸可使碘離子變?yōu)榈夥肿?125I2, 125I2可心置換酪氨酸殘基苯環(huán)上的 H，而加入偏重亞硫酸鈉可中止氧化反應(yīng)。 標(biāo)記原理 28 5微克人生長(zhǎng)激素+74MBqNa125I+100微克CHT反應(yīng)一分鐘， 200微克 Na2S2O5 終止反應(yīng)，然后分離純化即可。 29 本法優(yōu)點(diǎn)： 效率高 ， 重復(fù)性好 ， 試劑價(jià)格低易得 ， 是常用碘標(biāo)法 。（ 注意標(biāo)記物是混合物 ） 分離方法：透析或凝膠過(guò)濾 。 30 CHT標(biāo)記實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意的問(wèn)題 ①氯胺 T臨時(shí)配制； ②氯胺 T用量要適宜，過(guò)大免疫活性和生物活性低，反之，標(biāo)記率低； ③加入氯胺 T后盡快混勻； ④反應(yīng)時(shí)間： 024℃ ， 1分鐘左右； ⑤反應(yīng)終止： 偏重亞硫酸鈉，約 CHT量； ⑥反應(yīng)體積小，使微量蛋白質(zhì)保持高濃度，保證碘化效應(yīng)。 ⑦ PH值，根據(jù)不同的蛋白決定（ ）。 31 乳過(guò)氧化物酶法： 乳過(guò)氧化物酶有促進(jìn)微量過(guò)氧化氫對(duì) 125I的氧化作用生成 125I2， 并標(biāo)記在蛋白質(zhì)酪氨酸分子上 。 本法應(yīng)該注意：反應(yīng)條件溫和 ， H2O2只需要極低濃度 （ 1 103 mM） 因而通常能保持標(biāo)記化合物原有的生物活性和免疫活性 。 缺點(diǎn) ： 標(biāo)記率低， 2040% 32 聯(lián)接標(biāo)記法 ： 先用 Na125I和氧化劑 （ CHT）碘化 ?；瘎?3(對(duì) 羥基苯 )丙酸 N琥珀亞胺酯 （ BoltonHunter試劑或 BH） 再與蛋白質(zhì)分子中的游離氨基酸相結(jié)合引入蛋白質(zhì)中 。 33 優(yōu)點(diǎn)： ① 避免蛋白質(zhì)與氧化劑的接觸； ② 避免蛋白質(zhì)與放射性碘的直接接觸； ③ 防止碘源中有害物質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)的損傷； ④ 適用于標(biāo)記缺乏酪氨酸的蛋白質(zhì)或酪氨酸在活性中心 ， 引入碘原子后會(huì)引起蛋白質(zhì)的失活 。 缺點(diǎn) ： 操作麻煩 ， 二步反應(yīng) ， 引入異物 ， 放射性碘利用率受一定影響 。 34 固相氧化法 （ Iodogen） Iodogen 在一定 PH及溫度范圍內(nèi)使用 ， 在水中溶解度極小 。 將 Iodogen的二氯甲烷溶液放入反應(yīng)管中或涂在小破片上 ， 微微加熱 ， 使
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1