【文章內(nèi)容簡介】 物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 55 ウシインスリンの一次構(gòu)造 目 錄 タンパク質(zhì)の一次構(gòu)造はタンパク質(zhì)の基本の構(gòu)造である 。これは遺伝子であるDNAの塩基配列によって定められる 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 56 タンパク質(zhì)の一次構(gòu)造の決定法 Ⅰ タンパク質(zhì)の材料の調(diào)製 １．タンパク質(zhì)の分離 ，精製 ２．ポリペプチド鎖の數(shù)の決定 ３．ジスルフィド結(jié)合の切斷 ４．各ポリペプチド鎖の分離 ，精製 ５．ポリペプチド鎖アミノ酸組成の決定 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 57 Ⅱ ポリペプチド鎖アミノ酸配列の決定 １．ポリペプチド鎖を特定の位置で切斷 してアミノ酸配列決定のできる程度の 斷片にする 。 ２．斷片の分離 ，精製 ３．各斷片のアミノ酸配列の決定 ４．ポリペプチド鎖を上と異なる位置で切 斷し , アミノ酸配列を決定す る。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 58 Ⅲ ポリペプチド鎖全配列の決定 （ペプチド斷片の配列順序の決定 ） １．切斷點の異なる斷片の配列を比較して 全體の配列を決定する 。 ２．ジスルフィド結(jié)合 （鎖內(nèi)と鎖間 ）の決定 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 59 アミノ酸組成の決定 ポリペプチド鎖の加水分解は酸 、アルカリによる化學方法と酵素方法があり ，それぞれ欠點がある 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 60 酸分解 では ポリペプチドを6mol/L HClに溶かして真空にした封管の中で 100120℃ 10100時間加熱する 。しかし Trpは相當破壊され ， GlnとAsnは GluとAsp ＋+NH4 に 変 わ る の で 求 め る の はGlx(Glu+Gln)とAsx(Asp+Asn)及び +NH4である。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 61 アルカリ分解 では 24mol/L NaOHの中で100℃ 48時間行う 。しかし Cys、Ser、Thr、Argが破壊され 、またアミノ酸の一部分は脫アミノ、ラセミを起こす 。したがってアルカリ分解は主として Trpの定量に用いられる 。 酵素による分解 ポリペプチドを完全に酵素で分解するにはいくつかの酵素を混ぜて行う 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 62 アミノ酸配列の決定 N末端分析 ： よく使われるのは Edman分解法 である。 Edman分解法の基本原理 （phenyl isothiocyanate, PITC, Edman試薬 ）を弱アルカリ性溶液でタンパク質(zhì)の N末端アミノ基に作用させ 、付加する 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 63 ２．この付加體は無水フッ化水素酸 (FH)をはたらかせると N末端殘基がフェニルチオヒダントイン誘導體として離れるが他のペプチド結(jié)合は加水分解されない 。つまりN末端アミノ酸殘基だけとれ ，殘りのペプチドはもとのままである 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 64 ３．フェニルチオヒダントインアミノ酸は高圧液體クロマトグラフィ 、電気詠動などで標準物質(zhì)と比較して同定する 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 65 ペプチド結(jié)合の特異的切斷 4080殘基を超えるポリペプチドはそのままでは配列決定できない 。そこで化學的または酵素的に適當な長さに切斷する 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 66 The speficity of some important methods for fragmenting polypeptide chains Treatment Cleavage points Trypsin Lys,Arg (C) Chymotripsin Phe,Trp,Tyr (C) V8 protease Asp,Glu (C) Pepsin Phe,Trp,Tyr (N) Cyanogen bromide Met (C) 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 67 ペプチド斷片の配列順序 ペプチド斷片のアミノ酸配列が決まったら今度斷片の配列順序を調(diào)べる 。これは最初の斷片とは違う位置で切斷した異なるペプチド組みの配列を調(diào)べ ，重複部分を明らかにすればよい 。重複部分が十分長ければペプチドの順番がわかる 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 70 ジスルフィド結(jié)合 の切斷 ジスルフィド結(jié)合は過ギ酸酸化か 、β? メルカプトエタノール（β?ME ）で還元で切斷できる 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 72 二 .タンパク質(zhì)の二次構(gòu)造 定義 : タンパク質(zhì)の二次構(gòu)造 （secondary structure of protein）とは ポリペプチド主鎖の局部的な空間配置をいう 。アミノ酸の側(cè)鎖の立體構(gòu)造に觸れない 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 73 タンパク質(zhì) 分子 では規(guī)則的に くり返り部分 を主鎖 と呼ぶ 。 つまり 主鎖は α‐ 炭素原子とペプチド結(jié)合からなっている 。 … CαCONHCαCONH… 主な化學結(jié)合 ： 水素結(jié)合 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 74 （一 ）ペプチド結(jié)合 平面 ポ?リングとコ?リ?はポリペプチド鎖の中でアミノ殘基やペプチド結(jié)合がどのような制約を受けるかを調(diào)べるためにアミノ酸とペプチドの構(gòu)造のＸ線結(jié)晶解析を行った 。その結(jié)果 ペプチド結(jié)合はしっかりした平面構(gòu)造をとることがわかった 。ペプチド結(jié)合 平面はタンパク質(zhì)ポリペプチド主鎖の基本単位である 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 75 １．ペプチド結(jié)合 の長さは がそれは C－N単結(jié)合 ( nm)とC＝ N二重結(jié)合 ()の中間にある 。したがってペプチド結(jié)合は部分的 な二重結(jié)合の性質(zhì)をもって自由に回転できない 。ペプチド炭素と窒素周りの結(jié)合の角度の和はいずれも360176。である。そうすれば図のようにすべての六つの原子は同一面に置かれペプチド平面を形成する 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 78 ２．同一平面にある四つの原子はふつう トランス(trans)に位置している 。 ３．ペプチド結(jié)合のどちらかの側(cè)にある結(jié)合はある程度自由回転できる 。 φ ：主鎖の窒素と Cα 原子の間の結(jié)合における回転の量 ψ ：Cα とカルボニル炭素の間の結(jié)合における回転の量 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 80 二次構(gòu)造の主なコンホメーションの様式 ?α ?ヘリックス ( ? helix ) ? ??プリ?ツ?シ?ト ( ?pleated sheet ) ? ??タ?ン ( ?turn ) ? ランダムコイル ( random coil ) 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 81 （ 二 ） α ?ヘリックス（α ? helix） 目 錄 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 82 その大切な特徴は次のようになる。 １．右?guī)啢韦椁护螅〞r計回り）を形成する。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 83 ２．らせんの一回りごとに のアミノ酸殘基がある 。各殘基が次の殘基とらせんの軸に沿って 100176?；剀灓筏皮い?。α? ヘリックスのピッチは 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 84 ３．水素結(jié)合によって安定化される 。 α? ヘリックスは主鎖のペプチド結(jié)合の窒素にくっついた水素原子とカルボニル酸素とで作られた水素結(jié)合によって安定化される 。(鎖內(nèi) 水素結(jié)合 ） 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 85 各アミノ酸カルボニル基 (C＝ O)は線狀配列上 4殘基先のアミノ酸の NHと水素結(jié)合している 。この間には 13個の原子を含んでいる。 水素結(jié)合の方向は大體らせん軸に平行している 。 各アミノ酸の側(cè)鎖はらせんの外方に突出する 。 （ 三 ） ??プリ?ツ?シ?ト (? ?pleated sheed) 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 89 β? プリ?ツ?シ?トはかん狀でなく 、薄板であるという點で α? ヘリックスとは顕著に異なっている 。 １．完全に延び切ってひだ狀 （ジクザク狀 ） になる。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 90 ２．水素結(jié)合によって安定化される 。 β? プリ?ツ?シ?トは並行する２本以上ポリペプチド鎖あるいは同じペプチド鎖內(nèi)の両部分からなっている 。 目 錄 業(yè)精于勤荒于嬉 行成于思毀于隨 → 【醫(yī)學生物 PPT，歡迎收藏分享】網(wǎng)友 91 β? プリ?ツ?シ?トは 異なるポリペプチド鎖中の NHとCO基の間の水素結(jié)合によって安定化される 。（鎖間 水素結(jié)合 ）