獸藥殘留分析ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 05:56 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 提取。 陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)系 農(nóng)獸藥殘留檢測 ? （二）樣品凈化 ? 在樣品提取步驟獲得的水相或有機(jī)相樣品提取液中待測四環(huán)素類抗生素的濃度可能非常低，而且還可能含有共提取物。如果樣品的最終溶液中含有共提取物，會增加檢測器的背景噪聲，難以檢測痕量濃度水平的待測物質(zhì)。為減少干擾和濃縮待測化合物，初始樣品提取液需要采用進(jìn)一步的凈化步驟，如液一液分配、固相萃取、超濾、免疫親和色譜或在線微量富集技術(shù)。 陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)系 農(nóng)獸藥殘留檢測 ? ? SPE 由于不需要大容量的溶劑，樣品基質(zhì)中的四環(huán)素類抗生素。又省時省力， 固相萃取被廣泛用于分離和凈化生物樣品中的四環(huán)素類抗生素。 ? TCs 具有苯環(huán)、多種活性官能團(tuán)，因此各種如的 SPE 都能用于 TCs 的凈化， SPE 主要包括 C18 柱、陽離子交換柱、苯基 SPE 柱等。 ? 應(yīng)用于分部環(huán)素類抗生素的固相萃取劑主要為 反相 C18 吸附劑 。由于四環(huán)素類抗生素易于和金屬離子鰲合，為避免待測物在過固相萃取柱時的潛在損失，一般先采用 EDTA 對反相固相萃取柱進(jìn)行預(yù)處理。 陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)系 農(nóng)獸藥殘留檢測 ? 液分配 ? 可通過將待測化合物從水相轉(zhuǎn)移到不互溶的有機(jī)相而直接去除基質(zhì)成分。 ? 存在問題：四環(huán)素類化合物由于極性太強(qiáng)，在任何 pH 值都不能被定量轉(zhuǎn)移入不互溶的有機(jī)相。 ? 當(dāng)采用四丁基銨鹽作為離子對試劑時，在 條件下采用二氯甲烷提取土霉素和四環(huán)素的回收率超過 85 ％。 陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)系 農(nóng)獸藥殘留檢測 ? （三）四環(huán)素類獸藥的分析 ? 四環(huán)素類抗生素殘留的測定方法主要包括微生物抑制法、 酶聯(lián)免疫法、分光光度法、薄層色譜法、高效液相色譜法、液相色譜一質(zhì)譜法等。樣品經(jīng)過提取和凈化后，四環(huán)素類抗生素可通過薄層色譜或液相色譜進(jìn)行分離，再采用分光光度、熒光或質(zhì)譜檢測系統(tǒng)進(jìn)行定量浦定。 陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)系 農(nóng)獸藥殘留檢測 ? ? 微生物法是一種傳統(tǒng)的測定四環(huán)素類化合物和其他抗生素的分析方法。 ? 測定原理：是根據(jù)抗生素對其敏感的特定微生物的生長抑制作用 ,通過抑菌圈的大小來進(jìn)行樣品中抗微生物藥物殘留的判斷 (測定抑菌圈直徑，樣品抑菌圈直徑小于陽性對照抑菌圈直徑判定為陰性，否則判定為陽性 )。 陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)系 農(nóng)獸藥殘留檢測 ? 蠟狀芽抱桿菌 ATCC 11778 是一種經(jīng)典的用于分析四環(huán)素類的微生物，其對金霉素的靈敏度為 / L ，對四環(huán)素和土霉素的靈敏度為 / L ，對二甲胺四環(huán)素的靈敏度為 ~ / L 。 ? 相對于其他分析方法，微生物抑制法操作簡便、價格低廉、不需要精密儀器和復(fù)雜的樣品前處理過程，因而適合大量樣品的篩選。 ? 微生物抑制法的最大缺點(diǎn)是不能區(qū)分具體的四環(huán)素種類，因此也難以進(jìn)行定量檢測。 陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)系 農(nóng)獸藥殘留檢測 ? ? 間接酶聯(lián)免疫法 可用來檢測牛奶中的四環(huán)素類抗生素。 ? 四環(huán)素 牛血清白蛋白共軛物 用于抗體制備，同源的四環(huán)素 β 酪蛋白共軛物作為包埋試劑，而羊抗兔 IgG辣根過氧化物酶作為第二抗體。 ? 牛奶樣品經(jīng)離心脫脂，采用磷酸鹽緩沖液至少以 1 :30 的比例進(jìn)行稀釋后，直接采用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行測定，檢測限可達(dá) 5 ug / kg 。 陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)系 農(nóng)獸藥殘留檢測 ? 當(dāng)采用商業(yè)化試劑盒檢測蜂蜜中的四環(huán)素、金霉素和土霉素殘留時發(fā)現(xiàn)其對金霉素具有強(qiáng)烈的交叉反應(yīng)活性。試劑盒對四環(huán)素和金霉素的檢測限均為 15 ug / kg ，但由于所用抗體與土霉素的交叉反應(yīng)活性較低，對土霉素的檢測限為 250 u g / kg ． ? 實驗表明，空白蜂蜜樣品經(jīng)緩沖液稀釋 50 倍已足以消除基質(zhì)干擾。 陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)系 農(nóng)獸藥殘留檢測 ? ? 薄層色譜法（ TLC ）又分為正相薄層色譜（ NPTLC ）和反相薄層色譜（ RP TLC ）。 ? 正相薄層色譜一般使用纖維素、硅膠、硅藻土等作為吸附層?？傮w而言，正相薄層色譜是一種簡單的、
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