腫瘤標志物臨床檢測的基本原則(編輯修改稿)
2025-01-31 15:37 本頁面
【文章內容簡介】 靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。 ?PCR由變形 — 退火 — 延伸三個基本反應步驟構成。 腫瘤研究中的分子生物學檢測 ? 癌癥的病理從分子生物學角度看，主要是多階段，多步驟的累積性的 DNA突變或損失發(fā)生調控細胞分化生長功能的基因所造成的。 ? 一般表現為：原癌基因激活，抑癌基因抑制，妨礙 DNA復制修復的穩(wěn)定性。其 DNA改變可包括：基因突變、缺失、擴增、 DNA重排，非正常基因融合及對 DNA核苷酸修飾等。 ? 除抑癌基因外，還可以研究多種致癌基因，抗腫瘤藥物的耐藥性等多種課題。分子生物學技術可廣泛用于腫瘤的檢測中。 七 .TM測定的影響因素 1． 腫瘤的大小和腫瘤細胞的數量 。 2． 腫瘤細胞合成和分泌腫瘤標志物的速度 3． 腫瘤組織的血供情況 4． 腫瘤細胞是否有壞死和壞死的程度 5. 腫瘤細胞的分化程度和腫瘤的分期 6. 腫瘤細胞是否表達和合成腫瘤標志物 7. 腫瘤標志物在體內的降解和排泄速度 : 1)肝腎功能異常和膽汁淤積等可造成 TM濃度增高。 2）風濕病時 CA199濃度可升高。 3）強烈的治療作用（如手術、放療、化療）和連續(xù)的細胞死亡、腫瘤部位供血障礙等均可導致 TM濃度變化。 4）某些藥物會影響 TM的濃度，如前列腺癌抗雄激素治療可抑制 PSA的產生。 5）直腸和肛檢可致 PSA和 PAP升高。 : 1)血液的稀釋作用可使 TM的陽性率下降 ,如直接采集腫瘤組織或其附近組織分泌的體液進行測定可提高檢測靈敏度和特異性。 2）紅細胞、漿細胞和血小板中存在 NSE，因此未及時分離血清的標本有可能使血清 NSE濃度升高。 3）血清放置于室溫中有些 TM如 PAP可因其不穩(wěn)定而降解。 4） CA153對蛋白酶和神經酰胺酶很敏感，應避免微生物的污染，以免影響測定結果。 5） “ Hook”效應的影響。 6）同一病人甚至同一份血清使用不同的試劑盒測定，有時結果會相差很大。 其原因可能是由于使用的抗體同一抗原的不同位點所致。即使使用完全相同的統(tǒng)一抗體，也可能因抗原的異質性（如原發(fā)腫瘤轉移后，失去了原有的抗原性），影響了結果，造成了假象，這種現象特別容易發(fā)生在療效評價中，尤其在使用前一種試劑盒測定的值作為后一種試劑盒的參考值時。因此用一種新的試劑盒時，應對病人標本進行 2－ 3次的對照測定。 7)異嗜性抗體的影響 :大多數的 TM試劑盒使用兩種鼠的單克隆抗體 ,如血清中出現嗜異性抗體 ,特別是已知的人抗鼠嗜異性抗體時 ,可能在兩種鼠的單抗間起 “ 橋梁 ”作用 ,導致假陽性。避免的辦法是在樣品中事先加入鼠的 IgG,用 PEG沉淀 ,去除嗜異性抗體 ,或進行其他的預處理。 八 .腫瘤標志物的臨床價值評價 （ SE）： 是指該指標的真陽性率或陽性率，或是指腫瘤患者的 TM陽性率； 靈敏度＝真陽性數／真陽性數＋假陰性數 100％ ＝真陽性數／被檢病人總數 100％ 如：在 100例腫瘤病人中檢測結果 70例病人為陽性，則其靈敏度為 70／ 100，即 70％，其中 30例為假陰性。 （ SP）： 是指該指標的真陰性率或陰性率，或是指非腫瘤患者的 TM陰性率； 特異性＝真陰性數／真陰性數＋假陽性數 100％ ＝真陰性數／對照組總數 100％ 如：對 100例對照人群進行檢測，結果發(fā)現 97例為陰性，則其特異性為 97／ 100，即 97％，其中 97例為真陰性， 3例為假陽性。 特異性往往隨著選擇不同的對照組而不同。 (efficiency)或稱準確度 指的是該項指標在全部測定人群中真陽性與真陰性之和所占全部測定人數的比率。反映該 TM能準確區(qū)分腫瘤與非腫瘤患者的能力 . 準確度 =真陽性數 +真陰性數 /測定總人數 （ positive predictive value , PPV）： 是指 TM陽性時該患者患腫瘤的可能性有多大； 陽性預測值（ PPV)＝真陽性數／真陽性數＋對照組假陽性數 100％ 如：在對 100例病人的檢測中， 70例為陽性結果，而在對 100例對照人群檢測中， 5例為陽性結果，則其 PPV為 70／（ 70＋ 5） 100％，即為 ％。 （ negative predictive value , NPV）： 是指 TM陰性時不患腫瘤的可能性有多大 . 陰性預測值（ NPV）＝真陰性數／真陰性數＋腫瘤組假陰性數 100％ 如：在對 100例對照組人群中， 98例為陰性，對 100例腫瘤病人的檢測中 30例為假陰性結果，則其 NPV值為 98／（ 98＋ 30） 100％，即 ％。 （ positive likelihood ratio） 指該 TM真陽性率與假陽性率之比 ， 反映其正確判斷陽性的可能性是錯誤判斷陽性可能性的倍數 ， 應該越大越好 。 (negative likelihood ratio) 指該 TM假陽性率與真陽性率之比 ， 反映其錯判陰性的可能性是正確判斷陰性可能性的倍數 ， 應該越小越好 。 由此可見， PPV(陽性預測值 )與靈敏度類似；NPV(陰性預測值 )與特異性類似； 不同 的是在PPV和 NPV的指標中包含了各自的對照組人群中的數據，因此更客觀的反映了試驗的可信程度。 PPV與 NPV不僅與 SE和 SP有關，還與人群的患病率有關； 某一 TM的 SE、 SP、 PPV、 NPV不是固定不變的 ， 而是依賴于選定的臨界值； （ ROC)的應用 正常參考值：來自于一組對照人群的均值并考慮到其標準差。 臨界值：根據客觀標準確診為病人和正常對照組二組人群所確定的。 九 .TM的臨床應用 ： 迄今為止還沒有一種理想的 TM，因此使TM用于普查受到限制。 :TM基本上不能對腫瘤進行定位，因為絕大多數 TM都無器官特異性，只有極少數 TM如PSA、 PAP具有器官特異性，但這些指標卻又不具備腫瘤特異性。 ： 任何一種 TM都存在假陽性和假陰性的問題，因此單憑 TM的測定值通常不能對腫瘤進行確診 。 ： 大多數 TM與疾病的分期有關，且濃度與腫瘤的大小或分期有關系。如結腸癌 CEA濃度與腫瘤大小有關、幾乎所有的 TM在腫瘤晚期時均呈現較高的濃度。但這是總體而言，由于各期 TM的濃度范圍很廣，且互相重疊，因此并不能根據個體測定值來判斷腫瘤的大小，也不能以 TM
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1