血清學(xué)反應(yīng)ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 17:00 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 。 此法在獸醫(yī)臨床上用于蛋白質(zhì)定量實(shí)驗(yàn) 。 2/2/2022 25 4．雙向瓊脂擴(kuò)散（瓊擴(kuò)） 此法系采用 1%瓊脂倒于平皿或玻片上，制成凝膠板，可按需要打孔。將抗原、抗體分別滴入孔內(nèi)，放臵濕盒中，在 37?C濕箱中2472h后觀察。在抗原與抗體孔間形成沉淀帶。每一種抗原成分出現(xiàn)一條沉淀帶。 2/2/2022 26 結(jié)果判斷： 如兩個(gè)相鄰孔之間抗原相同，則沉淀帶融合；抗原則不同，則互相交叉；部分相同則部分融合，另外不同部分則交叉。 2/2/2022 27 特點(diǎn)： 簡(jiǎn)便、敏感性低、耗時(shí)、應(yīng)用最廣 用途： 常用于細(xì)菌、病毒的鑒定，抗血清效價(jià)的測(cè)定，抗原組分的分析及傳染病的診斷等，如馬傳染性貧血病的診斷。 2/2/2022 28 第三節(jié) 凝集試驗(yàn) 細(xì)菌 、 紅細(xì)胞等顆粒狀態(tài)的抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合后 ， 在電解質(zhì)存在時(shí)相互凝集成絮片狀團(tuán)塊 ， 這種試驗(yàn)稱為凝集試驗(yàn)（ Agglutiation test） 。 參與反應(yīng)的抗原叫凝集原；參與反應(yīng)的抗體稱為凝集素 ， 主要有 IgG、 IgM。 凝集實(shí)驗(yàn)有直接凝集試驗(yàn)和間接凝集試驗(yàn)兩種 。 2/2/2022 29 基本原理： 生理鹽水 顆粒性抗原 + 相應(yīng)抗血清 顆粒凝集 (細(xì)菌 、 紅細(xì)胞 ) 比例適合 凝集原 凝集素 過多 后帶現(xiàn)象 （ 稀釋血清 ） 2/2/2022 30 一、直接凝集試驗(yàn) 顆粒性抗原與相應(yīng)抗體在電解質(zhì)的參與下，直接結(jié)合，凝集成團(tuán)的現(xiàn)象，稱直接凝集試驗(yàn)。按其操作方法可分為玻片發(fā)和試管法。 2/2/2022 31 1．玻片凝集試驗(yàn) 將已知的抗血清 12滴，滴于清潔玻片上，取待檢菌液（抗原）加于其上，混合均勻，數(shù)分鐘后可出現(xiàn)顆粒狀或絮片狀凝集，謂之陽(yáng)性反應(yīng)。 特點(diǎn)： 簡(jiǎn)單、快速 用途： 定性，細(xì)菌鑒定、血型鑒定。如用已知的沙門氏菌血清，鑒定沙門氏桿菌的抗原組分以定型。此法也用于畜禽傳染病診斷，如用已知的雞白痢有色平板抗原，檢查雞血清中有無(wú)相應(yīng)抗體，進(jìn)行雞白痢檢疫 2/2/2022 32 2．試管凝集試驗(yàn) 是一種定性與定量相結(jié)合的方法 。 試驗(yàn)時(shí)用一列試管 ， 將待檢血清用 %石炭酸生理鹽水作 10倍遞進(jìn)稀釋 ， 每管維持量為 ， 一管不加血清作對(duì)照 。 每管中加入一定濃度的抗原 ， 混合均勻 ， 在 37?C或室溫下靜臵數(shù)小時(shí) ， 觀察液體的亮度及沉淀物 ， 視不同的凝集程度記錄為 ++++（ 100%菌體凝集 ） ，+++（ 75%凝集 ） ， +（ 25%凝集 ） 。 2/2/2022 33 凡能與一定量抗原發(fā)生 50%凝集 （ ++） 的血清最高稀釋度 ， 為血清的凝集價(jià)或效價(jià)（ 滴度 ） 。 在試驗(yàn)時(shí) ， 必須建立陰性 、 陽(yáng)性血清對(duì)照管 。 特點(diǎn)： 準(zhǔn)確 、 耗時(shí) 用途： 診斷布氏桿菌病 ， 測(cè)定抗體的凝集價(jià)(定量 ) 2/2/2022 34 二 、 間接凝集試驗(yàn) 基本原理： 可溶性抗原 +惰性載體 （ 聚苯乙烯乳膠微粒 、炭粒 、 綿羊紅細(xì)胞等 ） 抗原致敏載體 抗原致敏載體 +相應(yīng)免疫血清 (抗體 ) 電解質(zhì) 被動(dòng)載體凝集 (間接乳膠凝集 、 間接炭素凝集 、 間接紅細(xì)胞凝集等 ) 2/2/2022 35 特點(diǎn)： 敏感 (在微量反應(yīng)板中進(jìn)行試驗(yàn) )、 快速 。 用途： 用已知抗原致敏的載體可檢測(cè)血清中的特異抗體及其效價(jià) 。 若用已知免疫血清 （ Ab） 致敏的紅細(xì)胞 ，則可檢測(cè)病毒等可溶性抗原 —— 稱
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