基因工程中的酶ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 09:16 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 G AATTC CTTAA?G 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 3’ 5’ 20 CTGCA?G ② 3’端凸出（如 Pst I切點(diǎn)） G?ACGTC 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ CTGCA G G ACGTC 5’ 3’ 21 與 DNA結(jié)合的限制性內(nèi)切酶 BamH 1的結(jié)構(gòu)。限制性內(nèi)切酶識(shí)別雙鏈 DNA序列 5‘GGATCC3’，并在兩個(gè) GG殘基之間切開(kāi)磷酸二酯鍵。這個(gè)切割形成帶有兩個(gè)有 5‘粘性末端的 DNA片段。這種蛋白質(zhì)是有相同的亞基組成的二聚體。 22 ① 連接便利 （ 5）粘性末端的意義 i）不同的 DNA雙鏈： 只要粘性末端堿基互補(bǔ)就可以連接。 ii）同一個(gè) DNA分子內(nèi)連接： 通過(guò)兩個(gè)相同的粘性末端可以連接成 環(huán)形分子 。 這比連接兩個(gè)平齊末端容易的多。 23 24 ③ 補(bǔ)平成平齊末端 ② 5’末端標(biāo)記 凸出的 5’末端 可用 DNA多核苷酸激酶進(jìn)行 32P標(biāo)記。 粘性末端可以用 DNA聚合酶補(bǔ)平成平齊末端。 25 ?同位酶是具有相同的識(shí)別序列，但酶切位點(diǎn)不同的酶 如 Sma I和 Xma I的識(shí)別序列為 5’CCCGGG3’,但酶切位點(diǎn)不同。 Sma I 5’C↓CCGGG3’, Xma I 5’CCC↓GGG3’, 同位酶 26 同裂酶（ Isoschizomers） ?有一些來(lái)源不同的限制酶識(shí)別的是同樣的核苷酸靶子序列，這類酶稱為同裂酶。同裂酶產(chǎn)生同樣的切割，形成同樣的末端 ? Example: 限制酶 HpaⅡ 和 MspⅠ 是一對(duì)同裂酶 (CCGG) ， 5 C .CGG 3 3 GGC .C 3 27 同尾酶（ Isocaudamer） ?這一類的 限制 酶來(lái)源各異，識(shí)別的靶 序列也不相同，但產(chǎn)生相同的粘性末端。由同尾酶產(chǎn)生的 DNA片段，是能夠通過(guò)其粘性末端之間的互補(bǔ)作用彼此連接起來(lái)的 BamHⅠ G
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