【文章內容簡介】 物 PPT，歡迎收藏分享】網友 55 ウシインスリンの一次構造 目 錄 タンパク質の一次構造はタンパク質の基本の構造である 。これは遺伝子であるDNAの塩基配列によって定められる 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 56 タンパク質の一次構造の決定法 Ⅰ タンパク質の材料の調製 １．タンパク質の分離 ，精製 ２．ポリペプチド鎖の數の決定 ３．ジスルフィド結合の切斷 ４．各ポリペプチド鎖の分離 ，精製 ５．ポリペプチド鎖アミノ酸組成の決定 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 57 Ⅱ ポリペプチド鎖アミノ酸配列の決定 １．ポリペプチド鎖を特定の位置で切斷 してアミノ酸配列決定のできる程度の 斷片にする 。 ２．斷片の分離 ，精製 ３．各斷片のアミノ酸配列の決定 ４．ポリペプチド鎖を上と異なる位置で切 斷し , アミノ酸配列を決定す る。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 58 Ⅲ ポリペプチド鎖全配列の決定 （ペプチド斷片の配列順序の決定 ） １．切斷點の異なる斷片の配列を比較して 全體の配列を決定する 。 ２．ジスルフィド結合 （鎖內と鎖間 ）の決定 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 59 アミノ酸組成の決定 ポリペプチド鎖の加水分解は酸 、アルカリによる化學方法と酵素方法があり ，それぞれ欠點がある 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 60 酸分解 では ポリペプチドを6mol/L HClに溶かして真空にした封管の中で 100120℃ 10100時間加熱する 。しかし Trpは相當破壊され ， GlnとAsnは GluとAsp ＋+NH4 に 変 わ る の で 求 め る の はGlx(Glu+Gln)とAsx(Asp+Asn)及び +NH4である。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 61 アルカリ分解 では 24mol/L NaOHの中で100℃ 48時間行う 。しかし Cys、Ser、Thr、Argが破壊され 、またアミノ酸の一部分は脫アミノ、ラセミを起こす 。したがってアルカリ分解は主として Trpの定量に用いられる 。 酵素による分解 ポリペプチドを完全に酵素で分解するにはいくつかの酵素を混ぜて行う 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 62 アミノ酸配列の決定 N末端分析 ： よく使われるのは Edman分解法 である。 Edman分解法の基本原理 （phenyl isothiocyanate, PITC, Edman試薬 ）を弱アルカリ性溶液でタンパク質の N末端アミノ基に作用させ 、付加する 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 63 ２．この付加體は無水フッ化水素酸 (FH)をはたらかせると N末端殘基がフェニルチオヒダントイン誘導體として離れるが他のペプチド結合は加水分解されない 。つまりN末端アミノ酸殘基だけとれ ，殘りのペプチドはもとのままである 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 64 ３．フェニルチオヒダントインアミノ酸は高圧液體クロマトグラフィ 、電気詠動などで標準物質と比較して同定する 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 65 ペプチド結合の特異的切斷 4080殘基を超えるポリペプチドはそのままでは配列決定できない 。そこで化學的または酵素的に適當な長さに切斷する 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 66 The speficity of some important methods for fragmenting polypeptide chains Treatment Cleavage points Trypsin Lys,Arg (C) Chymotripsin Phe,Trp,Tyr (C) V8 protease Asp,Glu (C) Pepsin Phe,Trp,Tyr (N) Cyanogen bromide Met (C) 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 67 ペプチド斷片の配列順序 ペプチド斷片のアミノ酸配列が決まったら今度斷片の配列順序を調べる 。これは最初の斷片とは違う位置で切斷した異なるペプチド組みの配列を調べ ，重複部分を明らかにすればよい 。重複部分が十分長ければペプチドの順番がわかる 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 70 ジスルフィド結合 の切斷 ジスルフィド結合は過ギ酸酸化か 、β? メルカプトエタノール（β?ME ）で還元で切斷できる 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 72 二 .タンパク質の二次構造 定義 : タンパク質の二次構造 （secondary structure of protein）とは ポリペプチド主鎖の局部的な空間配置をいう 。アミノ酸の側鎖の立體構造に觸れない 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 73 タンパク質 分子 では規(guī)則的に くり返り部分 を主鎖 と呼ぶ 。 つまり 主鎖は α‐ 炭素原子とペプチド結合からなっている 。 … CαCONHCαCONH… 主な化學結合 ： 水素結合 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 74 （一 ）ペプチド結合 平面 ポ?リングとコ?リ?はポリペプチド鎖の中でアミノ殘基やペプチド結合がどのような制約を受けるかを調べるためにアミノ酸とペプチドの構造のＸ線結晶解析を行った 。その結果 ペプチド結合はしっかりした平面構造をとることがわかった 。ペプチド結合 平面はタンパク質ポリペプチド主鎖の基本単位である 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 75 １．ペプチド結合 の長さは がそれは C－N単結合 ( nm)とC＝ N二重結合 ()の中間にある 。したがってペプチド結合は部分的 な二重結合の性質をもって自由に回転できない 。ペプチド炭素と窒素周りの結合の角度の和はいずれも360176。である。そうすれば図のようにすべての六つの原子は同一面に置かれペプチド平面を形成する 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 78 ２．同一平面にある四つの原子はふつう トランス(trans)に位置している 。 ３．ペプチド結合のどちらかの側にある結合はある程度自由回転できる 。 φ ：主鎖の窒素と Cα 原子の間の結合における回転の量 ψ ：Cα とカルボニル炭素の間の結合における回転の量 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 80 二次構造の主なコンホメーションの様式 ?α ?ヘリックス ( ? helix ) ? ??プリ?ツ?シ?ト ( ?pleated sheet ) ? ??タ?ン ( ?turn ) ? ランダムコイル ( random coil ) 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 81 （ 二 ） α ?ヘリックス（α ? helix） 目 錄 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 82 その大切な特徴は次のようになる。 １．右?guī)啢韦椁护螅〞r計回り）を形成する。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 83 ２．らせんの一回りごとに のアミノ酸殘基がある 。各殘基が次の殘基とらせんの軸に沿って 100176?；剀灓筏皮い?。α? ヘリックスのピッチは 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 84 ３．水素結合によって安定化される 。 α? ヘリックスは主鎖のペプチド結合の窒素にくっついた水素原子とカルボニル酸素とで作られた水素結合によって安定化される 。(鎖內 水素結合 ） 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 85 各アミノ酸カルボニル基 (C＝ O)は線狀配列上 4殘基先のアミノ酸の NHと水素結合している 。この間には 13個の原子を含んでいる。 水素結合の方向は大體らせん軸に平行している 。 各アミノ酸の側鎖はらせんの外方に突出する 。 （ 三 ） ??プリ?ツ?シ?ト (? ?pleated sheed) 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 89 β? プリ?ツ?シ?トはかん狀でなく 、薄板であるという點で α? ヘリックスとは顕著に異なっている 。 １．完全に延び切ってひだ狀 （ジクザク狀 ） になる。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 90 ２．水素結合によって安定化される 。 β? プリ?ツ?シ?トは並行する２本以上ポリペプチド鎖あるいは同じペプチド鎖內の両部分からなっている 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網友 91 β? プリ?ツ?シ?トは 異なるポリペプチド鎖中の NHとCO基の間の水素結合によって安定化される 。（鎖間 水素結合 ）